三叉神经脊束核尾侧亚核星形胶质细胞对咬合创伤的反应

目的:观察大鼠咬合创伤后三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)内星形胶质细胞的反应,探讨星形胶质细胞在咬合创伤中的作用。方法:用方丝将大鼠左侧上颌第一磨牙咬合抬高0.5mm,形成左侧磨牙早接触的创伤咬合。粘固后1,3,7,14,30d取三叉神经脊束核尾侧亚核,免疫荧光染色观察星形胶质细胞在三叉神经脊束核尾侧亚核的表达变化。结果:对照组见少量胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞呈散在分布,咬合创伤3d时,实验侧GFAP阳性面积增加,荧光强度增强;7d时达到高峰,14d组GFAP阳性反应产物开始减少。结论:咬合创伤激活了星形胶质细胞,提示星形胶质细胞在口颌面痛产生及维持中发挥作用。

咬合创伤下大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核星形胶质细胞的反应及其与细胞因子的关系

目的:观察咬合创伤时大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及白介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNFα)、一氧化氮合酶(nNOS)mRNA的表达变化,探讨星形胶质细胞及细胞因子在咬合创伤中的作用。方法:将大鼠左侧第一磨牙咬合抬高0.5mm,造成对颌牙的创伤。粘固后1、3、7、14、30d时取三叉神经脊束核尾侧亚核,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Sp5C中GFAP,IL-1,TNFα,nNOSmRNA的表达变化。结果:(1)创伤后1dGFAP,IL-1,TNFαmRNA表达即上调,3d时达到峰值,三者呈现相关性一致变化规律,以后虽有下调,仍高于对照组。(2)nNOSmRNA创伤后1d表达上调,14d时达峰值。结论:咬合创伤能导致Sp5C中GFAP,IL-1,TNFα,nNOSmRNA表达上调,且GFAP,IL-1,TNFαmRNA呈现一致性相关变化规律,提示星形胶质细胞及细胞因子参与了咬合创伤的调节过程。

牙髓损伤性刺激诱导大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内P物质等多肽的表达

目的：比较、分析急性牙髓炎和牙齿开髓刺激后，三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内Ｐ物质（ＳＰ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的变化。方法：利用免疫组织化学染色方法观察大鼠牙齿开髓后１ｈ、２ｈ、４ｈ和急性牙髓炎２ｈ、４ｈ组Ｖｃ内ＳＰ、ＣＧＲＰ免疫阳性纤维的变化。结果：开髓１ｈ组实验侧与对照侧相比，ＳＰ、ＣＧＲＰ免疫阳性纤维减少，其余各组的实验侧与对照侧无显著差异。结论：两种刺激均引起Ｖｃ内三叉神经末梢释放ＳＰ、ＣＧＲＰ。

蟾酥制剂对大鼠三叉神经节及三叉神经脊束核尾侧亚核中P物质的影响

目的比较分析蟾酥制剂作用于牙髓后,三叉神经节(TG)和三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内P物质(SP)的变化。方法利用免疫组织化学染色方法,观察大鼠牙齿开髓封药0、1、2、4、6、24h后TG和Vc内SP的变化。结果开髓1h时TG内阳性神经元的数目少于对照侧,4h后阳性神经元数量逐渐增多,接近正常。封药1h后Vc内密度低于对照侧,4h时密度明显高于对照侧,随后逐渐减低,至24h后已与对照侧密度一致。结论蟾酥制剂可抑制TG内SP的合成和释放,Vc内三叉神经末梢释放SP减少。

猫大脑皮质向三叉神经脊束核吻侧亚核的投射——HRP逆行轴突运输追踪法研究

本实验用HRP逆行轴突运输追踪法探讨了猫大脑皮质向三叉神经脊束核吻侧亚核(Vo)投射的起源细胞的分布。结果表明:冠状回是最主要的起源部位,其前、后部向Vo的投射有局部定位关系。该回前部的标记细胞数量较后部明显多,内、外半的起源细胞数量也不同。眶回的前部,乙状前回外侧部的前部也有大量标记细胞。该三回的最前端相互连接成为“前斯氏回”,此处是皮质—Vo投射的最核心起源部位。另外,标记细胞还见于上斯氏前回、乙状后回、侧回和外斯氏前回。所有的标记细胞都位于大脑皮质第Ⅴ层,大小不等。未发现先导回及颞、枕叶皮质有向Vo的投射。

