三叶肽:从结构到功能

三叶结构域是一段由３８～３９个氨基酸组成的多肽序列，其中包含６个高度保守的半胱氨酸残基，这 ６个半胱氨酸残基以 １－５， ２－４， ３－６的交联方式形成三对二硫键，使多肽链折叠成特征性的三叶结构。已发现的哺乳动物三叶肽有三种：ｐＳ２、ＳＰ及ＩＴＦ。三叶肽通常位于消化道腔面的粘膜层，具有保护和修复功能，在维持粘膜的完整性中发挥着重要作用。

三叶肽因子1表达与胃癌及胃溃疡的关系

目的 通过测定三叶因子1（TFF1）蛋白在胃癌和胃溃疡组织中的表达情况,探讨组织TFF1蛋白表达水平在胃癌及胃溃疡中的临床意义.方法 56份胃黏膜标本取自18例正常对照者,25例胃溃疡和13例溃疡型胃癌患者,采用免疫组化法测定胃黏膜中TFF1蛋白的表达.结果 胃溃疡和溃疡旁组织、胃癌旁组织中TFF1表达明显高于正常胃黏膜和胃癌组织（均P＜0.001）,胃癌组织TFF1表达则明显低于正常胃黏膜（P＜0.001）;TFF1升高增加患者罹患胃溃疡风险（OR：1.365,95% CI 1.065～1.749,P＜0.05）; TFF1表达下调则增高患者罹患胃癌风险（OR：3.067,95% CI 1.391～6.757,P＜0.01）.结论 TFF1在胃黏膜保护、损伤修护具有一定的作用;TFF1蛋白在胃溃疡中高表达,而在胃癌中表达明显降低,检测TFF1蛋白表达有利于胃癌与胃溃疡的鉴别诊断.

三叶肽对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用

目的探讨三叶肽(ITF)对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用。方法采用重复水浸束缚应激(WRS)法制作模型,动态监测模型动物的胃黏膜血流量(GMBF),观察黏膜损伤指数(UI)及病理组织学变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测乳癌相关肽(PS2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、ITF、转化生长因子-α(TGF-α)及环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果单次WRS后造成胃黏膜广泛损伤;重复应激后胃黏膜产生适应性,GMBF上升,损伤逐渐减轻;经4次应激后,UI降低到单次应激的22.0%,并且胃腺区细胞增殖。单次应激后,PS2基因表达减弱,而iNOS、ITF、TGF-α及COX-2基因表达均增强;重复应激后,PS2、ITF、TGF-α表达逐渐增强,而iNOS及COX-2基因表达逐渐减弱;正常时iNOS、ITF及COX-2几乎无表达,PS2、ITF、TGF-α主要在胃腺颈部表达;应激后PS2、ITF、TGF-α不但在胃腺颈部黏膜增殖带表达增强,在胃腺基底部亦有表达,iNOS及COX-2在溃疡及其边缘存在。结论胃黏膜适应性细胞保护伴有细胞增殖,PS2、ITF、TGF-α表达逐渐增强,iNOS及COX-2表达逐渐减弱,表明三叶肽在这一现象中具有重要的调节作用。

三叶肽在胃肠黏膜重建中的作用研究进展

早期胃肠黏膜修复主要通过伤缘残留上皮快速迁移来完成黏膜重建过程。三叶肽家族在维护胃肠道黏膜的完整性和损伤后修复方面起重要作用。迄今,三叶肽在胃肠黏膜重建中所起的作用尚未完全阐明。此文就胃肠黏膜重建和三叶肽在该领域中作用的研究进展作一综述。

