人端粒酶RNA突变体酵母三杂交诱饵质粒的构建

目的对人端粒酶RNA进行多位点的突变并构建该突变体的酵母三杂交诱饵质粒,且进行毒性检测。方法根据人端粒酶RNA(hTR)序列及突变位点设计引物,运用重叠延伸PCR法对hTR基因的第41位、第80位及第102位碱基进行T→A突变,将突变后的片段克隆入PMD18T载体,经测序正确后再亚克隆到酵母三杂交诱饵质粒PRH3'中,PCR及酶切鉴定。鉴定成功的重组诱饵质粒转化到酵母细胞L40ura3/pHyblex/ZeoMS2进行毒性检测。结果经过测序验证,该基因预期位点突变成功且其他序列未发生随机突变,重组诱饵质粒构建成功,转化酵母菌之后对宿主无毒性。结论成功构建了hTR突变体的重组质粒PRH3'-hTRm,可作为酵母三杂交系统中的"诱饵"。

G_β,G_(βγ)与腺苷酸环化酶Ⅱ在酵母双杂交和三杂交系统中的相互作用

目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 发现酵母三杂交系统中 AD-β 1，γ 2和 BD-ACⅡ间的相互作用明显强于双杂交系统中 AD-β 1和 BD-ACⅡ的相互作用。对 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1在酵母双杂交系统和三杂交系统中的表达进行免疫印迹杂交分析 ,发现其表达水平与β-半乳糖苷酶活力大小无关 ,即酵母三杂交系统和双杂交系统中相互作用的显著差别不是由 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1蛋白表达水平的差异所造成。结论 β亚基对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的相互作用十分重要 ,而γ亚基的存在显著增强了β亚基与 ACⅡ的相互作用 ,对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的高亲和性很重要。

酵母三杂交系统的应用研究进展

介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足． 在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统， 将应用范围扩大到研究蛋白质蛋白质、蛋白质ＲＮＡ、蛋白质小分子药物间的相互作用．

IQCE mRNA与FXR1P在酵母三杂交体系中的相互作用

脆性X相关基因1编码蛋白FXR1P是一种RNA结合蛋白,其所结合的靶RNA目前所知甚少。本研究应用酵母三杂交技术对本课题组从pRH3-cDNA人脑海马RNA表达文库中筛选到的一种可能与FXR1P存在相互作用的RNA IQCE进行研究,以验证该RNA与FXR1P的相互作用。方法为:提取利用酵母三杂交技术初步筛选得到的酵母阳性克隆的质粒,转化大肠杆菌Top10,利用其质粒不相容性分离插入了目的片段的pRH3′-cDNA质粒,将该质粒转化入含目的基因FXR1的酵母菌株L40-ura3/pHyb lex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,进行一对一的酵母三杂交验证,最后将该片段进行测序。测序结果为IQCE的一段编码序列,而目前尚无研究报导FXR1与IQCE的相互关系。结论:提示FXR1P与IQCE mRNA存在相互作用,IQCE可能是FXR1P发育调控网络组成成员之一。

结构域酵母三杂交诱饵载体的构建及酵母转化

目的脆性X相关蛋白(FXR1P)是一种RNA结合蛋白,本研究构建了其N-端结构域、KH结构域的酵母三杂交诱饵载体并转化酵母菌株L40 ura3/pHyblex/Zeo-MS2,为筛选这2种结构域的相互作用RNA作基础。方法根据Genebank提供的序列设计引物,以pYESTrp3/FXR1质粒作为模板,扩增分别包含FXR1P N-端结构域、KH结构域的编码区序列,连接到用于酵母三杂交文库筛选的pYESTrp3质粒,得到诱饵质粒,导入大肠杆菌Top10扩增,筛选阳性克隆并提取其中的重组质粒,再转化酵母菌L40 ura3/pHyblex/Zeo-MS2。结果经过测序验证,该重组诱饵质粒构建成功,转化酵母菌之后对宿主菌无毒性,无自激活现象。结论成功构建了能用于酵母三杂交文库筛选的FXR1P蛋白N-端结构域、KH结构域酵母三杂交诱饵载体,为研究这两个结构域的RNA结合功能奠定了基础。

酵母三杂交系统的研究进展

蛋白质与RNA分子之间的相互作用为生命活动的重要基础。由于蛋白质和RNA分子结合方式的复杂性,局限了蛋白质和RNA相互作用的研究。随着酵母三杂交系统的出现,蛋白质-RNA相互作用的研究也将步入一个新的时期。本文着重介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、局限性及其改进,假阳性结果的对策,并展望了该系统进一步的发展。

