基于量子点荧光微球的三段式杂交反应法用于前列腺癌miRNA检测

目的建立基于量子点荧光微球的三段式杂交反应(three-segment hybridization,TSH)法并用于前列腺癌(prostate cancer,PC)微小核糖核酸(miRNAs)检测。方法制备二氧化硅微球(Bead)和量子点荧光微球(Qbead),分别经过表面改性及生物偶联寡核苷酸H1和H2制备成为Bead-H1和Qbead-H2;利用Bead和Qbead上偶联的寡核苷酸(H1和H2)和靶标miRNA之间的互补配对建立TSH法,检测产物的荧光强度并建立标准曲线;分别用TSH法和实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测7例PC患者临床组织样本miR-21的表达水平,比较两者之间的差异性并进行统计学分析。结果建立的TSH法对miR-21的最低检测限为0.16 pmol/L,且具有区分碱基突变的能力;其检测PC患者临床组织样本miR-21结果与qRT-PCR结果的相关性显著(r=0.983,P<0.001)。结论建立的TSH法可用于PC患者miR-21水平检测。