壳寡糖的制备及其对三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎模型的治疗作用

目的探究壳寡糖对结肠炎大鼠模型的治疗作用及分子机制。方法以脱乙酰度为87%、分子量为140 ku壳聚糖为原料,经酶解制备壳寡糖(COS)。将大鼠随机分为正常对照组(CON)、结肠炎模型组(TNBS)、5-氨基水杨酸(5-ASA)治疗组(TNBS+5-ASA)、COS治疗组(TNBS+COS)。以50%乙醇溶液为溶剂,用100 mg/kg 2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠结肠炎模型。实验过程中记录大鼠体质量并进行疾病活动指数(DAI)评估;于第2周处死大鼠,实验结束后取出结肠组织进行病理染色并评分;通过ELISA法测定大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的浓度;利用血细胞分析仪检测大鼠血液中血红蛋白和红细胞含量;免疫组化方法检测结肠组织Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和核因子kappa-B(NF-κB)表达水平。结果与TNBS组比较,TNBS+COS组大鼠的DAI、组织学评分、血清中TNF-α及IL-6等炎症指标显著降低(P<0.01);杯状细胞损伤减少,数量显著恢复(P<0.01);collagenⅠ和α-SMA表达减少(P<0.01),纤维化明显改善。结论COS对实验性结肠炎具有较好的治疗作用,能够缓解结肠组织炎症反应,保护肠道黏膜屏障,抑制肠道纤维化进程。

丙烯酸-2,4,6-三硝基苯乙酯的合成及热分解

以TNT、甲醛为原料,在弱碱性条件下反应合成得到2,4,6-三硝基苯乙醇(PicCH2CH2OH);PicCH2CH2OH在浓硫酸催化下和丙烯酸在甲苯中回流反应24h,合成得到丙烯酸-2,4,6-三硝基苯乙酯,产率为62%。采用紫外可见光谱(UV-Vis)、核磁共振氢谱(1HNMR)、红外光谱(FTIR)、质谱(MS)以及元素分析等对产物结构进行了表征。利用热重分析(TG)对产物热稳定性进行了研究,采用Kissinger方法和Ozawa方法计算其热分解活化能Ea分别为99.78,102.96kJ·mol-1。

聚三硝基苯的合成研究

以 1,3 二氯三硝基苯 (DCTNB)为原料 ,聚合反应合成了聚三硝基苯 (PNP) ,测定了产物的分子量、热分解温度和堆积密度 ,并讨论了反应中应注意的问题。

耐热炸药1，3-二（3’-氨基，2’，4’，6’-三硝基苯胺基）-2，4，6-三硝基苯的合成研究

成功的合成了1,3-二(3′氨基,2′,4′,6′-三硝基苯胺基)-2,4,6-三硝基幕,通过质谱、元素分析及核磁共振证明了中间体和产品的结构,并研究了反应时间、温度、催化剂及反应体系pH值对反应过程的影响.

聚氨基三硝基苯撑的合成

以聚三硝基苯撑(PNP)为原料,合成了聚氨基三硝基苯撑(PATNP)。利用FTIR,DTA对其结构和性能进行了分析。PATNP的热稳定性要好于PNP,撞击感度比PNP低,是一种很有发展前景的热稳定性炸药。

2,4,6-三硝基苯磺酸诱导溃疡性结肠炎大鼠模型的建立及评价

目的建立大鼠2,4,6-三硝基苯磺酸(TBNS)溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型。方法:大鼠经结肠注入不同剂量的2,4,6-三硝基苯磺酸,分别于给药后1、3及7 d处死大鼠取出结肠,肉眼观察后进行组织学切片然后镜下观察。结果:各组大鼠体质量于造模3 d后开始下降,50 mg·kg-1组体质量于7 d后开始出现回升,100 mg·kg-1组和150 mg·kg-1组体质量则没有恢复;造模时间不是影响UC(溃疡性结肠炎)损伤程度的主要因素;病理切片结果表明,50 mg·kg-1组可见炎性细胞浸润,未出现肠腺肿胀及黏膜脱落现象,符合UC(溃疡性结肠炎)的病理特征。结论:TNBS造模7 d内,UC(溃疡性结肠炎)的造模成功与否与给药天数无关,而与剂量密切关联,以50 mg·kg-1的大鼠给药剂量最为合适。

