三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究

[目的]探讨系统地检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的方法。[方法]通过三甲氧苄氨嘧啶与马来酸酐反应，得到三甲氧苄氨嘧啶半抗原，再通过免疫动物得到抗三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体，并将其应用于能够检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的ELISA试剂盒。[结果]试验表明，该试剂盒对水质中三甲氧苄氨嘧啶的检测限为2．34μg／kg，IC50（50％抑制浓度）为4．8μg／L，回收率为60．5％～79．7％，试剂盒的标准曲线范围为0～80μg／L，批内、批间的相对标准偏差均小于10％，三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体与二甲氧苄氨嘧啶的交叉反应率小于1％，4℃下能够保存12个月，稳定性较好。[结论]研究可为监管三甲氧苄氨嘧啶的滥用提供参考。

三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究（英文）

[目的]探讨系统地检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的方法。[方法]通过三甲氧苄氨嘧啶与马来酸酐反应，得到三甲氧苄氨嘧啶半抗原，再通过免疫动物得到抗三甲氧苄氨嘧啶的单克隆抗体，并将其应用于能够检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的ELISA试剂盒。[结果]该试剂盒对水质中三甲氧苄氨嘧啶的检测限为2.34μg／kg，IC50（50％抑制浓度）为4．8μg／L，回收率为60．5％～79．7％，试剂盒的标准曲线范围为0～80μg/L，批内、批间的相对标准偏差均小于10％。三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体与二甲氧苄氨嘧啶的交叉反应率小于1％。4℃下能够保存12个月，稳定性较好。[结论]研究结果为监管三甲氧苄氨嘧啶的滥用提供参考依据。

三甲氧苄氨嘧啶胶体金免疫层析检测试纸条的研制

应用胶体金免疫层析技术建立了一种快速检测食品中三甲氧苄氨嘧啶(TMP)的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗TMP单克隆抗体并冻干于聚苯乙烯微孔中,TMP-OVA和羊抗鼠二抗分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装,切割成胶体金试纸条。测试结果表明,TMP快速检测试纸条的灵敏度为50μg/L,检测时间为5 min,特异性高,批内和批间重复性良好,与ELISA试剂盒方法和LC-MS/MS方法符合率为100%。使用简单方便,适合现场快速检测TMP。

呋喃唑酮和三甲氧苄氨嘧啶协同作用的试验

呋喃唑酮和三甲氧苄氨嘧啶协同作用的试验陈常中，乔军（塔里木农垦大学８４３３００）本文通过实验发现呋喃唑酮和三甲氧苄氨嘧啶（ＴＭＤ）合并使用时，可使呋喃唑酮作用增强１６倍，使ＴＭＰ的抑菌能力提高３２倍，并研究了二者之间的最佳配合比例。１材料呋喃唑酮：乌...

三甲氧苄氨嘧啶的合成研究进展

三甲氧苄氨嘧啶作为一种抗菌增效剂一直受到人们的广泛关注,经过多年的发展涌现出众多的合成路线。对典型的三甲氧苄氨嘧啶合成路线进行了介绍和分析,包括三甲氧基苯甲醛合成法、三甲氧基氯苄合成法、焦倍酚合成法等,并着重比较分析了三甲氧基苯甲醛合成法的几种改进路线,提出了三甲氧苄氨嘧啶合成的发展方向。

超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中的三甲氧苄氨嘧啶

建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC—MS／MS）测定多种基质（鸡肉、鱼肉、鸡肝、鸡蛋和牛奶）中三甲氧苄氨嘧啶的分析方法。样品用甲酸-乙腈（1：9，V／V）溶液提取，正己烷除脂净化，AcquityUPLCBEHC，8柱（1．7μm，2．1mm×50mm）分离，以甲醇和体积分数0．1％甲酸5mmol乙酸铵（V/V）作为流动相进行梯度洗脱，电喷雾正离子（ESI＋）模式电离，多反应监测（MRM）模式检测。结果表明：三甲氧苄氨嘧啶质量浓度在1．25～15．0μg/L范围内线性关系良好（r≥0．99）。方法的定量限（信噪比为10）为5．0μg／kg，在5．0，10．0μg／kg添加浓度的回收率为61．2％～108．5％，相对标准偏差（n=6）在1．4％～9．8％之间。方法适合于多种基质中三甲氧苄氨嘧啶的测定。