三叉神经尾侧脊束核胶状质亚核内连续性突触的亚显微结构研究

本文用电镜观察了小鼠三叉神经尾侧脊束核胶状质亚核内的突触联系。该核内的连续性突触有:1.树—轴—树突触(D-A-D_(1)):树突D内只含少量扁圆形突触小泡,与轴突A形成树-轴突触(D-A);而轴突A又与树突D形成轴-树突触(A-D_(1))。2.轴-树-树突触(A-D-D_(1)):轴突终末A与Ⅱ型树突D形成轴-树突触(A-D);而树突D又与Ⅱ型树突D_(1)形成树-树突触(D-D_(1))。3.轴-轴-树突触(A-A_(1)-D):轴突终末A与轴突终末A形成轴-轴突触(A-A_(1));而轴突终末A_(1)与Ⅱ型树突D形成轴-树突触(A_(1)-D)。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内囊泡膜谷氨酸转运体样和P物质样阳性终末与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系

应用 GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu T1样和 DNPI样 )以及 SP样阳性纤维和终末与 Sindibis病毒转染表达绿色荧光蛋白阳性神经元之间的联系。目的在于为探索兴奋性神经递质和 SP参与面口部伤害性信息在 Vc浅层内的传递和调控提供形态学依据 ;并为今后更好地开展绿色荧光蛋白基因重组病毒标记法的研究探索新路。结果显示 :(1)绿色荧光蛋白基因重组 Sindibis病毒注入一侧 Vc浅层后 ,仅在同侧 Vc注射部位附近的 ～ 层内观察到 5～ 9个绿色荧光蛋白标记神经元 ,这些神经元的胞体为小型 (≤ 15μm) ,呈圆形、多角形或不规则形 ;(2 ) Vc浅层内均可见大量的 VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性纤维和终末 ,其中 VGlu T1样阳性纤维和终末主要密集分布于 层的内侧部和 层 , 层和 层外侧部较为稀疏 ;而 DNPI则主要密集分布于 层和 层 , 层相对地较为稀疏 ;SP样阳性纤维和终末主要分布于 层和 层 ;(3 ) VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性终扣分别聚集于绿色荧光蛋白标记神经元的胞体或树突周围 ,并与之形成密切接触。以上结果提示 ,Vc浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体样和

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核向三叉神经感觉核簇其它核团的投射:兼论胶状质投射神经元的存在

将逆行追踪剂荧光金分别注射到三叉神经感觉主核、三叉神经脊束核吻侧亚核和极间亚核，观察到尾侧亚核Ⅰ～Ⅴ层的神经元均向同侧上述核团发出上行投射。值得注意的是尾侧亚核Ⅱ层（胶状质）也有神经元向上述各核团投射。结合免疫荧光组织化学研究表明，在尾侧亚核浅层（Ⅰ、Ⅱ层）约10％～30％荧光金逆标神经元呈calbindin－D28k样阳性．而在浅层仅偶见荧光金逆标神经元呈parvalbumin样阳性者。本研究的结果进一步支持Ⅱ层神经元有传出投射的观点，也提示calbindin－D28k样阳性神经元和parvalbumin样阳性神经元在尾侧亚核浅层可能分别代表着具有不同特性的两类神经元。