丁酸钠和阿司匹林对结肠癌细胞小肠三叶肽表达的影响

目的:丁酸钠(Bu)和阿司匹林(As)均对结肠癌具有预防作用,而小肠三叶肽(ITF)对胃肠黏膜有保护作用,有助于胃肠黏膜损伤和炎症的修复。本实验的目的在于明确Bu和As对结肠癌细胞SW480 ITF表达的影响。 方法:用原位杂交的方法检测不同浓度(1mm、2mm、5mm)Bu和As单独和联合作用前后SW480细胞中ITFmRNA的表达。设立不加Bu和As的对照组。统计方法采用方差分析,以P<0.05为差异显著标准。 结果:As及Bu均可使SW480细胞ITFmRNA表达减少,各组与对照组之间差异显著(As1,2,5mM组vs对照组P值分别为0.019,0.039,0.046;Bu1,2,5mM组vs对照组P值分别为0.038,0.022,0.007;As+Bu1,2,5mm组vs对照组P值分别为0.039,0.030,0.025).As+Bu组与单独应用As或Bu组间差异亦显著(As+Bu1 mm组vs As1 mM组P=0.045,vs Bu1mM组P=0.040;As+Bu2mM组vs As2mM组P=0.039,vs Bu2mM组P=0.046;As+Bu5mM组vs As5mM组P=0.015,vs Bu5mM组P=0.032).As+Bu3个浓度组间随剂量加大其ITFmRNA表达逐渐减少,差异具显著性(As+Bu1mM组vs As+Bu2mM组P=0.042,vs As+Bu5mM组P=0.017,As+Bu2mM组vs As+Bu5mM P=0.026)。但Bu或As 3个浓度组间差异均无显著性(P>0.05)。 结论:Bu及As均可抑制SW480细胞ITFmRNA的表达,且两者具协同效应。

一种新型胃粘膜保护剂三叶肽

三叶肽家族是一类较新的、对胃粘膜有保护作用的因子 ,主要由乳癌相关肽、解痉多肽和肠三叶因子组成 ,其特征是都由 6个半胱氨酸残基借 3个二硫键连接形成 ,呈三叶状结构。三叶肽对粘膜的保护作用 ,可能在于增强受损粘膜周围完好的上皮细胞向粘膜损伤表面迁移覆盖 ,或与粘液中的糖蛋白相互作用 ,加强粘液凝胶层 ,抵抗粘膜表层有害物质的损伤等。

人肠三叶肽在大肠杆菌中的表达

目的构建三叶肽(TFF)原核重组质粒pET32a-TFF3,实现TFF3融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达并鉴定表达产物。方法用TRIzol试剂提取人结肠组织mRNA,逆转录后经PCR扩增得到不含信号肽的TFF3编码序列,插入原核表达载体pET32a,构建pET32a-TFF3重组质粒,转化大肠杆菌BL-21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白。结果酶切和测序证实pET32a-TFF3重组质粒构建成功。SDS-PAGE分析表明在IPTG浓度为1 mmol/L时,诱导6 h后蛋白表达量最大。Western blot分析表明,TFF3融合蛋白相对分子质量约为24×103,其能与兔源TFF3抗体特异性结合。结论成功构建了pET32a-TFF3重组质粒,实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,为后续深入研究TFF3奠定了基础。

三叶肽在胃肠道中的作用及研究进展

三叶肽 (trefoilpeptides)家族主要由解痉多肽 (SP)、乳癌相关肽 (PS2 )和肠三叶因子 (ITF)组成。三叶肽对黏膜具有保护作用 ,其机制在于增强受损黏膜周围完好的上皮细胞向黏膜损伤表面迁移覆盖 ,或与黏液中的糖蛋白相互作用 ,加强黏液凝胶层 ,抵抗黏膜表层有害物质损伤等。另外 ,三叶肽还参与调节胃肠运动、胃酸分泌及生长等。

三叶肽与胃肠肿瘤

三叶肽是新近发现的一族富含半胱氨酸的小分子多肽,主要由乳腺癌相关肽、解痉多肽和肠三叶因子组成,其特征均由6个半胱氨酸残基借三个二硫键连结形成,呈三叶状结构。它与胃肠肿瘤有关,可能影响胃肠肿瘤的生物学行为。三叶肽的研究可能为胃肠肿瘤的防治开辟新的途径。

三叶肽家族研究进展

三叶肽是一类由一个或多个“三叶形结构”组成的具有抵御蛋白酶水解作用的小分子多肽物质。其分子结构中都有一至数段由 38～ 39个氨基酸组成的特定区域 ,其中的 6个半胱氨酸按 1～5 ,2～ 4和 3～ 6的顺序以二硫键的形式两两相接。三叶形结构的稳定性使三叶肽能在消化道复杂的内环境中保持其生物活性。三叶肽的表达同胃肠道中粘液糖蛋白的合成密切相关 ,目前已知哺乳动物体内的 3类三叶肽都是由胃肠道粘液分泌细胞合成的。而三叶肽在胃肠道炎症周围组织的异位表达使其在保护胃肠粘膜 。