三甲氧苄氨嘧啶对养殖大菱鲆盾纤毛虫病治疗效果的研究

从感染纤毛虫的养殖大菱鲆上分离获得盾纤毛虫进行体外培养,通过药物抑制实验发现,三甲氧苄氨嘧啶(TMP)对盾纤毛虫的最小有效抑制浓度为25×10^(-6);TMP对大菱鲆的毒性实验表明,24小时半致死量为每千克鱼体内含药物量为0.35357 g,48小时半致死量为每千克鱼体内含药物量为0.33912 g,安全量为每千克鱼体内含药物量为0.09361 g;TMP对大菱鲆盾纤毛虫病的治疗实验结果显示,与对照组相比,注射药物或投喂药饵后,感染纤毛虫的大菱鲆成活率提高了50%～107.1%。

三甲氧基苯甲醛合成三甲氧苄二氨嘧啶的环化反应新工艺

在以三甲氧基苯甲醛为原料合成三甲氧苄二氨嘧啶的环化工艺中 ,提出了改 1次回流为 2次回流、环化阶段加入溶剂使反应从原来的固相状态改为液相状态下进行的新工艺 ,收率提高到 90 % ,由单因素实验和正交实验确定出工艺条件为 :“单甲醚”用量为 1 0 g时 ,第 1次回流温度为 80℃ ,回流时间 2 h,第 2次回流温度为 84～ 86℃ ,时间 3 h,环化阶段加入乙二醇单甲醚为溶剂 ,用量为 3 0 m L,硝酸胍用量为 1 1 g,反应温度1 0 0℃ ,反应时间 4h。产物经 IR、吸光度、熔点等分析鉴定 ,各项性能指标均符合中华人民共和国药典要求。

ELISA法检测蜂蜜中的三甲氧苄氨嘧啶残留量

三甲氧苄氨嘧啶（trimethoprim，TMP）有较强的抗菌作用，与抗生素合用制成磺胺增效剂。能数倍甚至数十倍增强抗菌作用；与磺胺类药物联合使用后抗菌谱扩大、抗菌活性大大增强，可从抑菌作用变为杀菌作用，对多种革兰阴性菌和阳性菌有效。但动物长期食用含三甲氧苄氨嘧啶的食品会产生耐药性甚至导致药物中毒。

三甲氧苄二氨嘧啶的热解动力学研究

采用热重法(TG)和微分热重法(DTG)对合成的磺胺增效剂三甲氧苄二氨嘧啶(TMP)进行了热稳定性研究.研究结果表明:在25℃～700℃范围内有一次失重过程.运用Kissinger和Ozawa等方法计算了其活化能,并运用Satava-Sestak积分方程得到了TMP的热解动力学参数,其中热分解积分函数采用[-ln(1-a)]1/n的形式.求得的热解反应活化能Ea=70.2276 kJ/mol,反应级数n=2.02298.得到的热解动力学方程为:dα/dt=3.3576×106exp(-7.0228×104/RT)(1-α)[-ln(1-α)]0.

