目的研究三叶因子3(TFF3)基因在宫颈癌组织和正常组织中的表达情况,同时探讨微小RNA-7-5p(miR-7-5p)调控TFF3对人宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法实时聚合酶链反应检测TFF3在30例宫颈癌及其邻近正常组织中的表达;采用脂质体转染法...目的研究三叶因子3(TFF3)基因在宫颈癌组织和正常组织中的表达情况,同时探讨微小RNA-7-5p(miR-7-5p)调控TFF3对人宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法实时聚合酶链反应检测TFF3在30例宫颈癌及其邻近正常组织中的表达;采用脂质体转染法将TFF3-siRNA、miR-7-5p转染入宫颈癌HeLa及SiHa细胞中。采用CCK-8、Transwell实验和平板克隆实验检测瞬时转染TFF3-siRNA及miR-7-5p mimics对宫颈癌细胞增殖、迁移及克隆形成能力的影响;并利用双荧光素酶报告实验检测miR-7-5p与TFF3的相互关系。结果 TFF3在73.33%(22/30)宫颈癌组织中表达量明显高于其邻近正常组织( P <0.001)。与阴性对照组比较,TFF3 siRNA转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 3~5 d后,细胞增殖明显受到抑制( P <0.05)。Transwell细胞迁移实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞分别为(170±15)个/高倍镜视野和(155±10)个/高倍镜视野,TFF3干扰组迁移细胞分别为(70±20)个/高倍镜视野和(54±8)个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制( P <0.05)。克隆形成实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数分别为(160±34)个和(183±17)个,TFF3干扰组细胞克隆数分别为(45±15)个和(33±12)个,形成能力明显减弱( P < 0.05)。荧光素报告系统表明miR-7-5p可抑制含野生型TFF3 3′UTR序列的荧光素酶活性( P <0.01),但对含突变型TFF3 3′UTR的荧光素酶活性影响不显著( P >0.05)。与阴性对照组比较,miR-7-5p mimics转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 4~5 d后,增殖明显受到抑制( P <0.05)。Transwell细胞迁移实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞为(364±48)个/高倍镜视野和(411±27)个/高倍镜视野,miR-7-5p mimics转染组迁移细胞为(165±15)个/高倍镜视野和(100±208)个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制( P <0.05)。克隆形成实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数为(83±11)个和(129±21)个,miR-7-5p mimics转染组细胞克隆数为(25±7)个和(14±8)个,形成能力明显减弱( P <0.05)。结论 TFF3基因的异常高表达可能会对宫颈癌的发生发展起促进作用,miR-7-5p抑制宫颈癌细胞TFF3的表达或可为将来宫颈癌的靶向治疗提供一定的实验基础。展开更多
目的:研究三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)基因在三硝基苯磺酸(TNBS)诱发的大鼠结肠炎肠黏膜表达的变化,探讨其在结肠炎发生发展中的作用. 方法:采用TNBS/乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型(n=15), 观察大鼠腹泻、便血情况,评价疾病活动性指...目的:研究三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)基因在三硝基苯磺酸(TNBS)诱发的大鼠结肠炎肠黏膜表达的变化,探讨其在结肠炎发生发展中的作用. 方法:采用TNBS/乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型(n=15), 观察大鼠腹泻、便血情况,评价疾病活动性指数(DAI)并记录体重改变,分别于制模后1,7及14d处死大鼠.生理盐水灌肠作为正常对照组.大体及镜下观察肠黏膜损伤及组织学变化,并进行评分.生化法检测MPO活性.逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TFF3基因表达. 结果:结肠炎组1,7及14d时间点DAI(3.8±0.5 vs 0, 3.3±0.5 vs 0,2.3±0.5 vs 0)、体质量(-3.2±0.7 vs 4.7±2.2, -7.2±2.0 vs 10.9±0.2,2.9±0.4 vs 30.5±2.9)、大体评分(7.2±0.9 vs 0,6.2±1.3 vs 0,4.6±0.5 vs 0)和组织学评分(8.2±1.2 vs 0,10.4±0.5 vs 0,8.4±0.5 vs 0)以及MPO活性(1745±55 vs 303±21,1789±77 vs 315±20,1736±127 vs 313±35)较正常对照组均存在显著差异(P<0.05).TFF3在结肠组织炎症的各个时间点均有表达,致炎后1d组较正常对照组减少,7和14 d组明显升高(0.63±0.05 vs 0.72±0.02, 0.94±0.19 vs 0.72±0.02.1.25±0.74 vs 0.72±0.02.P<0.05). 结论:TNBS诱发的大鼠结肠炎有TFF3基因的表达,提示TFF3在结肠炎黏膜损伤修复中发挥作用.展开更多