辣椒素处理对电针“四白”穴诱导三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos表达的影响

目的:探讨四白穴针刺效应的传入途径。方法:SD大鼠36只,随机分成空白组、假手术组、辣椒素组、溶媒组、电针"四白"穴+辣椒素组、电针"四白"穴+溶媒组。游离一侧眶下神经,辣椒素组将浸泡有1.5%辣椒素的棉条包绕在眶下神经上。溶媒组用浸泡在溶媒中的棉条包绕在眶下神经上。采用免疫组化技术观察三叉神经脊束核尾侧亚核(cSTN)的c-fos表达。结果:空白组在cSTN各层可见到零星、散在的阳性细胞。溶媒组、辣椒素组以及假手术组cSTN的c-fos阳性细胞数与空白组相似。电针"四白"穴+溶媒组c-fos在cSTN内主要集中在浅层(Ⅰ-Ⅱ层),其阳性细胞的数量明显多于其余各组(P<0.01);cSTN的深层(Ⅲ-Ⅳ层)c-fos数量多于空白组、溶媒组和假手术组(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。电针"四白"穴+辣椒素组cSTN的Ⅰ-Ⅱ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比明显减少(P<0.01),但cSTN的Ⅲ-Ⅳ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比无明显变化(P>0.05)。结论:C纤维可能是四白穴针刺效应(调节胃功能活动)的主要传入途径。

内脏伤害性传入信息向三叉神经脊束间质核的投射

舌咽、迷走神经向三叉神经脊束间质核的投射纤维除传递非伤害性内脏信息者外是否也含内脏伤害性传入？尚未见报道。本文综合应用：（1）福尔马林刺激舌咽、迷走神经支配的一些内脏诱导FOS蛋白表达；（2）抽除外周神经节观察三叉神经脊束间质核内一些与伤害性信息传递有关的神经递质的变化；（3）运用荧光金逆行追踪与免疫组化相结合的双重反应等方法，对大鼠投射至三叉神经脊束间质核的舌烟、迷走神经初级传入纤维中是否含传递伤害性刺激信息的成分进行了研究。结果证明：(1)2％福尔马林刺激大鼠软腭、咽、食道和胃后，三叉神经脊束间质核内有大量FOS阳性神经元表达，这些阳性神经元与舌咽、迷走神经初级传入分布区基本一致。（2）抽除一侧舌咽、谈走神经报及其神经节后，术侧三叉神经脊束间质核内SP、CGRP等和痛传递有关的神经肽及BSI-B_4阳性终末与对侧比较明显减少。（3）荧光金微量注入三叉神经脊束间质核后，在舌咽、迷走神经节的下节内发现被荧光金逆标的细胞中分别有10％和12％呈SP、CGRP阳性，此两种双重阳性细胞分别占SP、CGRP阳性细胞的33．3%和278％。以上结果提示，三叉神经脊束间质核接受舌咽、迷走神经的传入纤维中有一部分传递内脏伤害性信息。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内代谢型谷氨酸受体的分布及谷氨酸样阳性终末的来源

本文用抗磷酸激活的谷氨酰胺酶的单克隆抗体和抗代谢型谷氨酸受体五种亚型（1，1α，2／3，5）的4种抗体，研究了三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样免疫反应阳性神经元和终末以及五种代谢型谷氨酸受体的分布，同时结合HRP逆标技术对三叉神经脊束核尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的来源进行了观察．发现磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性胞体和终末主要集中在三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层；半月节内仅有它的阳性胞体。半月节内HRP逆标神经元中呈磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性者占71．4％，这些双重反应阳性神经元占半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性神经元的33．2％．五种代谢型谷氨酸受体亚型中，只有5型密集地分布于三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层。以上结果说明：（1）三叉尾侧亚核内的磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末主要位于其浅层，它们主要来源于三叉神经的初级传入；（2）三叉尾侧亚核的代谢型谷氨酸受体五种亚型中，只有5型可能参与西口部伤害性刺激信息的传递；（3）三叉尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的分布与代谢型谷氨酸受体5型的分布互相匹配。

