猫背中缝核向三叉神经脊束核尾侧亚核的投射——HRP法研究

向6例猫右侧三叉神经脊束核尾侧亚核注入30%HRP溶液,观察和分析背中缝核内出现的标记细胞状况。发现标记细胞较集中于核的中段及稍偏吻侧部,向吻尾方向逐渐减少,靠近尾端部全无标记。标记细胞主要出现于核的腹侧部及两外侧部腹缘处,核的背侧部及外侧部的背侧部分甚少,两侧无差别。标记细胞形态多样,但腹侧部及外侧部腹缘处以梭形细胞为主,此处标记也最多。除背中缝核外,脑干尾侧中缝核群(大中缝核、苍白中缝核、隐中缝核)也出现少量标记细胞。结合文献分析,作者等推论背中缝核向尾侧亚核的投射可能与大中缝核向脊髓后角的投射意义相同,两者之间显示着既有分工又有联系的体部定位关系,即背中缝核以向三叉神经脊束核投射为主,也发出少量纤维向脊髓后角投射;以大中缝核为主的脑干尾侧中缝核群主要投射向脊髓后角,但也发出少量纤维投射于三叉神经脊束核。

外周伤害性刺激后颈髓和三叉神经脊束核尾侧亚核中向中缝背核投射神经元的c-fos表达

中缝背核是内源性镇痛系统中的重要核团之一，为了估价该核与外周伤害性信息的传递与调控之间的关系，文内采用荧光金逆行追踪与 ＦＯＳ免疫荧光标记相结合的方法进行研究，结果显示；将荧光金注入中缝背核后，在三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓后角浅层中可观察到许多荧光金标记神经元的胞体，其中有一部分神经元在给予外周伤害性刺激后被激活而引起ｃ－ｆｏｓ表达，该文进一步证明了来自脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核到中缝背核的直接投射至少有一部分与中缝背核的痛觉调节机制有关。

辣椒素处理对电针“四白”穴诱导三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos表达的影响

目的:探讨四白穴针刺效应的传入途径。方法:SD大鼠36只,随机分成空白组、假手术组、辣椒素组、溶媒组、电针"四白"穴+辣椒素组、电针"四白"穴+溶媒组。游离一侧眶下神经,辣椒素组将浸泡有1.5%辣椒素的棉条包绕在眶下神经上。溶媒组用浸泡在溶媒中的棉条包绕在眶下神经上。采用免疫组化技术观察三叉神经脊束核尾侧亚核(cSTN)的c-fos表达。结果:空白组在cSTN各层可见到零星、散在的阳性细胞。溶媒组、辣椒素组以及假手术组cSTN的c-fos阳性细胞数与空白组相似。电针"四白"穴+溶媒组c-fos在cSTN内主要集中在浅层(Ⅰ-Ⅱ层),其阳性细胞的数量明显多于其余各组(P<0.01);cSTN的深层(Ⅲ-Ⅳ层)c-fos数量多于空白组、溶媒组和假手术组(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。电针"四白"穴+辣椒素组cSTN的Ⅰ-Ⅱ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比明显减少(P<0.01),但cSTN的Ⅲ-Ⅳ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比无明显变化(P>0.05)。结论:C纤维可能是四白穴针刺效应(调节胃功能活动)的主要传入途径。

大鼠三叉神经尾侧亚核和脊髓背角浅层内C纤维的主要神经活性物质

本文用免疫荧光双重标记技术对三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）和脊髓背角浅层内ＢａｎｄｅｉｒａｅａＳｉｍｐｌｉｃｉｆｏｌｉａＩｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４（ＢＳＩ－Ｂ４）标记的Ｃ纤维及其终末与Ｐ物质（ＳＰ）能、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）能、谷氨酸（Ｇｌｕ）能和一氧化氮（ＮＯ）能纤维及其终末的分布和相互关系，三叉神经节（ＴＧ）和脊髓背根节（ＤＲＧ）中ＢＳＩ－Ｂ４标记并呈ＳＰ样、ＣＧＲＰ样、磷酸激活的谷氨酰胺酶（ＰＡＧ，谷氨酸能细胞的特异性标识物）样和ＮＯＳ样阳性的双标细胞进行了定位、定性和定量的系统研究。Ｖｃ和腰髓背角内ＳＰ样、ＣＧＲＰ样、ＰＡＧ样、ＮＯＳ样阳性纤维和终末及ＢＳＩ－Ｂ４标记的Ｃ纤维及其终末分布的主要重叠区域是Ⅱ层外带（Ⅱｏ）。ＴＧ和ＤＲＧ内可见ＢＳＩ－Ｂ４标记并呈ＳＰ样、ＣＧＲＰ样、ＰＡＧ样或ＮＯＳ样阳性的双标细胞，其中ＰＡＧ／ＢＳＩ－Ｂ４双标细胞的数量最多。此结果提示Ｃ纤维主要含Ｇｌｕ，Ｇｌｕ是初级传入最主要的神经活性物质。此外还有一些Ｃ纤维含ＳＰ、ＣＧＲＰ和ＮＯ。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内代谢型谷氨酸受体的分布及谷氨酸样阳性终末的来源