增效磺胺嘧啶合剂对鸡沙门氏杆菌的功效

用鸡沙门氏杆菌进行体外试验表明:当TMP和SDZ的最小抑菌浓度值被降低到1/8时,这两种药物间的协同作用。TMP和SDZ的混合剂(60+300mg/L饭水给药)能减轻感染鸡沙门氏杆菌的鸡的内脏死后病变和降低细菌的分离数。故此种混和剂能抵抗禽病。在人医和兽医中,磺胺类药物与甲氧苄氨嘧啶配合应用正日益广泛。提倡应用磺胺嘧啶一三甲氧苄氨嘧啶合剂治疗家畜的各种感染。据报导,这种合剂对狗和猫疗效最高。自发现这两种药适合作为药代动力学模型后,在家禽,已建议将磺胺嘧啶作为与三甲氧苄氨嘧啶配合的首选药。在推荐这种合剂应用于临床实践前,已认识到该制剂对病原菌的功效。

动物源性食品中磺胺类药物增效剂残留的高效液相色谱-串联质谱法测定

利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定了蜂蜜、蜂王浆、触鱼、鳗鱼、猪肉、猪肾、猪肝、鸡肉、牛肉和牛奶中的三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧苄氨嘧啶和奥美普林3种磺胺类药物增效剂。除蜂王浆基质直接用10％三氯乙酸溶液提取外，其余基质均用10％三氯乙酸一乙腈（体积比7：3）混合溶液提取，提取溶液过阳离子交换固相萃取柱进行富集和净化。采用C18色谱柱，流动相为甲醇和0．1％甲酸溶液。选择1个母离子和2个子离子进行反应监测，对3种磺胺类药物增效剂残留进行定性，选择信号最强的子离子进行定量。在2—100ug／L范围内，分析物的线性相关系数r〉0．992。通过实际样品添加回收实验，所有基质定量下限为5．0ug／kg，3个添加水平的回收率为63％～89％，相对标准偏差为3．2％-6．9％。

鸡白痢沙门氏菌dfrA基因与Ⅰ类整合子的特征

1993～2006年间分离鸡白痢沙门氏菌141株,通过抗生素敏感性试验测定其对三甲氧苄氨嘧啶(TMP)耐药性,并用PCR方法检测dfrA基因的流行及与Ⅰ类整合子的关系。141个分离株对TMP的耐药率为90.8%(128/141)。128株TMP耐药性沙门氏菌中检测到4种dfrA基因,即dfrA1、dfrA12、dfrA13和dfrA17。dfrA12和dfrA17基因广泛分布。PCR产物测序表明:所有dfrA1和dfrA17基因都位于Ⅰ类整合子中;而dfrA12和dfrA13基因与Ⅰ类整合子无关,主要通过接合性质粒发生转移。鸡白痢沙门氏菌中TMP耐药性居于首位,其主要原因是dfrA基因广泛由接合性质粒和Ⅰ类整合子携带。

溴莫普林对几种动物病原菌的体外抗菌作用

采用试管二倍稀释法测定了溴莫普林 (BDP)对禽大肠杆菌 O78、沙门氏菌 C79-13 、金黄色葡萄球菌 2 80 0 1的最小抑菌浓度分别为 0 .313μg/ml、80 μg/ml及 6 40 μg/ml。BDP对病原菌的 MIC与 TMP相同或略优 ,与其它抗菌药物的联合抑菌作用和 TMP相似。

兽用抗菌增效剂

抗菌增效剂是广谱抗菌药物，曾称为磺胺增效剂，因其能增强多种抗生素的疗效，故现在称为抗菌增效剂。常用的抗菌增效剂有三甲氧苄氨嘧啶（TMP）、二甲氧苄氨嘧啶（DVD）、二甲氧甲基苄氨嘧啶（OMP）。本类药物均为淡黄色或白色结晶性粉末，味微苦，难溶于水，但可溶于酸及有机溶媒。

中西药结合防治仔猪细菌性腹泻

1红痢生后1~3日龄的仔猪出现腹泻多为红痢,即仔猪梭菌性肠炎。红痢的病原是C型或A型魏氏梭菌,该病的特征是排血便,混有小气泡,肠黏膜坏死,病程短,病死率高。该病抗生素治疗效果不明显,重在预防。C型魏氏梭菌灭活苗10m L,母猪产前一月和半月分别肌肉注射1次。