三白草酮对STZ糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡与氧化应激的保护作用

目的:探讨三白草酮(Sauchinone,Sch)对链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡及氧化应激的保护作用及其机制。方法:将雄性BALB/C小鼠50只,随机取出8只为正常对照组,其余小鼠用40 mg/kg STZ腹腔注射造模。测空腹血糖确认造模成功的32只小鼠,平均分为模型组、Sch低剂量组、Sch高剂量组和二甲双胍阳性对照组。分组后Sch低剂量组和Sch高剂量组分别灌胃Sch 10和30 mg/kg/次,二甲双胍阳性对照组灌胃100 mg/kg/次,每日一次,连续给药4周。正常对照组和模型组灌胃相同体积的生理盐水。Sch给药过程中每周测定体重,末次给药12 h后测定空腹血糖、血清胰岛素浓度、胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)、血清TNF-α,IL-6含量;检测胰腺组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;Western blot法检测胰腺组织中Bcl-2、Caspase-3和NF-κB蛋白的表达。结果:与模型组比较,Sch高剂量组在给药第3周和第4周体重显著增加(P<0.05),Sch低剂量和高剂量组小鼠空腹血糖显著降低(P<0.05),血清胰岛素浓度显著升高,并有剂量依赖性(P<0.05),且胰岛素抵抗指数显著降低(P<0.05);血清炎症因子TNF-α,IL-6含量显著下降(P<0.05);胰腺组织中MDA降低,而SOD和GSH-Px活性显著升高,且有剂量依赖性(P<0.05)。胰腺组织中Bcl-2蛋白表达显著增多,Caspase-3和NF-κB蛋白表达显著下调,并且有剂量依赖性(P<0.05)。结论:三白草酮具有保护糖尿病小鼠胰岛β细胞的作用,其机制可能通过抗炎症、抗氧化应激以及抑制凋亡所介导。

三白草酮抗炎抗肿瘤机制研究进展

三白草酮(SAU)是从传统中草药三白草中提取出来,具有一定生物学活性的木脂素类物质。主要通过干预多种信号通路及程序性细胞凋亡通路,改善细胞微环境,减少炎性因子释放,从而遏制炎症和肿瘤发生发展。本文阐述SAU抗炎及抗肿瘤作用机制的研究现状与进展,为SAU的深入研究及天然药物开发提供理论依据和借鉴。

三白草酮超临界CO_2萃取工艺优化及三白草超临界萃取物体外抗肿瘤活性

目的优化三白草酮超临界CO2萃取工艺,并评价三白草Saururi Herba超临界萃取物体外抗肿瘤活性。方法以萃取压力、萃取温度、萃取时间、夹带剂(乙醇)体积分数、夹带剂用量为影响因素,三白草酮提取率为评价指标,正交试验优化萃取工艺,MTT法测定萃取物对人肝癌细胞7721/Adm耐药株的抑制作用。结果最佳条件为萃取压力30 MPa,萃取温度50℃,萃取时间2 h,乙醇体积分数95%,用量1倍,三白草酮平均提取率0.173%。所得萃取物显著抑制了7721/Adm细胞增殖(IC50=50.08μg/mL),活性强于乙醇提取物(IC50=150.59μg/mL)。结论该方法稳定可行,适合萃取三白草酮,而且三白草超临界CO2萃取物具有较强的体外抗肿瘤活性。

三白草酮衍生物的合成及其保肝活性研究

目的对三白草中具有保肝活性的成分三白草酮进行结构修饰,意图得到保肝活性更强的衍生物。方法以三白草酮为原料,在四氢呋喃-甲醇碱性体系中,用NaBH4将C-2’羰基还原为羟基得衍生物A;再以乙酸酐为乙酰化试剂,DMAP为催化剂,吡啶为溶剂将该羟基酰化得衍生物B。以四氯化碳小鼠急性肝损伤模型考察衍生物的保肝降酶活性。结果得到2个尚未见文献报导的三白草酮衍生物A和B,其结构经1 H NMR,13 C NMR和Q-TOF-MS确定。药理实验表明A的降酶效果比三白草酮要好,B与三白草酮相当。结论将三白草酮中羰基还原为羟基能增强降酶活性,该羟基酰化后降酶活性与三白草酮相当。

