三标记参入法及其在硒对淋巴细胞代谢影响研究中的应用

分别以~3H-UR,^(14)C-Leu,^(125)I-UdR为前体,采用三标记参入方法,更严格地在同一样品中同时观察了淋巴细胞染硒前后DNA,RNA,蛋白质的合成及变化。结果表明该方法可行,且显著提高了实验效率;三种受试硒化合物在10^(-8)—10^(-4)mol/L浓度范围内对DNA,RNA,蛋白质合成均具有双相性影响,在中毒浓度时,三种硒化合物的毒性顺序为:亚硒酸钠>硒酸钠>硒蛋氨酸。

~3H,^(14)C,^(125)I的三标记测量及淬灭校正

本实验以H~#为淬灭指标,用液闪及井型NaI(Tl)晶体探测仪器,一次完成对~3H,^(14)C,^(125)I的三标记测量及淬灭校正。並观察了不同程度淬灭、不同的核素活度和活度比值对校正误差的影响。结果表明,在中度淬灭条件下(H~#<227),低强度范围内,校正误差均在10％以内,旦该方法操作简单、迅速、可靠,基本上可以满足实际测量的要求。

~3H、^(14)C、^(125)I的三标记测量及淬灭校正

本实验以H~#为淬灭指标,用液闪—#型两种探测仪器一次完成对~3H、^(14)C、^(125)I的三标记测量及淬灭校正。并观察了不同程度淬灭不同的核素活度比值和活度对校正极差的影响,结果表明,在中度淬灭条件下(H~#<227),低活度范围内,校正极差均控制在10％以内,基本上可以满足实际测量的要求,且该方法操作简单、迅速,结果准确。可在同一份样本中同时观察分别由~3H、^(14)H、^(125)I标记的三种物质代谢。

一种在区分服务网络中新的三色标记器

研究了在区分服务体系结构中传统的标记算法,传统的标记算法不能提供标记的准确性和按比例共享带宽的公平性。在此基础上,提出了一种改进的标记算法。该算法在进行数据包的标记时,同时考虑平均速率和瞬时速率两个参数,提高了标记的准确性。当流的速率超过目标速率时,按照正比于数据流的速率的概率将超过速率的流标记为黄色,这样提高了对剩余带宽的公平共享性。试验证明,ITCM算法与传统的标记算法相比,不仅能提高吞吐量,还可以达到剩余带宽的按比例共享。

三色和双色荧光标记流式细胞术对肾移植免疫反应新指标TLR4的监测

目的比较三色和双色荧光标记流式细胞术(FCM)在肾移植术后免疫指标TLR4监测中的优缺点。方法选取10例肾移植术后病例,分别采用三色和双色FCM检测外周血单核细胞中CD14、TLR4和CD80表达情况,计算CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80的表达百分率并进行统计比较。结果两种方法检测CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80阳性表达百分率均无显著性差异(P=0.198,P=0.872),两种方法对相同血标本的检测结果均呈正相关关系(积矩相关系数r=1,P=0.000;积矩相关系数r=0.999,P=0.000)。另外,应用三色FCM还可同时获得单核细胞中TLR4和CD80双阳性的表达情况。结论三色和双色FCM检测TLR4的结果无显著性差异,但三色FCM可同时显示TLR4与其下游分子CD80双阳性表达情况,对揭示TLR4参与移植免疫反应机制具有重要价值,而且血标本用量少,节约单克隆抗体。

