Box-Behnken设计-响应面法优化三棱总黄酮的分离纯化工艺研究

目的:优化三棱总黄酮的纯化工艺。方法:采用大孔吸附树脂分离纯化法,以上样液pH、洗脱液流速、洗脱液浓度为考察因素,总黄酮纯化率为评价指标,在单因素试验的基础上采用Box-Behnken 设计-响应面法优化三棱总黄酮的纯化工艺,并进行验证试验。结果:最优纯化工艺为上样液pH为4.8、洗脱液流速为2.0 BV/h、洗脱液浓度为72%;验证试验中3 批样品纯化后的总黄酮纯化率为72.34%(RSD=1.77%,n=3),与预测值(73.99%)的相对误差为2.13%。结论:优选的纯化工艺方法稳定、可行,可用于三棱总黄酮的纯化。

不同三棱提取物药理活性的比较研究

目的:研究不同三棱提取物的抗凝血,抗血栓与镇痛的药理作用,为筛选、阐明其活性部位及成分提供实验依据。方法:采用小鼠体内凝血实验、体内血栓形成实验及热板法、醋酸扭体法两种疼痛模型,分别以凝血时间、偏瘫恢复数及热痛阈值、扭体次数为指标,评价不同三棱提取物的药理作用。结果:三棱不同提取物均可延长凝血时间;三棱水煎剂、总黄酮及乙酸已酯、正丁醇提取物可增加偏瘫恢复数;三棱水煎液、总黄酮、乙酸乙酯与正丁醇提取物可提高小鼠热痛阈值;三棱不同提取物均可减少小鼠扭体次数。结论:三棱水煎液、三棱总黄酮、三棱乙酸乙酯与三棱正丁醇提取物具有显著抗凝血,抗血栓与镇痛作用。三棱总黄酮可能是其主要的活性成分,是发挥其破血散结,止痛的物质基础。

三棱UPLC-UV特征图谱研究

目的:建立三棱化学成分的超高效液相色谱-紫外法(UPLC-UV)特征图谱,并对主要特征峰进行指认。方法:色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,线性梯度洗脱,双波长切换检测,0~12 min为300 nm,12~16 min为240 nm,测定10批三棱药材UPLCUV图,确定共有特征峰并计算相似度,利用对照品及超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q/TOF-MS)对主要特征峰进行指认。结果:采集了10批三棱药材UPLC-UV指纹图谱,确定11个特征峰,相似度均大于0.9,认定了9个特征峰,其中通过对照品指认了咖啡酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸,通过质谱解析指认了2个苯丙素乙酰蔗糖酯、3个苯丙素甘油酯及首次在三棱中发现的三棱酮。结论:建立了三棱UPLC-UV特征图谱,能够表征不同结构类型的三棱化学成分,为三棱药材质量控制提供了参考。

“三棱-莪术”组分配伍对子宫肌瘤大鼠下丘脑和垂体激素的影响

目的:研究"三棱-莪术"组分配伍对子宫肌瘤大鼠下丘脑和垂体相关激素的影响。方法:将未生孕的SD雌性大鼠随机分为6组:正常对照组(NC),模型组(UL),桂枝茯苓胶囊组(GZFLC),"三棱-莪术"组分配伍高剂量组(HCRSR)、中剂量组(MCRSR)及低剂量组(LCRSR)。经肌注孕酮和灌胃己烯雌酚来诱导建立子宫肌瘤大鼠模型。经过五周的造模和药物治疗后,收集大鼠股动脉血、下丘脑及垂体,通过ELISA法测定血清,下丘脑和垂体中促性腺激素释放激素(GnRH),促卵泡激素(FSH)和促黄体激素(LH)的水平。结果:该造模方法成功地建立了大鼠子宫肌瘤模型。各组血清中GnRH,FSH和LH的浓度,以及下丘脑中的GnRH水平均无统计学意义(P> 0.05)。模型组垂体中FSH和LH的表达高于正常组(P <0.01)。治疗后,高剂量(HCRSR)和桂枝茯苓胶囊组(GZFLC)组中"三棱-莪术"组分配伍的FSH和LH水平显著降低(P <0.01)。结论:这些数据表明"三棱-莪术"组分配伍可以降低子宫平滑肌瘤大鼠垂体中FSH和LH的表达。