HPLC法测定不同产地三白草中三白草酮的含量

目的:建立中药材三白草中三白草酮的含量测定方法。方法:岛津ODS-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(60:40),检测波长244 nm。结果:三白草酮含量测定线性范围为0.2—1.20μg,平均回收率为100.1%,RSD为1.88%。结论:方法可靠,简单可行,为控制三白草内在质量提供了科学依据。

三白草酮及衍生物的溶解性和保肝活性研究

目的考察三白草酮及衍生物的溶解性和保肝活性。方法采用HPLC测定三白草酮及衍生物在常用溶剂中的溶解度和正辛醇-水/缓冲液体系中的表观脂水分配系数(P);采用CCl4小鼠肝损伤模型考察其保肝活性。结果 25℃时三白草酮及衍生物A、B、C在水中的溶解度分别为(0.161±0.007),(12.4±0.57),(0.145±0.006),(0.667±0.031)mg/L;在正辛醇/水中的lgP分别为(3.32±0.13),(2.63±0.08),(3.28±0.08),(2.76±0.09);衍生物A的保肝降酶活性较三白草酮有所提高,衍生物B与三白草酮相当,衍生物C有肝损伤作用。结论衍生物A的lgP比三白草酮降低较多,可能会通过改善体内吸收提高药效;衍生物C的lgP虽有下降,但三白草酮中一个次甲二氧基被破坏,显示出肝损伤作用。

三白草酮通过调控海马Nrf2/HO-1表达减少酒精戒断大鼠抑郁样行为

目的:探讨三白草酮(sauchinone,Sau)对酒精戒断大鼠抑郁样行为可能的影响及其机制。方法:取成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为正常对照组、酒精戒断模型组、低剂量Sau治疗组和高剂量Sau治疗组,每组8只。正常对照组腹腔注射等体积生理盐水,其余3组每日1次腹腔注射酒精3 g/kg,连续28 d,然后戒断3 d诱导酒精戒断模型。在戒断期间,Sau低、高剂量治疗组分别每日1次腹腔注射5和25 mg/kg Sau,连续3 d。末次给药30 min后通过蔗糖偏好实验、悬尾实验(tail suspension test,TST)和强迫游泳实验(forced swimming test,FST)检测大鼠行为学变化;采用商品化试剂盒测定海马组织中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;Western blot检测海马核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达。使用H2O2(200μmol/L)诱导小鼠海马神经元HT22细胞氧化应激模型后,分别给予低、高剂量(3和30μmol/L)Sau干预,通过MTT法测定细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡水平;采用试剂盒测定细胞内T-SOD活性和MDA含量;免疫荧光法检测细胞核和细胞质Nrf2蛋白的表达。结果:与酒精戒断模型组比较,低、高剂量Sau治疗组大鼠蔗糖偏好率显著升高(P<0.05或P<0.01),TST和FST的不动时间均显著降低(P<0.05或P<0.01),大鼠海马中T-SOD、CAT和GSH水平显著升高而MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),同时大鼠海马中Nrf2和HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。体外实验显示,与氧化应激模型组比较,低、高剂量Sau组HT22细胞活力显著升高(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡水平显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞内T-SOD活性显著升高而MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),同时高剂量Sau组细胞核Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:Sau减少酒精戒断大鼠的抑郁样行为,其机制与通过调控海马中Nrf2/HO-1的表达来抑制氧化应激有关。

三白草酮对前列腺癌细胞PC3凋亡的影响及其机制研究

目的探讨三白草酮对前列腺癌PC3细胞凋亡的影响及其机制。方法从三白草中提取三白草酮,以不同剂量作用于PC3细胞,MTT法检测其对PC3细胞的抑制作用;流式细胞术检测其对PC3细胞周期的影响;Western blot检测其对ERK、p-ERK及细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达的影响;细胞划痕实验检测其对PC3细胞迁移能力的影响。结果三白草酮可抑制PC3细胞的增殖并发生G1期阻滞,抑制ERK磷酸化及Cyclin D1表达,降低PC3细胞的迁移能力。结论三白草酮可抑制前列腺癌PC3细胞的增殖,其作用机制可能是通过抑制MARK通路来实现的。

