辣椒素处理对电针“四白”穴诱导三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos表达的影响

目的:探讨四白穴针刺效应的传入途径。方法:SD大鼠36只,随机分成空白组、假手术组、辣椒素组、溶媒组、电针"四白"穴+辣椒素组、电针"四白"穴+溶媒组。游离一侧眶下神经,辣椒素组将浸泡有1.5%辣椒素的棉条包绕在眶下神经上。溶媒组用浸泡在溶媒中的棉条包绕在眶下神经上。采用免疫组化技术观察三叉神经脊束核尾侧亚核(cSTN)的c-fos表达。结果:空白组在cSTN各层可见到零星、散在的阳性细胞。溶媒组、辣椒素组以及假手术组cSTN的c-fos阳性细胞数与空白组相似。电针"四白"穴+溶媒组c-fos在cSTN内主要集中在浅层(Ⅰ-Ⅱ层),其阳性细胞的数量明显多于其余各组(P<0.01);cSTN的深层(Ⅲ-Ⅳ层)c-fos数量多于空白组、溶媒组和假手术组(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。电针"四白"穴+辣椒素组cSTN的Ⅰ-Ⅱ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比明显减少(P<0.01),但cSTN的Ⅲ-Ⅳ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比无明显变化(P>0.05)。结论:C纤维可能是四白穴针刺效应(调节胃功能活动)的主要传入途径。

咬合创伤下大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核星形胶质细胞的反应及其与细胞因子的关系

目的:观察咬合创伤时大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及白介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNFα)、一氧化氮合酶(nNOS)mRNA的表达变化,探讨星形胶质细胞及细胞因子在咬合创伤中的作用。方法:将大鼠左侧第一磨牙咬合抬高0.5mm,造成对颌牙的创伤。粘固后1、3、7、14、30d时取三叉神经脊束核尾侧亚核,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Sp5C中GFAP,IL-1,TNFα,nNOSmRNA的表达变化。结果:(1)创伤后1dGFAP,IL-1,TNFαmRNA表达即上调,3d时达到峰值,三者呈现相关性一致变化规律,以后虽有下调,仍高于对照组。(2)nNOSmRNA创伤后1d表达上调,14d时达峰值。结论:咬合创伤能导致Sp5C中GFAP,IL-1,TNFα,nNOSmRNA表达上调,且GFAP,IL-1,TNFαmRNA呈现一致性相关变化规律,提示星形胶质细胞及细胞因子参与了咬合创伤的调节过程。

三叉神经脊束核尾侧亚核星形胶质细胞对咬合创伤的反应

目的:观察大鼠咬合创伤后三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)内星形胶质细胞的反应,探讨星形胶质细胞在咬合创伤中的作用。方法:用方丝将大鼠左侧上颌第一磨牙咬合抬高0.5mm,形成左侧磨牙早接触的创伤咬合。粘固后1,3,7,14,30d取三叉神经脊束核尾侧亚核,免疫荧光染色观察星形胶质细胞在三叉神经脊束核尾侧亚核的表达变化。结果:对照组见少量胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞呈散在分布,咬合创伤3d时,实验侧GFAP阳性面积增加,荧光强度增强;7d时达到高峰,14d组GFAP阳性反应产物开始减少。结论:咬合创伤激活了星形胶质细胞,提示星形胶质细胞在口颌面痛产生及维持中发挥作用。