三硝基苯磺酸结肠炎动物模型的建立

目的：建立三硝基苯磺酸（ＴＮＢＳ）诱导的结肠炎动物模型，探讨炎症性肠病（ＩＢＤ）的发病机制。方法：每只实验组大鼠用０．８５ ｍｌ含３０ ｍｇ ＴＮＢＳ的５０％乙醇灌肠１次诱发远端结肠炎，对照组大鼠仅以５０％乙醇或ＴＮＢＳ盐水溶液灌肠。观察结肠大体形态和组织学改变，并检测肠粘膜髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性。结果：灌肠后第１～３周，实验组大鼠远端结肠表现为充血、水肿及溃疡形成，组织学以中性粒细胞浸润为主；第４～８周，溃疡逐渐愈合，组织学表现为淋巴细胞和浆细胞浸润；组织ＭＰＯ活性于ＴＮＢＳ／乙醇灌肠后第１天即开始升高，持续３周，第４周起明显降低。对照组大鼠结肠大体形态、组织学改变及ＭＰＯ活性在第１周即恢复正常。结论：ＴＮＢＳ／乙醇诱导大鼠远端结肠炎是一种较理想的ＩＢＤ动物模型，可作为研究ＩＢＤ发病机制及评估药物疗效的有益工具。

三硝基苯磺酸诱导Balb/c小鼠结肠炎的实验研究

目的建立三硝基苯磺酸(TNBS)小鼠结肠炎模型。方法采用不同剂量的TNBS给♀Balb/c小鼠灌肠后制备结肠炎模型。观察动物的存活率、疾病活动度指数、结肠肉眼观和组织学变化,并检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的活力及小鼠脾T淋巴细胞增殖情况。结果随着TNBS剂量的提高,模型组小鼠存活率下降。存活的多数小鼠疾病活动度指数及MPO活力升高,病理切片显示结肠固有层及粘膜下层有大量淋巴细胞、单核巨噬细胞以及中性白细胞浸润,伴有肠腺扭曲、减少,杯状细胞丢失,隐窝脓肿,血管增生,肠壁增厚等病理改变,表明均建立了慢性结肠炎模型。结论每只小鼠给予1.5mgTNBS灌肠,动物死亡较少,并能够成功制备小鼠结肠炎模型。

靛玉红缓解三硝基苯磺酸致大鼠溃疡性结肠炎及其机制研究

目的观察靛玉红对三硝基苯磺酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,并探讨其可能机制。方法 48只清洁级SD大鼠,♂,体质量(200±20)g,随机分为4组,分别为正常组、模型组、靛玉红组、柳氮磺吡啶组。造模并治疗7 d后,进行疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分,观察结肠HE染色病理切片,检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)水平,以及肠三叶因子(intestinal trefoil factor, ITF)mRNA表达。结果与模型组比较,靛玉红组DAI评分降低,结肠HE染色病理显示炎症细胞明显减少,TGF-β1水平降低,ITF mRNA表达升高,差异均有显著性(P<0.05)。结论靛玉红可以明显改善UC模型大鼠症状、结肠病理形态,通过降低TGF-β1水平,上调ITF mRNA表达,从而达到抑制炎症的效果。

基于1,1-二苯基-2-三硝基苯肼检测中药抗氧化成分的方法及其原理研究进展

目的:了解基于1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)检测中药抗氧化成分的方法及其原理的研究进展,为寻找天然抗氧化剂提供参考。方法:以"1,1-二苯基-2-三硝基苯肼""中药抗氧化成分""1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl""Antioxidant ingredients""Traditional Chinese medicine"等为关键词,组合检索2000年1月-2016年3月在Pub Med、Science direct、中国知网、维普、万方数据库中基于DPPH检测中药抗氧化成分方法及其原理的文献并进行综述。结果:共查阅到相关文献249篇,其中有效文献36篇。整理出DPPH-紫外分光光度法、DPPH-酶标仪法、DPPH-薄层色谱法、DPPH-电化学法、DPPH-电子顺磁共振(ESR)法、色谱技术联用法、流动注射分析法、高速逆流色谱法等8种筛选中药抗氧化成分的方法,分别利用了DPPH在特定波长下吸光度变化比例、酶联免疫反应显色与吸光度值大小关系、薄层色谱显色、电化学性质、电子顺磁共振技术、色谱技术、连续流动分析技术、液-液分配色谱技术。结论:基于DPPH筛选中药抗氧化成分方法众多。其中DPPH与新型色谱技术联用法受到研究人员关注,成为了目前广泛应用的检测中药抗氧化成分的方法。