三色荧光标记鉴定早孕蜕膜及外周免疫细胞组成

目的建立早孕妇女蜕膜免疫细胞高纯度的分离方法,流式细胞术多色荧光直接标记分析早孕蜕膜及外周血主要免疫细胞的构成比。方法经胶原酶消化、Percoll密度梯度离心、短期培养结合的方法分离纯化蜕膜免疫细胞,采用三色、双色及单色荧光直接标记流式细胞术分别检测早孕妇女和对照组中蜕膜、外周血CD3-CD56+CD16-和CD3-CD56+CD16+NK细胞、NKT和γδT细胞、T细胞和单核细胞的阳性率。结果与外周血相比,蜕膜免疫细胞以CD3-CD56+CD16-数量最多,约占免疫细胞总数的(67.02±18.33)%,T细胞占(11.05±7.22)%,单核细胞占(5.28±0.29)%,NKT细胞占(2.35±1.62)%;早孕妇女外周血T淋巴细胞较正常生育期妇女明显下降(P<0.05),而早孕妇女外周血中NK细胞、NKT细胞、单核细胞数量与对照组相比无显著差别。结论早孕妇女蜕膜中具有与外周血不同的免疫细胞组成,应用多色荧光标记的流式细胞术能够简单、直接地鉴定各免疫细胞亚群。

大豆花叶病毒遗传的三体标记

从大豆花叶病毒的形态抗性遗传标记、分子生物学特点、生化遗传、分子标记四个方面阐述了大豆研究所在大豆花叶病毒病方面所做的研究工作,以病毒病侵染大豆品种后的蛋白亚基变化、防卫系统细胞保护酶-过氧化物酶、苹果酸脱氢酶同工酶的酶蛋白分子表达特征,大豆叶肉细胞膜保护酶(超氧化物歧化酶,过氧化氢酶等)体系的变化特证;大豆细胞膜质过氧化有毒代谢产物的积累和变化,以及SMV蛋白酶的分析结果,阐明了大豆病毒病的分子生物学特点;通过杂交和回交后代表型遗传特征鉴定和分析,证实大豆花叶病毒SMV的成株抗性的遗传基因表达特点,并利用过氧化物酶和酯酶同工酶标记不同抗性品种和杂种后代的抗性遗传,发现大豆病毒的生化遗传标记特征与成株抗性的表型特征相一致,可利用同工酶表达的遗传特征,筛选抗病毒杂交后代的一种技术。同时利用PCR技术,对杂种后代的F1、F2代群体的抗性和遗传进行分析,证明大豆对SMV1号株系的抗性是由一对显性基因控制的,通过RAPD技术研究证实,其显性RAPD标记是OPN1400/1300与黑农39的抗病基因的遗传距离为8.2cm,它为抗大豆花叶病遗传育种提供依据。

三色荧光标记抗体在急性白血病免疫分型中的应用

目的 :探讨多参数分析流式细胞术白血病免疫分型的方法。方法 :用自行设计的七组三色荧光标记抗体组合 ,共含 15种抗体 ,对 2 0 0例急性白血病患者骨髓或外周血进行流式细胞术免疫分型。结果 :应用本组抗体组合可对T 急性淋巴细胞白血病、B 急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞白血病 M1 M7患者作出免疫学诊断 ,并可诊断形态学难以辨认的及一般免疫分型法较难诊断的单核细胞白血病。结论 :三色荧光标记抗体组合可用较少的抗体 ,特异地对急性白血病各亚型进行多参数免疫表型分析 。

区分服务模式下的自适应三色分组标记算法

在区分服务的体系结构中,基于时间滑动窗口的三色分组标记机制是实现公平性的重要手段之一,根据分组的不同标记,使分组具有不同的丢弃优先级别,从而实现带宽的公平性。但这仍不能从根本上解决带宽共享公平性的问题。在时间滑动窗口的三色分组标记算法的基础上,通过增加公平性因子,自适应的调节标记分组为三色的概率,达到提高带宽共享公平性的目的。仿真实验表明,新的三色分组标记算法的公平性有较大提高。

从时间推进的三个层面看体标记“了”的篇章功能

文章在前人对体标记"了"的篇章功能研究基础上,以Smith(2003)的"时间推进"概念为起点,区分宏观、中观和微观三个层面的篇章时间推进,并以此为视角通过实证分析考察体标记"了"的篇章功能。研究发现:宏观层面上,"了"能标示时间区间的边界;中观层面上,"了"能标记时间推进结构段的核心,并主要通过序列关系和阐述关系与其他小句关联;微观层面上,"了"能牵引出后续事件,其连用能快速推进时间,使事件关联更紧凑。研究显示篇章分层研究有助于更直接地定位体标记的篇章功能。