猫背中缝核向三叉神经脊束核尾侧亚核的投射——HRP法研究

向6例猫右侧三叉神经脊束核尾侧亚核注入30%HRP溶液,观察和分析背中缝核内出现的标记细胞状况。发现标记细胞较集中于核的中段及稍偏吻侧部,向吻尾方向逐渐减少,靠近尾端部全无标记。标记细胞主要出现于核的腹侧部及两外侧部腹缘处,核的背侧部及外侧部的背侧部分甚少,两侧无差别。标记细胞形态多样,但腹侧部及外侧部腹缘处以梭形细胞为主,此处标记也最多。除背中缝核外,脑干尾侧中缝核群(大中缝核、苍白中缝核、隐中缝核)也出现少量标记细胞。结合文献分析,作者等推论背中缝核向尾侧亚核的投射可能与大中缝核向脊髓后角的投射意义相同,两者之间显示着既有分工又有联系的体部定位关系,即背中缝核以向三叉神经脊束核投射为主,也发出少量纤维向脊髓后角投射;以大中缝核为主的脑干尾侧中缝核群主要投射向脊髓后角,但也发出少量纤维投射于三叉神经脊束核。

实验性牙移动后三叉神经脊束核尾侧亚核CGRP的研究

目的: 研究实验性牙移动过程中,三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内降钙素基因相关肽(CGRP)的改变。方法:在大鼠左侧上颌第一、二磨牙间塞入一弹性橡皮圈模拟临床正畸加力状态。于不同加力时间点对三叉神经脊束核尾侧亚核进行CGRP免疫组化染色。结果: 加力后6h和24h,实验侧三叉神经脊束核尾侧亚核CGRP样纤维明显少于对侧;施力3d后Vc浅层中CGRP 样阳性终末与对照侧无明显差异,加力后1w大于对侧,2w时恢复至对侧水平。结论:实验性牙移动引起CGRP在三叉神经脊束核尾侧亚核释放。

咬合创伤对三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos的影响

目的:观察三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)中c-fos(核磷酸蛋白原癌基因)对咬合创伤的反应,探讨神经元在咬合创伤中的功能变化。方法:将直径0.5mm方丝粘固于大鼠左侧上颌第一磨牙,形成左侧磨牙早接触的创伤咬合,观察咬合创伤后1,3,7d,2w,4w,5w时Sp5C中c-fos蛋白的表达变化。结果:正常大鼠Sp5C中偶见极少量c-fos阳性神经元细胞,咬合创伤后7d,c-fos阳性神经元明显增加,2w时达到高峰,4w时开始下降。结论:咬合创伤刺激诱导了Sp5C中神经元的激活。

骨形成蛋白-2 mRNA在咬合创伤大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核的表达变化

目的:研究咬合创伤大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA的表达变化。方法:于大鼠右上第一磨牙粘结方丝,抬高咬合0.5-0.8mm,建立1、3、7、14、28d组咬合创伤模型,通过拍摄X线片及HE染色观察牙周组织的损伤程度,实时荧光定量PCR(QPCR)观察各大鼠Vc内BMP-2 mRNA的表达及变化。结果:咬合创伤第1天BMP-2表达下调,第3、7、14d BMP-2表达持续上调,28d组BMP-2表达量下调趋于正常水平,14d组表达量最高(P<0.05)。结论:BMP-2 mRNA在咬合创伤大鼠Vc内表达,表达量的高低与牙周组织的损伤程度相一致,即牙周损伤程度重时Vc内BMP-2高表达,牙周损伤程度轻时Vc内BMP-2低表达。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内囊泡膜谷氨酸转运体样和P物质样阳性终末与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系

应用 GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu T1样和 DNPI样 )以及 SP样阳性纤维和终末与 Sindibis病毒转染表达绿色荧光蛋白阳性神经元之间的联系。目的在于为探索兴奋性神经递质和 SP参与面口部伤害性信息在 Vc浅层内的传递和调控提供形态学依据 ;并为今后更好地开展绿色荧光蛋白基因重组病毒标记法的研究探索新路。结果显示 :(1)绿色荧光蛋白基因重组 Sindibis病毒注入一侧 Vc浅层后 ,仅在同侧 Vc注射部位附近的 ～ 层内观察到 5～ 9个绿色荧光蛋白标记神经元 ,这些神经元的胞体为小型 (≤ 15μm) ,呈圆形、多角形或不规则形 ;(2 ) Vc浅层内均可见大量的 VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性纤维和终末 ,其中 VGlu T1样阳性纤维和终末主要密集分布于 层的内侧部和 层 , 层和 层外侧部较为稀疏 ;而 DNPI则主要密集分布于 层和 层 , 层相对地较为稀疏 ;SP样阳性纤维和终末主要分布于 层和 层 ;(3 ) VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性终扣分别聚集于绿色荧光蛋白标记神经元的胞体或树突周围 ,并与之形成密切接触。以上结果提示 ,Vc浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体样和