本文用抗磷酸激活的谷氨酰胺酶的单克隆抗体和抗代谢型谷氨酸受体五种亚型（1，1α，2／3，5）的4种抗体，研究了三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样免疫反应阳性神经元和终末以及五种代谢型谷氨酸受体的分布，同时结合HRP逆标技术对三叉神经脊束核尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的来源进行了观察．发现磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性胞体和终末主要集中在三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层；半月节内仅有它的阳性胞体。半月节内HRP逆标神经元中呈磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性者占71．4％，这些双重反应阳性神经元占半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性神经元的33．2％．五种代谢型谷氨酸受体亚型中，只有5型密集地分布于三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层。以上结果说明：（1）三叉尾侧亚核内的磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末主要位于其浅层，它们主要来源于三叉神经的初级传入；（2）三叉尾侧亚核的代谢型谷氨酸受体五种亚型中，只有5型可能参与西口部伤害性刺激信息的传递；（3）三叉尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的分布与代谢型谷氨酸受体5型的分布互相匹配。

三叉神经脊束核尾侧亚核星形胶质细胞对咬合创伤的反应

目的:观察大鼠咬合创伤后三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)内星形胶质细胞的反应,探讨星形胶质细胞在咬合创伤中的作用。方法:用方丝将大鼠左侧上颌第一磨牙咬合抬高0.5mm,形成左侧磨牙早接触的创伤咬合。粘固后1,3,7,14,30d取三叉神经脊束核尾侧亚核,免疫荧光染色观察星形胶质细胞在三叉神经脊束核尾侧亚核的表达变化。结果:对照组见少量胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞呈散在分布,咬合创伤3d时,实验侧GFAP阳性面积增加,荧光强度增强;7d时达到高峰,14d组GFAP阳性反应产物开始减少。结论:咬合创伤激活了星形胶质细胞,提示星形胶质细胞在口颌面痛产生及维持中发挥作用。

咬合创伤下大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核星形胶质细胞的反应及其与细胞因子的关系

目的:观察咬合创伤时大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及白介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNFα)、一氧化氮合酶(nNOS)mRNA的表达变化,探讨星形胶质细胞及细胞因子在咬合创伤中的作用。方法:将大鼠左侧第一磨牙咬合抬高0.5mm,造成对颌牙的创伤。粘固后1、3、7、14、30d时取三叉神经脊束核尾侧亚核,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Sp5C中GFAP,IL-1,TNFα,nNOSmRNA的表达变化。结果:(1)创伤后1dGFAP,IL-1,TNFαmRNA表达即上调,3d时达到峰值,三者呈现相关性一致变化规律,以后虽有下调,仍高于对照组。(2)nNOSmRNA创伤后1d表达上调,14d时达峰值。结论:咬合创伤能导致Sp5C中GFAP,IL-1,TNFα,nNOSmRNA表达上调,且GFAP,IL-1,TNFαmRNA呈现一致性相关变化规律,提示星形胶质细胞及细胞因子参与了咬合创伤的调节过程。

谷氨酸样阳性神经终末和NMDAR_1、GluR_1在大鼠三叉脊束核尾侧亚核的分布

目的 :显示三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)中谷氨酸 (Glu)样阳性神经终末和NMDAR1、GluR1的分布 ,观察两者是否匹配 ,从而证明其在牙痛信息初级传入中的可能作用。方法 :取大鼠延髓切片 ,采用免疫组化方法进行Vc中Glu样阳性神经终末和NMDAR1、GluR1的呈色。结果 :Glu样阳性神经终末和NMDAR1、GluR1免疫反应阳性产物均主要分布在Vc的Ⅰ、Ⅱ层。结论 :牙痛信息初级传入的过程中 ,Glu很可能起着兴奋性递质的作用 ,其离子型受体与伤害性信息传递密切相关。