大鼠三叉神经脊束间质核内接受面口部躯体伤害性信息的calbindinD-28k神经元向孤束核的投射

为探讨三叉神经脊束间质核内的 calbindin D-2 8k神经元是否接受并传递面口部躯体伤害性信息到孤束核 ,本研究应用荧光金逆行束路追踪结合 FOS和 calbindin D-2 8k免疫荧光组织化学技术 ,观察了三叉神经脊束间质核的 calbindin D-2 8k和FOS双重免疫反应阳性的神经元向孤束核的投射。向右侧孤束核内注射荧光金并向右侧上、下唇皮下注射福尔马林 ,发现荧光金逆标细胞和 FOS免疫反应阳性细胞主要分布于注射侧的三叉神经脊束间质核的背侧边缘旁核和三叉旁核 ;大量的 calbindinD-2 8k免疫阳性细胞分布于双侧三叉神经脊束间质核内。此处的大部分荧光金逆标细胞 (约 74.4% )呈 calbindin D-2 8k免疫反应阳性。在此二者的双重阳性细胞中 ,又有一部分 (约 41.0 % )为同时呈 FOS免疫反应阳性的三重阳性神经元。结果提示 ,三叉神经脊束间质核内接受面口部躯体伤害性信息的 calbindin D-2 8k神经元可直接投射至孤束核 ,calbindin D-2

大鼠三叉神经脊束间质核内接受内脏伤害性信息的含CB神经元向孤束核的投射

目的 探讨大鼠三叉神经脊束间质核 (INV)内接受内脏伤害性信息的含calbindinD 2 8K(CB)神经元与孤束核 (NTS)的投射联系。 方法 用福尔马林刺激上消化道 ,应用荧光金 (FG)逆行束路追踪结合Fos和CB的免疫荧光组织化学三重标记法。 结果 INV的背侧边缘旁核 (PaMd)和三叉旁核 (PaV)内可见到大量FG逆标细胞 ,以注射FG的同侧为主。大部分FG逆标细胞 (约 71 2 %)为CB免疫反应阳性。部分FG和CB双标记神经元(约 31 5 %)同时呈Fos免疫反应阳性的三重标记。 结论 INV内部分接受内脏伤害性刺激的CB神经元可直接投射至NTS ,含CB的神经元在内脏伤害性信息经INV向NTS的传导通路中 。

大鼠三叉神经脊束间质核接受咬肌伤害性信息的calbindin D-28k神经元向孤束核的投射

目的 :探讨三叉神经脊束间质核 (INⅤ )内接受口面部深层结构 (咬肌 )伤害性信息的calbindinD 2 8k(CB)神经元是否投射到孤束核 (NTS) .方法 :应用荧光金 (FG)逆行束路追踪结合Fos和CB免疫荧光组织化学三重标记法 .结果 :FG逆标细胞和Fos免疫阳性细胞主要分布于注射和刺激同侧INⅤ的背侧边缘旁核 (PaMd)和三叉旁核 (PaⅤ )内 ;大量的CB免疫阳性细胞分布于双侧INⅤ内 .INⅤ内的大部分FG逆标细胞 (约 73.3% )呈CB免疫反应阳性 .在FG和CB双标记的神经元中 ,又有一部分 (约 4 7.4 % )为同时呈Fos免疫反应阳性的三重标记 .结论 :INⅤ投射至NTS的CB神经元接受口面部深层结构的躯体伤害性信息 。

猫背中缝核向三叉神经脊束核尾侧亚核的投射——HRP法研究

向6例猫右侧三叉神经脊束核尾侧亚核注入30%HRP溶液,观察和分析背中缝核内出现的标记细胞状况。发现标记细胞较集中于核的中段及稍偏吻侧部,向吻尾方向逐渐减少,靠近尾端部全无标记。标记细胞主要出现于核的腹侧部及两外侧部腹缘处,核的背侧部及外侧部的背侧部分甚少,两侧无差别。标记细胞形态多样,但腹侧部及外侧部腹缘处以梭形细胞为主,此处标记也最多。除背中缝核外,脑干尾侧中缝核群(大中缝核、苍白中缝核、隐中缝核)也出现少量标记细胞。结合文献分析,作者等推论背中缝核向尾侧亚核的投射可能与大中缝核向脊髓后角的投射意义相同,两者之间显示着既有分工又有联系的体部定位关系,即背中缝核以向三叉神经脊束核投射为主,也发出少量纤维向脊髓后角投射;以大中缝核为主的脑干尾侧中缝核群主要投射向脊髓后角,但也发出少量纤维投射于三叉神经脊束核。