HPLC法同时测定三白草肝炎糖浆中去氢土莫酸、茯苓酸、三白草酮和里卡灵A的含量

目的：建立HPLC法同时测定三白草肝炎糖浆中去氢土莫酸、茯苓酸、三白草酮和里卡灵A的含量。方法：采用Hypersil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）色谱柱;流动相A采用乙腈-甲醇（1︰1）,流动相B采用0.05%磷酸溶液,进行梯度洗脱;流速为1.0 m L·min^-1;检测波长分别为244 nm（去氢土莫酸和茯苓酸）和230 nm（三白草酮和里卡灵A）。结果：去氢土莫酸、茯苓酸、三白草酮和里卡灵A分别在5.400-108.0μg·m L^-1（r=0.9995）、6.050-121.0μg·m L^-1（r=0.9992）、11.94-238.8μg·m L^-1（r=0.9997）、4.510-90.20μg·m L^-1（r=0.9994）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.23%、99.13%、97.99%、96.93%,RSD（n=6）分别为1.02%、0.76%、1.22%、0.88%。结论：本文建立的波长切换HPLC梯度洗脱法可实现同时测定去氢土莫酸、茯苓酸、三白草酮和里卡灵A 4种成分,方法操作简便,可作为三白草肝炎糖浆的质量控制方法。

三白草酮固体分散体的制备、体外溶出度及表征

目的:采用热熔挤出法制备三白草酮固体分散体,以改善三白草酮的溶出情况。方法:按照不同药辅比,通过热熔挤出技术以聚乙二醇6000为载体材料制备三白草酮固体分散体,采用HPLC测定固体分散体中三白草酮的含量,考察90min累积溶出度和溶出速率,比较不同药辅比所制得的固体分散体其体外溶出效果。采用红外光谱分析、X-射线衍射和扫描电镜对所制得固体分散体的相特征进行研究,鉴别三白草酮在固体分散体中的存在状态。结果:与物理混合物相比,药辅比为1:1、1:4制备所得的固体分散体中三白草酮的体外溶出度与溶出速度均有所提高,其中药辅比为1:4制备的三白草酮-聚乙二醇6000固体分散体的体外溶出度与溶出速度略优,其90min累积溶出度达到98%。红外光谱中,在固体分散体中三白草酮与聚乙二醇系列载体材料之间形成了氢键。X-射线粉末衍射分析,提示没有新的物相形成。结论:选择聚乙二醇6000为载体材料,采用热熔挤出法,按1:4比例制备三白草酮固体分散体,对三白草酮的溶出有改善作用。

三白草酮的药理作用研究进展

目的:推动三白草酮药理作用及其机制的研究。方法:查阅国内、外文献,综述近年来三白草酮在保肝、抗炎、神经保护及其他方面的药理作用及其机制。结果与结论:三白草酮作为一种结构独特的木脂素,具有广泛的药理活性,尤其在保肝方面,其可通过抗氧化、抗炎而起保肝作用。

HPLC测定三白草不同药用部位三白草酮的含量

目的：对三白草药材不同药用部位中的三白草酮含量进行分析比较。方法：采用Welch ultimate LP—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-水（60：40），流速1．0mL·min-1，检测波长240nm，柱温35℃。结果：三白草酮进样质量浓度在4．124—123．72μg·mL-1（r=0．9998）质量浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率（n=6）为100．4％，RSD为2．8％。10个不同产地样品中均为地上部分三白草酮的含量最高，根茎中的含量最低。结论：三白草不同药用部位中三白草酮的含量存在明显差异。确定药用部位对临床疗效及药材质量的稳定性具有重要意义。

三白草中三白草酮提取工艺优选

目的:优选三白草中三白草酮的提取工艺参数。方法:采用HPLC测定三白草酮提出量,并以此为指标,正交试验法对粉碎度、乙醇体积分数、料液比、提取时间、浸泡时间5个因素进行考察,优选最佳提取工艺。结果:最佳提取条件为药材过10目筛,95%乙醇提取2次,第1次加14倍量乙醇浸泡2 h,提取2 h;第2次加10倍量乙醇提取1 h。在此条件下,三白草酮平均提取得率0.21%,提取转移率为96%。结论:优选的提取工艺稳定、合理,可用于三白草中三白草酮的提取。

