纯钛表面经三氟代乙烷磺酰氯固定纤维粘连蛋白的实验研究

目的研究外源性纤堆粘连蛋白(FIbronectin,Fn)固定于经三氟代乙烷磺酰氯(TresyI chloride)激活的纯坎表面后对细胞早期粘附的影响。方法将Fn直接固定于经tresyI chloride处理的纯钛表面,xPS分析表面元素及结合能;再将人牙周韧带细胞接种于其上。并分别在30min、60min、120min三个时间段用MTT比色法检测细胞粘附活力。荧光染色观察细胞形态和伸展。结果随时同延长。每组细胞粘附和伸展相均持续增加。30min、60min经处理并固定有Fn的实验组和对照组细胞粘附差异存在显著性(P<O．05),120min时两组间无量著性盖异(P>O．05)。结论纯钛表面经tresyl chloride处理并固定了Fn后,在早期能促进细胞的粘附。

纤维连接蛋白修饰的微沟槽钛片对人牙龈成纤维细胞活性影响的研究

目的:研究微沟槽钛片表面经三氟代乙烷磺酰氯激活并修饰纤维粘结蛋白(fibronectin,FN)后对人牙龈成纤维细胞(HGF)活性的影响。方法:将FN修饰于经过激活的微沟槽钛表面,XPS分析材料表面元素组成;使用cck8法检测HGF接种材料表面6h、12h、1d、3d、5d、7d后的细胞增值率;荧光染色观察接种3d时的细胞数量及形态。I型胶原纤维ELISA实验及Real-time PCR检测接种5d时材料表面对HGF分泌功能的差异。结果:在实验观察的6个时间段实验组材料细胞增值率高于对照组(P<0.05)。3d时HGF在实验组材料表面的伸展率高于空白组(P<0.05)。5d时FN修饰的两组材料上的细胞外I性胶原纤维的数量及mRNA的表达水平较空白组高(P<0.05)。结论:经三氟代乙烷磺酰氯处理修饰FN的微沟槽钛片可促进HGF的增殖、伸展及分泌功能。

两种沟槽钛片上纤维连接蛋白修饰方法的效果比较

目的:比较三氟代乙烷磺酰氯与硅烷化两种钛片上修饰纤维粘结蛋白(Fibronectin,Fn)方法的效果。方法:通过三氟代乙烷磺酰氯与硅烷化将Fn修饰于微沟槽钛表面,XPS分析不同材料表面元素组成;荧光染色观察接种不同材料表面的蛋白数量及分布。DAPI染色检测HGF接种在不同材料表面2、4、6h后早期附着细胞数。用cck8比较HGF接种不同材料表面6h、12h、1d、3d、5d、7d后细胞增值率。结果:XPS结果提示硅烷化组材料表面的纤维蛋白含量高于三氟组及空白组(P<0.05)。免疫荧光观察提示硅烷化组材料表面的纤维连接蛋白含量高于三氟组及空白组(P<0.05)。DAPI染色提示2h时3组材料细胞附着数相当,4、6h时硅烷化组材料表面上细胞数明显多于其他组材料(P<0.05)。CCK8结果提示硅烷化材料在6个观察时间段硅烷化组材料细胞增值率高于三氟组及空白组(P<0.05)。结论:硅烷化法在钛片上修饰纤维蛋白的效果优于三氟代乙烷磺酰氯的方法。