酵母三杂交系统的应用研究进展

1996年,酵母三杂交技术被研究应用于筛选RNA结合蛋白。本文介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足及局限,并分析其原因,总结了在过去8年中利用此方法所取得的成就。在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统,其应用范围已扩大到蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子药物间的相互作用等更加广泛的研究领域。

酵母三杂交系统研究进展

许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白,核酸-蛋白的相互作用来实现的,对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制.酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具,随着该系统的广泛应用,在此基础上发展了三杂交系统,研究包括三种成分在内的更为复杂的大分子相互作用,为蛋白-蛋白、RNA-蛋白和小分子-蛋白相互作用的研究提供了新的手段.

三杂交鲤制种技术总结

三杂交鲤是以荷包红鲤为母本与元江野鲤为父本杂交获得杂种F1(荷元鲤)的雌鱼与散鳞镜鲤雄鱼杂交而成的，是中国水产科学院长江水产研究所继荷元鲤(1981年部鉴定)之后又一新的杂种优势利用研究成果，1984年通过农牧渔业部成果鉴定。这种杂交鱼体型好、食性杂、抗逆性强，既保持了荷元鲤生长速度快的优点，又克服了荷元鲤体短、腹大的缺陷。

酵母三杂交系统的原理和应用

酵母双杂交系统自出现以来,广泛用于研究蛋白质之间的相互作用,它是一种具有高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。在酵母双杂交系统基础上发展的酵母三杂交系统将应用范围扩展到蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子化合物等更广阔的研究领域。本文着重介绍酵母三杂交系统的原理、应用及局限性。

杜长大、杜长本三杂交猪育肥效果测定报告

在农村饲养管理条件下，对杜长大、杜长本三杂交猪和长本二杂交猪进行育肥效果测定。结果表明：杜长大、杜长本在日增重、饲料报酬、育肥天数、胴体瘦肉率及经济效益等方面，明显优于长本肉猪，其中杜长大效果最好。

三杂交鲤[(镜鲤♀×荷包红鲤)♀×德国镜鲤]试验报告

三杂交鲤是利用单交种——镜荷鲤F_1(?)与德国镜鲤(?)杂交所得。通过两年的试验证明三杂交鲤具有体型好、生长快、肉味鲜美、肉质坚实,含肉率高、抗病力强和较易起捕等特点。在相同的条件下饲养,三杂交鲤比其它鲤鱼增产效果显著。在提高单产、增加经济效益方面体现出比单交种——镜荷鲤更强的杂交优势。

新疆冬麦区AL型三系杂交小麦亲本配合力、杂种优势和聚类分析

为了解新疆AL型三系杂交小麦亲本间配合力及其杂种优势关系,利用稳定不育系8份,恢复力强的恢复系9份,按照NCⅡ不完全双列杂交(8×9)设计配制72个F 1杂交组合,对亲本及杂交组合的7个农艺性状进行配合力效应和杂种优势分析,再根据亲本性状和一般配合力划分杂种优势类群。结果表明,三系小麦杂交组合中普遍存在产量和产量性状杂种优势,针对强优势组合的亲本选择,双亲之一一般配合力(GCA)或双亲GCA之和为正值且相对较大;相关性分析表明,中亲优势与父本和母本GCA值之和呈极显著正相关,父本和母本的GCA相关性大于特殊配合力(SCA)相关性。针对6个性状的GCA效应值和性状表型值分别进行聚类分析表明,配合力距离远的亲本组配可能出现强优势杂交组合的几率较大,性状表型值距离较远的两个亲本同一性状之间的优势互补也可以在后代中表现出较强的杂种优势。将17个亲本划分为4个和5个类群,为后续AL型杂交小麦强优势杂交组合的配制提供了依据。