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅱ层内CB样、PV样阳性终末与向臂旁核投射神经元的突触联系

为了观察三叉神经脊束核尾侧亚核 层神经元与向臂旁核投射神经元的突触关系 ,选用 Calbindin D-2 8k和 Parvalbu-min作为标志物 ,采用 HRP逆行追踪与免疫组织化学技术相结合的双重反应技术对 层内的 Calbindin D-2 8k样和 Parvalbumin样阳性神经元与三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射神经元之间的突触联系进行了观察。HRP注入臂旁核后 ,逆标神经元主要位于同侧三叉尾侧亚核 层至 层。Calbindin D-2 8k和 Parvalbumin样阳性胞体、纤维和终末主要集中在 层内侧带。电镜下观察 ,此二者的阳性反应产物呈弥散分布 ;两者的阳性终末与 HRP逆标神经元的胞体和树突之间主要形成轴 -树突触 ,偶见轴 -体突触 ;Calbindin D-2 8k样阳性终末与 HRP逆标神经元的树突形成的非对称性突触占 83% ,Parvalbumin样阳性终末与 HRP逆标神经元的树突形成的对称性突触占 85 %。此外 ,还观察到参与突触小球组成的初级传入纤维终末与 HRP逆标神经元的树突形成突触联系。以上结果提示 :(1)三叉神经脊束核尾侧亚核 层的 Calbindin D-2 8k样或 Parvalbumin样阳性神经元可通过突触传递机制对三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神经元进行调控 ,影响外周伤害性信息向上位脑结构的传递 ;(2 )三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投?

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内GABA样、L-ENK样、GlyT2样阳性末梢与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系

应用GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内GABA样、L ENK样、GlyT2样阳性纤维和末梢与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系。结果显示 :①将GFP基因重组Sindibis病毒注入一侧Vc浅层后 ,仅在同侧Vc注射部位附近的Ⅰ～Ⅲ层内观察到 4～ 8个逆标的GFP神经元 ,这些神经元的胞体为小型 (直径≤ 15 μm)圆形、梭形或不规则形 ;②Vc浅层内均可见大量的GABA样、L ENK样、GlyT2样阳性纤维和末梢 ,以Ⅰ和Ⅱ层分布最为密集 ;③GABA样、L ENK样、GlyT2样阳性纤维和末梢分别聚集于GFP标记神经元的胞体或树突周围 ,并与之形成密切接触。以上结果表明 :Vc浅层内GFP神经元可能与GABA能、L ENK能、Gly能阳性纤维和末梢形成突触联系并接受这些抑制性神经末梢的调控。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内钙结合蛋白阳性神经元与5—HT和SP阳性终末的联系

目的 观察大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc)内calbindin D-28K(CB)及parvalbumin(PV)阳性神经元与来自脑干下行抑制系统的5－羟色胺（5－HT）阳性终末及来自外周初级传入的P物质（SP)性终末的联系。方法 免疫荧光组织化学三重染色方法，染色结果在激光扫描共聚焦显微镜下观察。结果 5－HT阳性终末主要分布于Vc的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层内较密集；SP阳性终末密集分布于Ⅱ层，Ⅰ层内较少；CB、CR和PV阳性神经元在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层都有分布，但主要集中在Ⅱ层，特别是Ⅱ层内侧部（Ⅱi)。在Ⅱi内，CB、CR和PV阳性神经元的胞体和树突与5－HT阳性终末以及SP阳性终末形成密切接触；在Ⅱ层外侧部内，也可见少量CB和CR阳性神经元的胞体及树突与5－HT性终末和SP阳性终末形成接触。结论 Vc内的CB、CR和PV阳性神经元可能参与面口部伤害性信息的传递和调控。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内5—羟色胺受体3、4、7亚型mRNAs的表达