三白草总黄酮对Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖、脂代谢的影响

目的探讨三白草总黄酮对Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖、脂代谢的影响。方法采取高糖高脂饲料喂养+链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法复制Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型,随机分为模型对照组、罗格列酮组(4mg/kg)、三白草总黄酮2.7 g/kg组、三白草总黄酮5.4 g/kg组,另选取10只健康大鼠作为正常对照组。灌胃给药4周,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血脂(TG、TC、LDL-c、HDL-c)、游离脂肪酸(FFA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、空腹胰岛素(FINS)、计算胰岛素敏感性指数(ISI),进行统计学分析。结果与正常对照组比较,模型对照组FBG、TG、TC、LDL-c、FFA、MDA、FINS均呈现升高,HDL-c、SOD、ISI下降,差异具有统计学意义(P<0.01);治疗后与模型对照组比较,三白草总黄酮5.4 g/kg组的糖、脂代谢指标改善明显:FBG、TG、TC、LDL-c、FFA、MDA降低,HDL-c、SOD水平上升、ISI提高。差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论三白草总黄酮可改善Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的糖、脂代谢紊乱及胰岛素抵抗,推测其机制与降低血清FFA及改善氧化应激状态有关。

三白草总黄酮对高脂血症大鼠血流变学及血管内皮功能的影响

目的:探讨三白草总黄酮对高脂血症大鼠血流变学及血管内皮功能的影响。方法:雄性SD大鼠70只,随机分为正常组、模型组、阳性组(血脂康胶囊,100 mg·kg^(-1))和三白草总黄酮高(6.3 g·kg^(-1))、中(3.15 g·kg^(-1))、低剂量组(1.57 g·kg^(-1)),正常组给予基础饲料喂养,其余各组喂养高脂饲料复制高脂血症大鼠模型,模型复制成功后开始药物干预治疗,治疗6周后测定各组大鼠血脂指标[胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)]、血流变学指标及血管内皮细胞因子的表达水平。结果:给药6周后,与模型组相比,三白草总黄酮各剂量组对大鼠TC、TG、LDL-C、TXB2、ET^(-1)的表达水平有不同程度的降低,对HDL-C、6-keto-PGFla、NO表达水平有不同程度的升高,其中以三白草总黄酮的高剂量组作用效果最为明显,组间比较差异均有显著性(P<0.05);与模型组相比,三白草总黄酮各剂量组大鼠血浆黏度、血小板黏附率、全血黏度(高、中、低切)指标明显降低,组间比较差异显著性(P<0.05)。结论:三白草总黄酮能明显改善高脂血症模型大鼠的血脂水平,改善血流变学指标,使血液处于低浓、低黏、低聚、低凝状态,调节血管内皮功能,从而缓解血液流动阻力,增大血流量,促进机体的脂质代谢恢复正常。

三白草的质量标准研究

目的以三白草酮和里卡灵A为指标,建立三白草质量标准。方法采用薄层色谱法（TLC）为定性鉴别方法 ;HPLC法测定其中三白草酮和里卡灵A量。结果三白草酮在80.32-803.2 ng呈良好的线性关系：Y=25 668X＋19.71,R2=0.999 9;里卡灵A在40.24-402.4 ng呈良好的线性关系：Y=57 825X＋42.35,R2=0.999 5。三白草酮平均回收率为100.8%,RSD为2.13%,里卡灵A平均回收率为100.5%,RSD为2.57%。结论建立的方法简便、准确、可靠,可作为三白草质量控制方法 。

三白草药材及其抗肝纤维化有效部位中总木脂素的含量测定

目的建立三白草药材及其抗肝纤维化有效部位中总木脂素含量测定方法。方法以三白草酮为对照品,采用紫外分光光度法测定三白草药材及其抗肝纤维化有效部位中总木脂素含量。结果三白草酮在1.94～15.52μg/ml范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.6%,99.3%,RSD分别为1.61%,1.91%。结论方法简单,数据可信,为控制三白草及有效部位质量提供了可靠依据。