5460个三系杂交稻品种的不育系细胞质来源分析

[目的]三系杂交稻育种的50年,也是三系不育系不断创新的50年。厘清三系杂交稻不育系的胞质类型及其主要衍化途径,对于快速确立恢保关系,准确溯源水稻不育系系谱,促进水稻杂种优势的有效利用具有重要作用。[方法]数据来自1974-2023年通过国家和省级审定的三系杂交水稻及其系谱资料。对50年来通过国家或省级审定的三系杂交稻不育胞质进行了系谱梳理,并对主要不育细胞质类型在杂交稻育种中的利用进行了分析。[结果]过去50年来,各级审定的三系杂交稻品种中,不育系胞质信息比较清楚的不育系有966个。根据各自的不育细胞质类型划分成16个类型,分别是野败型、印水型、包台型、D型、K型、冈型、矮败型、红莲型、爪哇稻型、万恢型、东乡野生稻型、广州野生稻型、高州野生稻型、漳浦野生稻型、马协型和Y型。分析结果显示野败型、印水型和包台型不育系数量分列前三位(累计不育系个数占比78.38%,累计选育三系杂交稻品种数占比77.77%),马协型、东乡野生稻型、Y型和高州野生稻型不育系数量分列最后四位(累计不育系个数占比1.55%,累计选育三系杂交稻品种数占比1.15%)。[结论]随着三系杂交稻育种的发展,不育系胞质源的种类和育种利用程度均得到了显著提升,不仅解决了单一不育胞质可能造成的潜在风险,而且丰富了我国三系杂交稻育种中不育细胞质来源的多样性。

高产三系杂交中稻荃优9的选育及栽培制种技术

荃优9是长沙碧盈农业科技有限公司与安徽荃银高科种业股份有限公司合作选育的籼型三系杂交中稻迟熟组合,以籼型细胞质雄性不育系荃9311A为母本、R1833为父本配组选育而成,具有产量高、生育期适中、广适性、抗倒伏等特点。2022年通过湖南省农作物品种审定。介绍了荃优9选育的具体过程,以及该品种在区域试验中农艺性状表现,并对其丰产栽培技术和高产制种技术进行了探究,以期为推广应用提供数据支撑。

长粒优质三系杂交晚籼稻华盛优21丝苗的选育与应用

华盛优21丝苗是湖北华占种业科技有限公司和江西先农种业有限公司以华盛A为母本、21丝苗为父本杂交育成的长粒优质三系杂交晚籼稻新品种。该品种生育期适宜、株型好、株高适中、米质优良(1级优质米)、丰产稳产和制种产量高。2021年和2022年分别通过湖北省和国家农作物品种审定委员会审定。文章介绍了其选育经过、特征特性、栽培技术要点和制种关键技术。

三系杂交水稻“荃优德占”优质高产栽培技术

三系杂交水稻“荃优德占”具有农艺性状好、优质高产、综合抗性强等特点,其优质高产栽培技术的应用要点包括对种子进行晒种、浸泡、消毒处理,以及采用科学的育苗措施和选取适宜的时间进行播种等。大田插秧完成后,应对水分进行合理管控,以满足幼苗健康生长的需求,促进三系杂交水稻“荃优德占”产量及质量的提升。

高产三系杂交水稻组合科优1103的选育和栽培制种技术要点

科优1103是建阳民丰农作物品种研究所以不育系科A为母本,以高产、抗病恢复系JMR1103为父本配组选育的高产杂交稻新组合。该组合具有株型适中、抗倒性好、适应性广、产量高等特性,2019年通过国家审定。本文作者介绍了科优1103的亲本来源及选育过程、产量表现、特征特性,并总结了其栽培技术要点和制种技术要点。

三系杂交稻“华浙优1561”高产制种技术要点

“华浙优1561”是由广西壮族自治区农业科学院水稻研究所联合中国水稻研究所和浙江勿忘农种业股份有限公司共同选育的优质杂交稻品种。“华浙优1561”属于多穗小粒型品种,分蘖力中等、产量高、抗褐飞虱。“华浙优1561”在稻米品质上表现突出:糙米率83.0%、整精米率65.7%、垩白度0.4%、透明度1级、碱消值7.0级、胶稠度72 mm、直链淀粉含量17.5%、粒长7.3 mm、长宽比3.3、垩白粒率3%,达到《食用稻品种品质》(NY/T53-01)优质一等食用长粒形籼稻品种品质规定要求。2020年“华浙优1561”通过广西壮族自治区农作物品种审定委员会审定,在广西北部、中部和南部稻作区可作早、晚稻种植。文章主要介绍了三系杂交水稻“华浙优1561”的高产制种技术要点,通过科学的制种技术和精细的栽培管理提高该品种的制种产量和品质,为水稻生产提供有力支持。

籼型三系杂交水稻新品种两款

一、科优香66。“科优香66”是由上海中科荃银分子育种技术有限公司、安徽荃银高科种业股份有限公司共同选育的籼型三系杂交水稻品种,品种来源为“沪科1A”ד荃恢15号”。1.特征特性。在长江中下游作一季中稻种植,全生育期131.8天,比对照“丰两优四号”晚熟1天。株高118.4厘米,穗长24.4厘米,每亩(667平方米)有效穗数为18.2万穗,每穗总粒数171.1粒,结实率82.9%,千粒重26克。