目的 观察大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc)及三叉神经节（TG）内5－羟色胺受体3、4、7亚型（5－HT3R、5－HT4R、5－HT7R）mRNAs的表达。方法 同位素标记的原位杂交组织化学技术。结果 5－HT3RmRNA阳性神经元密集分布于Vc的浅层（Ⅰ、Ⅱ层），散在分布于Ⅲ层；5－HT4RmRNA在Vc浅层也有较强的表达。Ⅲ层偶见阳性神经元；5－HT7R mRNA在Vc内表达较弱，且仅见于浅层。TG内5－HT3R、5－HT4R及5－HT7RmRNAs阳性细胞的百分比分别为32．8％、24．7％和9．8％。大、中、小型阳性细胞均可见，但以中、小型细胞为主。结论 5－HT3R、5－H4R航5－HT7RmRNAs在大鼠Vc及TG神经元内均有表达，提示这三种受体亚型在面口部感觉信息的传递或调控过程中可能发挥着重要作用。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内前原强啡肽与钙结合蛋白共存

目的 观察大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc)内前原强啡肽（PPD）免疫组化染色性结构的分布特点及其与钙结合蛋白calbindin D28k(CB)、caleratin(CR)或pavalbumin(PV)的共存情况。方法 免疫荧光组织化学双重染色技术。结果 PPD阳性神经元在Vc各层均有分布，以Ⅰ层和Ⅱ层外侧部（Ⅱo)最为密集。CB、CR和PV阳性神经元分布于Vc各层，Ⅱ层最为密集，Ⅰ和Ⅲ层较少。部分PPD阳性神经元同时也呈CB、CR或PV阳性，CB／PPD、CR／PPD和PV／PPD共存神经元主要位于Ⅱ层。CB／PPD共存神经元占CB或PPD阳性神经元的比率分别为3．9％和5．1％；CR／PPD共存神经元占CR或PPD阳性神经元的比率分别为3．4％和3．9％；PV／PPD共存神经元占PV或PPD阳性神经元的比率分别为14．0％和3．6％。结论 CB／PPD、CR／PPD和PV／PPD共存神经主要位于Vc的Ⅱ层，PPD与钙结合蛋白共存神经元可能参与传递面口部伤害性信息。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内代谢型谷氨酸受体的分布及谷氨酸样阳性终末的来源

本文用抗磷酸激活的谷氨酰胺酶的单克隆抗体和抗代谢型谷氨酸受体五种亚型（1，1α，2／3，5）的4种抗体，研究了三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样免疫反应阳性神经元和终末以及五种代谢型谷氨酸受体的分布，同时结合HRP逆标技术对三叉神经脊束核尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的来源进行了观察．发现磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性胞体和终末主要集中在三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层；半月节内仅有它的阳性胞体。半月节内HRP逆标神经元中呈磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性者占71．4％，这些双重反应阳性神经元占半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性神经元的33．2％．五种代谢型谷氨酸受体亚型中，只有5型密集地分布于三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层。以上结果说明：（1）三叉尾侧亚核内的磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末主要位于其浅层，它们主要来源于三叉神经的初级传入；（2）三叉尾侧亚核的代谢型谷氨酸受体五种亚型中，只有5型可能参与西口部伤害性刺激信息的传递；（3）三叉尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的分布与代谢型谷氨酸受体5型的分布互相匹配。