实验性牙移动后三叉神经脊束核尾侧亚核CGRP的研究

目的: 研究实验性牙移动过程中,三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内降钙素基因相关肽(CGRP)的改变。方法:在大鼠左侧上颌第一、二磨牙间塞入一弹性橡皮圈模拟临床正畸加力状态。于不同加力时间点对三叉神经脊束核尾侧亚核进行CGRP免疫组化染色。结果: 加力后6h和24h,实验侧三叉神经脊束核尾侧亚核CGRP样纤维明显少于对侧;施力3d后Vc浅层中CGRP 样阳性终末与对照侧无明显差异,加力后1w大于对侧,2w时恢复至对侧水平。结论:实验性牙移动引起CGRP在三叉神经脊束核尾侧亚核释放。

大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部向三叉神经中脑核的回返投射

既往的研究证明，由支配咬肌的三叉神经中脑核神经元到丘脑腹后内侧核存在着一条由四级神经元组成的传递本体觉信号的中枢通路．此通路的第二级神经元位于三叉神经脊束核吻测亚核背内侧部和邻接的小细胞网状核的一部分，第三级神经元存在于沿三又神经感觉主核内缘伸延的“带状区”。本研究将ＰＨＡ－Ｌ注入第二级神经元所在区域，不仅在“带状区”发现有很多标记终末，而且在三叉神经中脑核区域内也发现较密集的ＰＨＡ－Ｌ阳性终末，许多终末与中脑核神经无形成密切接触．对这种材料又向咬肌神经内注入ＨＲＰ，观察到有一些ＨＲＰ标记的中脑核神经元与ＰＨＡ－Ｌ标记终末接触．本研究结果提示，在三叉神经本体感觉通路中，由第二级神经元的核区向初级传入神经元发出有回返投射，并对其机能意义进行了讨论．

咬合创伤对三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos的影响

目的:观察三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)中c-fos(核磷酸蛋白原癌基因)对咬合创伤的反应,探讨神经元在咬合创伤中的功能变化。方法:将直径0.5mm方丝粘固于大鼠左侧上颌第一磨牙,形成左侧磨牙早接触的创伤咬合,观察咬合创伤后1,3,7d,2w,4w,5w时Sp5C中c-fos蛋白的表达变化。结果:正常大鼠Sp5C中偶见极少量c-fos阳性神经元细胞,咬合创伤后7d,c-fos阳性神经元明显增加,2w时达到高峰,4w时开始下降。结论:咬合创伤刺激诱导了Sp5C中神经元的激活。

皮下注射多聚甲醛诱导大鼠脊髓和三叉神经脊束核向延髓网状背侧亚核传入投射的fos表达

目的 :研究外周伤害性刺激下大鼠脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中的Fos表达。方法 :采用荧光金逆行追踪及Fos免疫组化染色相结合的方法。结果 :脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核均有神经元投射到延髓网状背侧亚核。在颈髓背角浅层 ,FG Fos双标神经元分别占FG阳性神经元和Fos阳性神经元的 9.3%和 7.5 % ;在三叉神经脊束核尾侧亚核浅层 ,FG Fos双标神经元分别占FG阳性神经元和Fos阳性神经元的 9.5 %和 14 .2 %。结论 :在颈髓背角浅层和三叉神经脊束核尾侧亚核浅层向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中 ,部分神经元可能与伤害性刺激有关。

面部皮下福尔马林注射致大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos和GFAP表达的动态变化

目的:观察福尔马林致炎性鼠中枢三叉神经尾侧亚核(Sp5C)c-fos和胶质原纤维酸性蛋白(glialfibrilary acidic protein GFAP)表达的动态变化。方法:选择体重200-250g健康SD大鼠,在左上唇皮下注射2.5%福尔马林50μl建立炎性痛模型。分别在注射后30,60,120,240,360min等时间点处死,每组6只。免疫荧光染色观察各组大鼠同侧Sp5C核c-fos和GFAP表达的情况。结果:在面部皮下注射福尔马林后,fos阳性(fos-immunoreactivity,Fos-IR)神经元在注射后30分钟即可观察到,120分钟达到峰值,到360分钟观察结束仍有较高的表达。GFAP-IR在福尔马林注射后30分钟即有较高表达,60分钟达峰值后下降,240分钟即恢复到正常水平,二者分布区域相同。结论:在福尔马林致炎性痛模型中Sp5C内神经元和星形胶质细胞共同参与中枢神经系统对炎性疼痛刺激的调节,星形胶质细胞可能对神经元的活动有调节作用。

骨形成蛋白-2 mRNA在咬合创伤大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核的表达变化

目的:研究咬合创伤大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA的表达变化。方法:于大鼠右上第一磨牙粘结方丝,抬高咬合0.5-0.8mm,建立1、3、7、14、28d组咬合创伤模型,通过拍摄X线片及HE染色观察牙周组织的损伤程度,实时荧光定量PCR(QPCR)观察各大鼠Vc内BMP-2 mRNA的表达及变化。结果:咬合创伤第1天BMP-2表达下调,第3、7、14d BMP-2表达持续上调,28d组BMP-2表达量下调趋于正常水平,14d组表达量最高(P<0.05)。结论:BMP-2 mRNA在咬合创伤大鼠Vc内表达,表达量的高低与牙周组织的损伤程度相一致,即牙周损伤程度重时Vc内BMP-2高表达,牙周损伤程度轻时Vc内BMP-2低表达。