具交叉干涉的三点测交区间标记定位(QTL)的相关方法

本文提出在有交又干涉条件下，在测交群体中对区间标记庄位赋值后求其与待定 位的数量性状表型值间的简单相关系数Ｒ，以此进行连锁测验，并且在一定条件下用Ｒ值求出 该数量性状座位（ＱＴＬ）与各标记座位（ＭＬ）间的重组值．

流式细胞仪三色荧光标记技术在白血病免疫分型中的应用

目的探讨流式细胞仪三色荧光标记技术在白血病免疫分型中应用价值。方法选择该院2011年1月‐2014年1月收治的120例急性白血病患者作为研究对象,抽取患者外周血进行流式细胞术免疫分析,采取自行设计的7组三色荧光标记抗体组合,共含15种抗体。结果 60例标本经单色荧光标记技术检测,T细胞免疫表型急性淋巴细胞白血病(T-ALL)27例,急性B细胞型淋巴细胞性白血病(B-ALL)11例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)22例;细胞分群问题致诊断不明确11例(18.3%);初始诊断与最终诊断不符3例(5.0%),其中,2例为单纯髓系白血病,1例为单纯淋系白血病。经三色荧光标记技术检测后,90%的白血病患者类型及免疫分型可明确诊断。结论流式细胞仪三色荧光标记技术在白血病免疫分型诊断中具有重要价值,诊断正确率较高。

载^(125)I标记三螺旋形成寡核苷酸纳米粒的制备及初步应用

目的构建载^(125)I标记反雄激素受体(AR)基因三螺旋形成寡核苷酸(^(125)I-TFO)纳米粒,并初步探讨其在体外对前列腺癌细胞的抑制作用。方法应用Bolton-Hunter法对三螺旋形成寡核苷酸进行^(125)I标记,通过复乳化溶剂挥发法制备包载^(125)I-TFO的纳米粒(^(125)I-TFO-NP),测定其粒径、形态、包封率、载药量及体外释放特点。用γ计数器测定前列腺癌细胞LNCa P对^(125)I-TFO-NP的摄取情况,CCK-8法检测纳米粒对前列腺癌细胞增殖的抑制作用、荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测纳米粒中AR mRNA表达水平。结果所获^(125)I-TFO的标记率和放射化学纯度分别为(86.87±0.45)%、(96.21%±0.97)%。^(125)I-TFO-NP的平均粒径为(298.2±0.5)nm,包封率与载药量分别为(70.6±6.6)%和(1.89±0.13)μg/mg,缓释作用明显。前列腺癌细胞对^(125)I-TFO-NP的摄取率高于未包裹^(125)I-TFO(P<0.01)。与空白对照组及TFO-NP组比较,^(125)I-TFO-NP组中前列腺癌细胞的增殖抑制率升高(P<0.01),AR mRNA及蛋白表达水平均下降(P<0.05)。结论制备的载^(125)I-TFO-NP性状良好,可通过下调AR的表达水平,抑制前列腺癌细胞的增殖。纳米粒可为反基因放射治疗提供理想的载体。

单速率三色标记在区分业务模型中的应用

传统的IP技术已不能满足当前网络的发展,为了提供更好的服务质量,IETF制定了区分业务体系结构.本文在简要介绍区分业务模型的体系结构的基础上,重点讨论了单速率三色标记的原理及其在区分业务模型中如何实现流量调节.

六点标记法对提高盆腔肿瘤摆位精度的临床价值

目的验证六点标记法与传统的三点标记法相比可否提高盆腔肿瘤的摆位精度。方法将60例盆腔肿瘤患者随机分为两组,三点标记组(30例)和六点标记组(30例)。三点标记组采用传统的三点标记法进行摆位,六点标记组采用新型的六点标记法进行摆位。治疗前应用加速器分别拍摄两组的射野验证片,将其与计划系统生成的射野方向观视片进行比较,统计X(左右)、Y(头脚)、Z(腹背)三个方向上的摆位误差。结果六点标记组与三点标记组在Z方向上的摆位误差差异无统计学意义(P>0.05),说明六点标记法未能明显减少腹背方向上的摆位误差。六点标记组与三点标记组在X、Y方向上的摆位误差有统计学意义(均P<0.05),说明六点标记法能明显减少X、Y方向上的摆位误差。结论使用六点标记法能明显提高盆腔肿瘤患者的放疗摆位精度,且方法简便易行,具有临床推广价值。