面口部三叉神经躯体性初级传入和内脏性初级传入在三叉神经脊束间质核汇聚的电镜研究

本教研室既往研究曾发现三叉神经脊束间质核不仅接受支配面、口部皮肤和粘膜的下牙槽神经、舌神经和眶下神经等三叉神经范围的初级传入 ,还接受舌咽、迷走神经的内脏初级传入。继之又证明 ,投射于三叉神经脊束间质核的舌神经、眶下神经和舌咽、迷走神经的初级传入终末都主要分布在相当于闩水平的三叉神经脊束间质核的梭形、柱状膨大部分 ,且两者的终末分布区存在着明显的重叠。因此设想 ,此两种传入终末可能汇聚于三叉神经脊束间质核内的神经元并与之形成突触联系。为了证实此点 ,本研究将 HRP和神经毒 ricin分别注入于舌咽、迷走神经和眶下神经 ,在电镜下对它们的终末分布状态和联系进行了探索。发现有多数的此两类终末与树突分别构成突触连结 ;还发现一些标记的和溃变的终末共同汇聚于同一间质核神经元 ,其数量分别占标记终末总数的 1.43%和变性终末总数的 6 .5 7%。本文首次在形态学上证明直接来自三叉神经躯体性和来自 、 脑神经内脏性初级传入终末汇聚于间质核神经元形成双重突触连结。推论 。

大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部向三叉神经中脑核的回返投射

既往的研究证明，由支配咬肌的三叉神经中脑核神经元到丘脑腹后内侧核存在着一条由四级神经元组成的传递本体觉信号的中枢通路．此通路的第二级神经元位于三叉神经脊束核吻测亚核背内侧部和邻接的小细胞网状核的一部分，第三级神经元存在于沿三又神经感觉主核内缘伸延的“带状区”。本研究将ＰＨＡ－Ｌ注入第二级神经元所在区域，不仅在“带状区”发现有很多标记终末，而且在三叉神经中脑核区域内也发现较密集的ＰＨＡ－Ｌ阳性终末，许多终末与中脑核神经无形成密切接触．对这种材料又向咬肌神经内注入ＨＲＰ，观察到有一些ＨＲＰ标记的中脑核神经元与ＰＨＡ－Ｌ标记终末接触．本研究结果提示，在三叉神经本体感觉通路中，由第二级神经元的核区向初级传入神经元发出有回返投射，并对其机能意义进行了讨论．

实验性牙移动后三叉神经脊束核尾侧亚核CGRP的研究

目的: 研究实验性牙移动过程中,三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内降钙素基因相关肽(CGRP)的改变。方法:在大鼠左侧上颌第一、二磨牙间塞入一弹性橡皮圈模拟临床正畸加力状态。于不同加力时间点对三叉神经脊束核尾侧亚核进行CGRP免疫组化染色。结果: 加力后6h和24h,实验侧三叉神经脊束核尾侧亚核CGRP样纤维明显少于对侧;施力3d后Vc浅层中CGRP 样阳性终末与对照侧无明显差异,加力后1w大于对侧,2w时恢复至对侧水平。结论:实验性牙移动引起CGRP在三叉神经脊束核尾侧亚核释放。

大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部及邻接的外侧网状结构的传出投射——WGA-HRP顺行追踪研究(中脑核—丘脑投射通路研究之二)

在已探明三叉神经中脑核神经元中枢突向三叉神经脊束核吻侧亚核的背内侧部(Vodm)及邻接的网状结构(LRF)投射的基础上,本文作者用WGA—HRP顺行标记法追踪了Vodm和其邻接的LRF传出投射的终止部位,以期探索Vme—丘脑通路中第三级神经元的所在。结果发现Vodm及邻接的LRF除投射到一些脑神经运动核、臂旁核、下橄榄主核腹肢内端外,还发现了前人未曾注意到的沿三叉神经感觉主核内缘存在且向腹侧伸延的一个带状区内有浓密的标记终末终止。此标记终末带区在上橄榄核背侧,三叉神经运动核腹侧以及三叉神经感觉主核的背内侧部等处增大,而上橄榄核背侧及三叉运动核腹侧的终末区以往并无人注意到在此有与之相应的核团。