文摘目的研究三叶因子3(TFF3)基因在宫颈癌组织和正常组织中的表达情况,同时探讨微小RNA-7-5p(miR-7-5p)调控TFF3对人宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法实时聚合酶链反应检测TFF3在30例宫颈癌及其邻近正常组织中的表达;采用脂质体转染法将TFF3-siRNA、miR-7-5p转染入宫颈癌HeLa及SiHa细胞中。采用CCK-8、Transwell实验和平板克隆实验检测瞬时转染TFF3-siRNA及miR-7-5p mimics对宫颈癌细胞增殖、迁移及克隆形成能力的影响;并利用双荧光素酶报告实验检测miR-7-5p与TFF3的相互关系。结果 TFF3在73.33%(22/30)宫颈癌组织中表达量明显高于其邻近正常组织( P <0.001)。与阴性对照组比较,TFF3 siRNA转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 3~5 d后,细胞增殖明显受到抑制( P <0.05)。Transwell细胞迁移实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞分别为(170±15)个/高倍镜视野和(155±10)个/高倍镜视野,TFF3干扰组迁移细胞分别为(70±20)个/高倍镜视野和(54±8)个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制( P <0.05)。克隆形成实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数分别为(160±34)个和(183±17)个,TFF3干扰组细胞克隆数分别为(45±15)个和(33±12)个,形成能力明显减弱( P < 0.05)。荧光素报告系统表明miR-7-5p可抑制含野生型TFF3 3′UTR序列的荧光素酶活性( P <0.01),但对含突变型TFF3 3′UTR的荧光素酶活性影响不显著( P >0.05)。与阴性对照组比较,miR-7-5p mimics转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 4~5 d后,增殖明显受到抑制( P <0.05)。Transwell细胞迁移实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞为(364±48)个/高倍镜视野和(411±27)个/高倍镜视野,miR-7-5p mimics转染组迁移细胞为(165±15)个/高倍镜视野和(100±208)个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制( P <0.05)。克隆形成实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数为(83±11)个和(129±21)个,miR-7-5p mimics转染组细胞克隆数为(25±7)个和(14±8)个,形成能力明显减弱( P <0.05)。结论 TFF3基因的异常高表达可能会对宫颈癌的发生发展起促进作用,miR-7-5p抑制宫颈癌细胞TFF3的表达或可为将来宫颈癌的靶向治疗提供一定的实验基础。
文摘目的:研究三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)基因在三硝基苯磺酸(TNBS)诱发的大鼠结肠炎肠黏膜表达的变化,探讨其在结肠炎发生发展中的作用. 方法:采用TNBS/乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型(n=15), 观察大鼠腹泻、便血情况,评价疾病活动性指数(DAI)并记录体重改变,分别于制模后1,7及14d处死大鼠.生理盐水灌肠作为正常对照组.大体及镜下观察肠黏膜损伤及组织学变化,并进行评分.生化法检测MPO活性.逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TFF3基因表达. 结果:结肠炎组1,7及14d时间点DAI(3.8±0.5 vs 0, 3.3±0.5 vs 0,2.3±0.5 vs 0)、体质量(-3.2±0.7 vs 4.7±2.2, -7.2±2.0 vs 10.9±0.2,2.9±0.4 vs 30.5±2.9)、大体评分(7.2±0.9 vs 0,6.2±1.3 vs 0,4.6±0.5 vs 0)和组织学评分(8.2±1.2 vs 0,10.4±0.5 vs 0,8.4±0.5 vs 0)以及MPO活性(1745±55 vs 303±21,1789±77 vs 315±20,1736±127 vs 313±35)较正常对照组均存在显著差异(P<0.05).TFF3在结肠组织炎症的各个时间点均有表达,致炎后1d组较正常对照组减少,7和14 d组明显升高(0.63±0.05 vs 0.72±0.02, 0.94±0.19 vs 0.72±0.02.1.25±0.74 vs 0.72±0.02.P<0.05). 结论:TNBS诱发的大鼠结肠炎有TFF3基因的表达,提示TFF3在结肠炎黏膜损伤修复中发挥作用.