三叶肽与胃肠道溃疡

目的 介绍三叶肽在胃肠道溃疡预防和治疗中的作用。方法 对三叶肽的结构、分布、生理作用和机制 ,以及与胃肠道溃疡的关系作综述。结果 三叶肽可与黏液糖蛋白相互作用形成黏液胶样层 ,增强胃肠道黏膜的保护能力 ;通过调节细胞迁移 ,进行黏膜损伤后的修复 ;并具有抗增殖、抗凋亡作用。三叶肽在胃肠道溃疡病中表达异常。在胃肠道溃疡周围存在溃疡相关细胞系 (UACL) ,UACL可产生新细胞迁移到溃疡表面 ,促进溃疡修复 ,并表达三叶肽等。在动物实验性胃溃疡前后应用三叶肽 ,可保护或减轻黏膜损伤和促进损伤黏膜的修复。结论 三叶肽为胃肠道溃疡的预防和治疗提供了一个新途径。

三叶肽与胃肠道肿瘤关系探讨

三叶肽(trifoil peptides)家族目前被归为三叶因子家族肽(trifoil factor family,TFF),主要由乳癌相关肽(PS2)、解痉多肽(SP)和肠三叶因子(ITF)组成,其特征是都由6个半胱氨酸残基借助3个二硫键连接形成,呈三叶状结构.三叶肽在人体内有广泛的分布及表达,如呼吸系统、消化系统、泌尿系统及中枢神经系统的下丘脑等.本文简介其生物学特性,在消化系统的分布及功能,以及在胃肠肿瘤的恶性生物学特征.

三叶肽TFF1在大肠癌中的表达

目的探讨三叶肽TFF1在大肠癌组织中的表达。方法收集正常大肠组织及大肠腺瘤、腺瘤恶变、大肠癌组织标本,采用免疫组化S-P法检测TFF1因子,结合临床病理资料进行分析。结果在正常大肠黏膜组织中TFF1无表达,而大肠癌组织中TFF1表达明显,且与正常大肠组织、大肠腺瘤、腺瘤恶变三者差异均有统计学意义(P<0.05),TFF1的表达水平与大肠癌分化程度、Dukes分期相关(P<0.05),与淋巴结转移不相关(P>0.05)。结论在大肠腺瘤、大肠癌组织中TFF1的表达增高,提示TFF1在大肠癌的发生、发展中可能起着一定的作用。

胃癌组织三叶肽因子2表达与幽门螺杆菌感染的相关性

目的:观察三叶肽因子2(trefoilpeptide2,TFF2)在胃癌及癌前病变中的表达状况及其与Hp感染的关系,初步探讨TFF2与Hp感染在胃癌及癌前病变中的作用及意义.方法:应用免疫组化方法测定16例慢性浅表性胃炎,20例慢性萎缩性胃炎,35例肠上皮化生,23例胃上皮不典型增生和25例胃癌中TFF2的蛋白表达情况,同时应用Warthin-Starry法检测幽门Hp情况.结果:(1)在慢性浅表性胃炎,慢性萎缩性胃炎,胃上皮不典型增生中均有TFF2的阳性表达,其阳性率分别为100%,100%和56.5%.而在肠上皮化生和胃癌组织内无TFF2的阳性表达,但在肠上皮化生周围的正常腺体有TFF2阳性表达.慢性浅表性胃炎TFF2的染色评分明显高于慢性萎缩性胃炎组.(2)在浅表性胃炎中,Hp感染阳性病例TFF2的阳性细胞密度值高于Hp感染阴性者(52.9±7.3vs46.5±13.0),但无统计学意义(P>0.05).而在胃黏膜萎缩及胃黏膜上皮不典型增生中,Hp感染者TFF2的阳性细胞密度值又低于Hp感染阴性者,差异有显著性(18.2±4.1vs37.9±13.8,P<0.01和14.4±9.3vs24.8±10.2,P<0.05).结论:TFF2在慢性浅表性胃炎中的高表达与黏膜损伤后所诱导的保护机制有关;慢性萎缩性胃炎TFF2的表达相对减少可能与分泌TFF2的胃黏膜腺体减少有关;但在不典型增生中TFF2的再表达可能参与了胃癌发生的早期阶段;Hp感染对TFF2表达的影响可能取决于胃黏膜病变的状态.