不同浓度三硝基苯磺酸和乙醇诱导的大鼠克罗恩病模型

目的:用三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)和乙醇灌肠建立克罗恩病(Crohn disease,CD)大鼠模型,并比较不同乙醇浓度和用量对模型的影响。方法:按150 mg/kg标准,分别向大鼠肠道内灌注体积比为2:1的TNBS、50%乙醇混合液(实验1组),体积比为1:1的TNBS、50%乙醇混合液(实验2组),体积比为2:1的TNBS、无水乙醇混合液(实验3组),体积比为1:1的TNBS、无水乙醇混合液(实验4组)。生理盐水对照组注入等量生理盐水,正常对照组不予任何处理。于造模后第3、7、14和21天分批处死大鼠,观察各时间点结肠大体形态改变和组织学改变。结果:实验3组大鼠造模后1周内主要表现为肠壁非连续性糜烂、坏死及溃疡,镜下见大量炎性细胞浸润;第14天时黏膜呈鹅卵石样改变;第21天时病变明显好转,溃疡部位肠壁增厚明显,但光学显微镜下仍有明显炎症反应。实验1组在第3、7天时与实验3组的表现相似,第14天取材时症状和组织学改变均较实验3组轻,但组内大鼠间个体差异较大。实验2组第14天时大部分肠壁形态基本恢复正常。实验4组死亡率过高,组织损伤严重,且病理表现与克罗恩病差异较大。结论:体积比为2:1的TNBS、无水乙醇溶液灌肠造成的模型与人类克罗恩病症状表现近似,病理表现典型,炎症持续时间较长,是一种研究克罗恩病发病机制和评价治疗效果的较好的模型制备方法。

三硝基苯磺酸诱导小鼠溃疡性结肠炎模型制备的技术改良

目的:改良2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)硅胶管灌肠诱导制备小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型的方法,提高造模的成功率和模型的稳定性,并探索造模的适宜剂量和时间.方法:选用40只SPF级♂Balb/c小鼠,6-8周龄,随机分为正常对照组、不同浓度TNBS组(37.5mg/kg、75mg/kg、150mg/kg、200mg/k g),每组8只,使用"灌胃针"替代"硅胶管"灌肠,并于灌肠后2d和4d分别处死4只小鼠,观察不同组别小鼠生理状态、结肠组织的损伤及病理学的改变情况.结果:在"灌胃针"造模过程中未发生小鼠死亡现象;对照组小鼠一般情况及结肠黏膜组织无异常改变;小鼠灌肠后出现少食、少动、体质量下降、皮毛光泽度下降、腹泻、便血.不同浓度TNBS造模组随着TNBS剂量的增加,小鼠结肠黏膜组织出现充血、出血、水肿、炎症、溃疡的程度增加.HE染色可见结肠组织水肿、炎症细胞浸润、杯状细胞缺失、溃疡形成的程度逐渐增加.其中TNBS37.5mg/kg、75mg/kg组于造模后2d,以上损伤现象开始缓解,未形成稳定的UC模型;150mg/kg、200mg/kg组持续时间较长,以上损伤现象4d内未见明显缓解,150mg/kg组表现为较典型的UC模型,200mg/kg为重症UC模型.结论:对制造小鼠UC模型进行相关技术改进,使灌肠更加简便,提高造模效率,显著增加了模型的稳定性.