面部皮下福尔马林注射致大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos和GFAP表达的动态变化

目的:观察福尔马林致炎性鼠中枢三叉神经尾侧亚核(Sp5C)c-fos和胶质原纤维酸性蛋白(glialfibrilary acidic protein GFAP)表达的动态变化。方法:选择体重200-250g健康SD大鼠,在左上唇皮下注射2.5%福尔马林50μl建立炎性痛模型。分别在注射后30,60,120,240,360min等时间点处死,每组6只。免疫荧光染色观察各组大鼠同侧Sp5C核c-fos和GFAP表达的情况。结果:在面部皮下注射福尔马林后,fos阳性(fos-immunoreactivity,Fos-IR)神经元在注射后30分钟即可观察到,120分钟达到峰值,到360分钟观察结束仍有较高的表达。GFAP-IR在福尔马林注射后30分钟即有较高表达,60分钟达峰值后下降,240分钟即恢复到正常水平,二者分布区域相同。结论:在福尔马林致炎性痛模型中Sp5C内神经元和星形胶质细胞共同参与中枢神经系统对炎性疼痛刺激的调节,星形胶质细胞可能对神经元的活动有调节作用。

蟾酥制剂对大鼠三叉神经节及三叉神经脊束核尾侧亚核中P物质的影响

目的比较分析蟾酥制剂作用于牙髓后,三叉神经节(TG)和三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内P物质(SP)的变化。方法利用免疫组织化学染色方法,观察大鼠牙齿开髓封药0、1、2、4、6、24h后TG和Vc内SP的变化。结果开髓1h时TG内阳性神经元的数目少于对照侧,4h后阳性神经元数量逐渐增多,接近正常。封药1h后Vc内密度低于对照侧,4h时密度明显高于对照侧,随后逐渐减低,至24h后已与对照侧密度一致。结论蟾酥制剂可抑制TG内SP的合成和释放,Vc内三叉神经末梢释放SP减少。

外周伤害性刺激后颈髓和三叉神经脊束核尾侧亚核中向中缝背核投射神经元的c-fos表达

中缝背核是内源性镇痛系统中的重要核团之一，为了估价该核与外周伤害性信息的传递与调控之间的关系，文内采用荧光金逆行追踪与 ＦＯＳ免疫荧光标记相结合的方法进行研究，结果显示；将荧光金注入中缝背核后，在三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓后角浅层中可观察到许多荧光金标记神经元的胞体，其中有一部分神经元在给予外周伤害性刺激后被激活而引起ｃ－ｆｏｓ表达，该文进一步证明了来自脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核到中缝背核的直接投射至少有一部分与中缝背核的痛觉调节机制有关。

神经激肽B受体在猫三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓内的分布

目的了解神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与伤害性信息的传递和调制的可能关系，调查ＮＫ３受体在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布状况。方法免疫组织化学技术。结果ＮＫ３受体样免疫反应产物在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布基本一致。致密的免疫反应产物分布于Ⅱ内层（ｉｎｎｅｒｐａｒｔ），而Ⅰ层和Ⅱ外层（ｏｕｔｅｒｐａｒｔ）染色浅淡。ＮＫ３受体阳性神经元胞体主要见于三叉神经尾侧亚核和脊髓的Ⅰ层和Ⅱ层，少量分布于脊髓后角深层。

大鼠脑干向三叉神经脊束核尾侧亚核浅层的神经减压素能和脑啡肽能投射

本研究用荧光金（FG）逆行追踪与免疫荧光组织化学杂色相结合技术对大鼠脑干向三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc）的NT能和L－ENK能投射进行了观察．脑干向Vc发出NT能和L－ENK能投射的神经元主要位于中脑导水管周围灰质、中缝大核、巨细胞同状核α部和延髓中继核簇．结果提示NT和ENK可能参与下行抑制系统，Vc浅层密集的ENK样阳性终末不仅来自Vc内的局部或中间神经元，而且来自下行抑制系统的起始核团和脑干的其它结构，这些广泛起源的NT和L－ENK能投射可能对Vc浅层内传送面口部伤害性刺激信息的神经元和中间种经元发挥抑制和／或去抑制作用，调控面口部伤害性刺激信息向中枢传递．