大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部及邻接的外侧网状结构的传出投射——WGA-HRP顺行追踪研究(中脑核—丘脑投射通路研究之二)

在已探明三叉神经中脑核神经元中枢突向三叉神经脊束核吻侧亚核的背内侧部(Vodm)及邻接的网状结构(LRF)投射的基础上,本文作者用WGA—HRP顺行标记法追踪了Vodm和其邻接的LRF传出投射的终止部位,以期探索Vme—丘脑通路中第三级神经元的所在。结果发现Vodm及邻接的LRF除投射到一些脑神经运动核、臂旁核、下橄榄主核腹肢内端外,还发现了前人未曾注意到的沿三叉神经感觉主核内缘存在且向腹侧伸延的一个带状区内有浓密的标记终末终止。此标记终末带区在上橄榄核背侧,三叉神经运动核腹侧以及三叉神经感觉主核的背内侧部等处增大,而上橄榄核背侧及三叉运动核腹侧的终末区以往并无人注意到在此有与之相应的核团。

大鼠三叉神经脊束核Ⅱ尾侧亚核层内CB样、PV样阳性结构的分布及其突触联系

本研究用免疫组织化学方法观察了 Calbindin D-2 8k( CB)样和 Parvalbumin ( PV)样胞体、纤维和终末在三叉神经脊束核尾侧亚核 ( Vc) 层内的分布及它们的突触联系。在光镜下观察到 CB样和 PV样阳性胞体、纤维和终末在 II层内侧带 ( IIi)最为密集 ,PV样阳性神经元的胞体稍大 ,但数量少于 CB样阳性神经元。在电镜下观察到 CB样或 PV样阳性结构主要形成下列 4种突触联系 :( 1)阳性轴突终末与阳性或阴性轴突终末形成对称性轴 -轴突触和少量非对称性轴 -轴突触 ;( 2 )阳性轴突终末与阳性树突形成非对称性和对称性轴 -树突触 ;( 3 ) CB样阳性轴突终末与阴性树突主要形成非对称性轴 -树突触 ,PV样阳性轴突终末与阴性树突主要形成对称性轴 -树突触 ;( 4 )阴性轴突终末与阳性树突形成非对称性和对称性轴 -树突触。另外还可见到 CB样或PV样阳性或阴性树突、轴突及终末与 CB样、PV样阳性或阴性的初级传入纤维终末形成 型和 II型突触小球。 型突触小球数量较多 ,有典型的扇贝样初级传入纤维终末和不均一的小泡 ,线粒体少 ;II型突触小球的初级传入纤维终末粗大而清亮 ,外观不规则 ,有均匀一致的小泡和丰富的线粒体。根据上述结果可以推知在面口部伤害性信息的传递和调控过程中 ,Vc

三叉神经尾侧脊束核胶状质亚核内连续性突触的亚显微结构研究

本文用电镜观察了小鼠三叉神经尾侧脊束核胶状质亚核内的突触联系。该核内的连续性突触有:1.树—轴—树突触(D-A-D_(1)):树突D内只含少量扁圆形突触小泡,与轴突A形成树-轴突触(D-A);而轴突A又与树突D形成轴-树突触(A-D_(1))。2.轴-树-树突触(A-D-D_(1)):轴突终末A与Ⅱ型树突D形成轴-树突触(A-D);而树突D又与Ⅱ型树突D_(1)形成树-树突触(D-D_(1))。3.轴-轴-树突触(A-A_(1)-D):轴突终末A与轴突终末A形成轴-轴突触(A-A_(1));而轴突终末A_(1)与Ⅱ型树突D形成轴-树突触(A_(1)-D)。

神经激肽B受体在猫三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓内的分布

目的了解神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与伤害性信息的传递和调制的可能关系，调查ＮＫ３受体在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布状况。方法免疫组织化学技术。结果ＮＫ３受体样免疫反应产物在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布基本一致。致密的免疫反应产物分布于Ⅱ内层（ｉｎｎｅｒｐａｒｔ），而Ⅰ层和Ⅱ外层（ｏｕｔｅｒｐａｒｔ）染色浅淡。ＮＫ３受体阳性神经元胞体主要见于三叉神经尾侧亚核和脊髓的Ⅰ层和Ⅱ层，少量分布于脊髓后角深层。