雷公藤红素对三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎的保护作用

背景:传统药物对炎症性肠病疗效不甚理想,寻找新型而有效的药物一直是该领域的研究热点。目的:观察雷公藤红素对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠结肠炎的保护作用,并初步探讨其可能机制。方法:以TNBS诱导大鼠结肠炎模型,将动物随机分为正常对照组、模型组、助溶剂对照组以及雷公藤红素低剂量组(每天0.5mg/kg)和高剂量组(每天1mg/kg)。以大体和组织学评分评价结肠炎症程度。以免疫组化方法检测结肠组织核因子(NF)-κBp65的表达,以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA的表达。结果:高、低剂量雷公藤红素均能显著改善结肠组织大体和组织学评分,降低NF-κBp65以及IL-1β、TNF-αmRNA的表达。结论:雷公藤红素对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有显著保护作用,抑制促炎细胞因子的产生可能是其主要作用机制之一。

己酮可可碱对2,4,6-三硝基苯磺酸肠炎模型的影响

目的 :观察己酮可可碱 (PTX)对 2 ,4 ,6 三硝基苯磺酸 (TNBS)肠炎模型影响。方法 :通过直肠给予雄性BALB/c小鼠TNBS诱导结肠炎 ,应用PTX对其进行治疗 ,6d后收集结肠标本评价结肠炎症程度 ;采用半定量RT PCR检测肠黏膜IL 18mRNA表达 ,采用免疫组织化学染色显示IL 18阳性细胞。结果 :直肠内给予BALB/c小鼠TNBS后可造成小鼠结肠炎性改变 ;PTX治疗可使小鼠疾病活动指数、结肠重量和炎症指数均显著下降 (P <0 .0 5 ) ,结肠IL 18mRNA和肠黏膜固有层表达IL 18细胞数显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 :PTX治疗可使TNBS肠炎模型小鼠肠黏膜局部IL 18表达显著下降 ,肠炎得以减轻。

1,3-二氯-2,4,6-三硝基苯的合成及其硝酯化

以间二氯苯为原料、发烟硫酸和硝酸钾为硝化剂,制备得到标题化合物(DCTNB)。以硝酸银为亲核试剂与DCTNB进行亲核取代反应,合成一种新型的含能化合物2,4,6-三硝基苯-1,3-二硝酸酯(TNPDN)。同时考察了硝化剂用量、反应温度和反应时间等工艺条件对DCTNB收率的影响。结果表明,较佳的工艺条件为100 m L发烟硫酸、35.5 g硝酸钾、反应温度为160℃、反应时间为4 h,收率为75.4%。DCTNB与硝酸银在50℃下反应2 h,TNPDN收率可达32.4%。经红外光谱、核磁共振、元素分析对产物进行结构表征。

3-氨基-2,4,6-三硝基苯甲醚的合成及性能

为了寻找含能共熔物中的辅助组分,合成了3-氨基-2,4,6-三硝基苯甲醚,并对其性能进行了初步研究。以市售苦味酸为原料,经过甲基化、替代氢的亲核取代反应,得到目标产物,产率达76%以上。产物和中间体的结构通过傅立叶红外光谱、核磁共振氢谱、元素分析进行了表征。对甲基化反应和替代氢的亲核取代反应机理进行了探讨。通过DSC和TG研究了3-氨基-2,4,6-三硝基苯甲醚的热分解性能,其吸热峰温为133.77℃,放热峰温254.10℃,在199.6℃,质量损失1.71%左右。采用特性落高法测得其撞击感度H50为82.5cm,爆炸概率法测得其摩擦感度为0%、其静电火花感度为V50=11.42kV,E50=1.99J。采用VLW软件计算理论爆速为7.459km.s-1(ρ=1.709g.cm-3),理论爆压为22.9GPa(ρ=1.709g.cm-3)。研究结果表明,3-氨基-2,4,6-三硝基苯甲醚具有较好的热稳定性,其感度低于TNT,理论爆速和爆压高于TNT,是一种性能良好的高能低感炸药,可作为辅助组分用于含能共熔物中。

