三步止泻治疗小儿腹泻调控肠微生态的机制研究

目的 通过本项目研究,了解三步止泻法治疗腹泻乳兔的可能作用机制,明确三步止泻法治疗小儿腹泻与肠微生态作用机制的强相关性。方法 将乳兔制作脾虚证模型后,分为六组即:补脾组、摩腹组、推上七节骨组、三步止泻手法组、益生菌组、模型组,经过治疗周期后,处死乳兔后,将胃黏膜、肠黏膜组织切片进行HE染色,观察乳兔胃、肠黏膜的组织学变化;检测腹泻兔血浆内毒素的表达水平;并收集各组大鼠粪便排泄物,进行微生物组总DNA提取,目标片段PCR扩增,扩增产物回收纯化,扩增产物荧光定量,测序文库制备,上机进行高通量测序,然后多元化对比,后统计分析。结果 兔胃肠组织HE染色提示治疗后三步止泻手法组、补脾组、摩腹组及推上七节骨组、益生菌组能有效的改善兔胃肠组织水肿及炎症情况;血浆内毒素的表达水平表明补脾组在降低兔血浆内毒素有较好的效果(P<0.05),三步止泻手法组、摩腹组、推上七节骨组及益生菌组对降低兔血浆内毒素也有一定的作用;OTU/ASV分析、Alpha多样性分析表明摩腹组及三步止泻手法组可纠正菌群紊乱,提高菌群的丰富度及均匀性,使肠道内环境恢复稳态。结论 三步止泻手法组具有刺激宿主产生免疫及清除功能、减少内毒素的吸收、调整肠道菌群间及其与人体生理机能的平衡状态,改善腹泻症状,且研究表明,各手法组在治疗中,针对性各有不同。