Trim31对肝癌细胞索拉非尼耐药的影响及相关机制研究

目的 探讨三基序蛋白31(Trim31)对肝癌细胞索拉非尼耐药的影响及相关机制。方法 采用GEPIA数据库分析肝癌中Trim31 mRNA表达水平,采用Western blot检测肝癌组织中Trim31蛋白的表达水平。构建过表达Trim31的肝癌细胞系,采用CCK-8实验、集落形成实验和EdU实验评估过表达Trim31对肝癌细胞增殖的影响,采用蛋白富集分析及Western blot筛选验证Trim31下游信号通路。筛选Trim31下调质粒,并构建稳定沉默Trim31的肝癌细胞系,采用Western blot、CCK-8实验、集落形成实验和EdU实验评估沉默Trim31对肝癌细胞增殖的影响。在过表达Trim31的基础上进一步过表达P38,观察其对肝癌细胞增殖的影响,明确Trim31与P38通路之间的调控关系。用索拉非尼处理过表达Trim31的肝癌细胞系,采用CCK-8实验、集落形成实验、EdU实验和Western blot评估过表达Trim31对索拉非尼处理后肝癌细胞增殖的影响及机制。构建索拉非尼耐药肝癌细胞株,并在此基础上构建沉默Trim31的肝癌细胞系,采用CCK-8实验、集落形成实验、EdU实验和Western blot评估沉默Trim31对索拉非尼耐药细胞株增殖的影响及机制。结果 Trim31 mRNA在肝癌组织中呈高表达。过表达Trim31能促进肝癌细胞的增殖,而沉默Trim31可抑制肝癌细胞的增殖;过表达P38可抑制过表达Trim31对肝癌细胞的促增殖作用;Trim31与P38通路之间可能存在负调控作用。过表达Trim31可减弱索拉非尼对肝癌细胞增殖的抑制作用。索拉非尼并不影响肝癌耐药细胞株的增殖,但沉默Trim31后索拉非尼肝癌耐药细胞株的增殖受到显著抑制。结论 Trim31 mRNA在肝癌中呈高表达,沉默Trim31可减弱肝癌细胞对索拉非尼的耐药性,其机制可能与激活P38通路有关。

BMSCexo促进E3泛素连接酶TRIM31而调控阿尔茨海默症小鼠认知功能障碍和NLRP3炎症小体的产生研究

目的探究骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCexo)对阿尔茨海默症(AD)小鼠认知功能障碍的影响和机制。方法提取并鉴定APP/PS1双转基因小鼠的骨髓间充质干细胞及其外泌体。APP/PS1小鼠分为模型组和BMSC exo组,C57BL/6J小鼠作为对照组,BMSC exo组小鼠每天尾静脉注射0.5μg BMSC exo,模型组和对照组注射等体积的无菌PBS溶液,连续给药21d后进行水迷宫行为学检测,记录各组小鼠逃避潜伏期、小鼠游泳轨迹及记录小鼠穿越原平台象限所在区域的时间占活动总时间的比例。Western blot检测小鼠脑组织中Toll样受体2(TRL-2)、一氧化氮合酶(iNOS)、核因子κB(NF-κB)、三基序的蛋白质31(TRIM31)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达。结果相比于对照组,模型组小鼠逃避潜伏期显著增加,小鼠活动轨迹没有目的性,小鼠穿越原平台象限所在区域的时间占活动总时间的比例显著减少,TRL-2、iNOS、NF-κB、NLRP3表达显著增加,TRIM31表达显著减少。相比于模型组,BMSC exo组小鼠逃避潜伏期显著减少,小鼠在原平台象限所穿越区域的时间占活动总时间的比例显著增加,TRL-2、iNOS、NF-κB、NLRP3表达显著减少,TRIM31表达显著增加。结论BMSC exo可改善AD小鼠认知功能障碍,其机制可能为促进TRIM31表达以及抑制NLRP3炎症小体的产生。