直接免疫荧光法分析白血病及骨髓增生异常综合征患者免疫表型

目的 :检测急性白血病 (AL)及骨髓增生异常综合征 (MDS)免疫表型及其临床意义。方法 :用流式细胞仪CD4 5设门直接免疫三标记法 ,检测 4 9例AL及MDS患者免疫表型。结果 :ALL双克隆型 9例 ,其中髓系伴T -ALL 3例 ,髓系伴B -ALL 4例 ,1例为髓系伴T、B标记 (CD13 +CD7+CD19+ ) ,1例同时CD7+CD19+ ;ALL同时表达CD3 4 及HLA -DR最高 (6 0 .0 1%) ,明显高于AML、MDS(P <0 .0 0 5 )。AML双克隆型 2 0例 ,7例为髓系伴CD7+ ,2例髓系伴CD19+ ,11例为同时表达CD3 4 +HLA -DR +。MDS患者骨髓细胞表达髓系成熟抗原CD13 +及CD3 3 +增高 ,未发现淋系抗原的表达。MDS -RAEB、RAEBT及转为白血病病例均高表达CD3 4 及HLA -DR抗原。结论 :用三标记法简便易行 ,提高诊断准确性 ;单抗组合应兼顾髓、淋系同时表达 ;应加胞浆抗原检测。

信誉、第三方标记与网上购买行为——基于淘宝网的实证研究

信誉积分和第三方标记是国内外在线零售市场经常使用的信任机制。本文通过搜索程序获取淘宝网上销售诺基亚5800手机的3060个商家的数据来验证信誉和第三方标记的作用。本文发现,在一口价而不是拍卖的情况下(1)价格对网上购买行为有负向关系,但这种影响受到信誉的调节信誉越高,价格对消费者网上购买行为的影响就越弱;(2)信誉对消费者网上购买行为有着显著的正向关系,这种关系受到保障型和慈善型第三方标记的调节这些标记越多,信誉对消费者购买行为的影响越大;(3)促销型第三方标记与购买行为有着正向关系,而便利型第三方标记与购买行为无显著关系。

QoS技术中令牌桶算法实现方式比较

令牌桶算法是目前IP QoS中最常采用的一种流量测量方法,广泛应用于约定访问速率技术、通用流量整形技术以及物理接口总速率限制等技术中。IETF RFC建议规范了单速率三色标记和双速率三色标记两种令牌桶算法,在桶的构成、令牌添加和报文处理流程方面前者较后者简单,成为目前业界比较常用的流量标记方式。在实际应用中,应针对不同的流量特征选择恰当的标记方式。

系统性红斑狼疮患者淋巴细胞亚群早期凋亡的初步研究

目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中不同细胞亚群发生凋亡的情况,并初步分析其在SLE发病机制中的意义。方法:取28例SLE患者和性别年龄与之相匹配的20个正常对照者。采用淋巴细胞亚群标志、An-nexin-V及碘化丙啶三色荧光标记、流式细胞术检测细胞的早期凋亡。结果:SLE患者体内CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的凋亡百分率均显著高于正常对照组(P<0.05)。同时,SLE患者T淋巴细胞的死亡百分率也高于正常人。经激素治疗一定时间后,这些细胞亚群的凋亡率会进一步升高(P<0.01),但CD4/CD8比值恢复至接近正常人。SLE患者体内CD19+B淋巴细胞的凋亡或死亡百分率和正常对照组相比均无明显差别,激素治疗对B细胞凋亡和死亡的影响亦不显著。结论:在SLE患者体内主要是T淋巴细胞凋亡增加,但SLE患者淋巴细胞数目减少不仅仅是因为细胞凋亡所致,死亡细胞数目明显升高也是其中一个重要原因。激素治疗可诱导SLE患者T淋巴细胞进一步发生凋亡,并使T细胞亚群比例有所改善。