美沙拉嗪缓释剂对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

目的研究美沙拉嗪缓释剂对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro picrylsulfonic acid,TNBS)诱导的溃疡性结肠炎肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6表达的影响,探讨美沙拉嗪缓释剂的抗炎机制。方法应用TNBS/乙醇建立大鼠溃疡性结肠炎模型,实验设正常对照组、模型组、药物治疗组(给予美沙拉嗪溶液100 mg.kg-1.d-1),阳性对照组(给予5-对氨基水杨酸100 mg.kg-1.d-1),每组10只,每天灌胃2次,给药时间从造模后第1天开始至实验结束,共7 d,观察大鼠疾病活动指数(disease index,DAI)、体质量变化及结肠病理学改变,生化法检查大鼠结肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA的表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠结肠组织MPO活性及TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达量明显增多(P<0.05)。与模型组和阳性对照组比较,药物治疗组MPO活性及结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA的表达明显减少(P<0.05)。模型组和阳性对照组差异无统计学意义。结论美沙拉嗪缓释剂对大鼠实验性溃疡性结肠炎具有治疗作用,其机制与通过降低中性粒细胞的浸润、抑制促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA等的表达有关。

阿格列汀治疗三硝基苯磺酸诱导的溃疡性结肠炎小鼠的实验研究

目的观察DPP-4抑制剂Alogliptin对三硝基苯磺酸诱导的溃疡性结肠炎模型小鼠结肠的MPO值,血清IL-8、TNF-α和GLP-2水平的影响,并探讨Alogliptin对炎症性肠病(IBD)的治疗机制。方法雄性BALB/c小鼠48只,分为6组,每组8只,分别为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶治疗组(520 mg/kg),Alogliptin高、中、低剂量组(1、0.3、0.1mg/kg)。模型组采用三硝基苯磺酸(TNBS)对BALB/c小鼠进行灌肠,制作溃疡性结肠炎小鼠模型,经灌胃给予药物治疗后,观察DPP-4酶抑制剂Alogliptin对肠炎小鼠腹泻,组织形态损伤,结肠组织MPO酶活力,血清IL-8、TNF-α和GLP-2含量的影响。结果与模型组相比,Alogliptin高、中剂量组能够改善肠炎小鼠临床症状,减轻结肠黏膜损伤,显著降低TNBS诱导的溃疡性结肠炎小鼠的DAI评分(P<0.01),并且治疗组小鼠结肠组织MPO酶活性、血清IL-8和TNF-α的浓度较模型组显著降低(P<0.05);而Alogliptin治疗组小鼠血清GLP-2的含量较模型组和正常组都有显著升高(P<0.05)。结论 DPP-4酶抑制剂Alogliptin能够有效抑制小鼠肠道炎性细胞的浸润,减轻肠黏膜的病理性损伤,对TNBS诱导的肠炎小鼠具有显著的治疗作用。

降解魔芋多糖对三硝基苯磺酸诱导实验性结肠炎的治疗作用

目的:观察降解魔芋多糖(DAKP)治疗2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎的疗效并探讨其作用机制.方法:将SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、地塞米松(DX)组及DAKP50,100,200mg/kg3种不同剂量组,每组动物10只.除正常对照组外,其余5组均以TNBS/乙醇造模.造模6h后,DAKP不同剂量组给予DAKP50,100,200mg/kg灌胃;DX组给予DX0.2mg/kg灌胃.均为1次/d,共5d.6d时以乙醚麻醉大鼠致死,并分别腹腔收集巨噬细胞,采用ELISA法检测巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;截取8cm结肠,称质量并计算结肠指数及溃疡面积;分离结肠黏膜,液氮速冻,测定髓过氧化物酶(MPO)活性;取2cm结肠组织40g/L甲醛固定,HE染色;摘取胸腺、脾脏称质量.结果:与模型组相比较,DAKP100,200mg/kg剂量组能够降低结肠指数,缓解黏膜水肿并能显著缩小结肠溃疡面积[(31.8±8.1)%,(30.9±6.4)%vs(41.5±9.1)%,P<0.05];降低结肠炎大鼠肠黏膜MPO水平[(96.7±2.2),(85.0±1.0)vs(161.7±2.3),P<0.05].TNF-α表达DAKP100,200mg/kg剂量组低于模型组[(215.1±7.2),(201.3±5.5)vs(306.9±8.1),P<0.05];与DX组相比较其疗效差异无显著性.结论:DAKP对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有显著治疗作用.低分子DAKP可能是调节胃肠道功能的主要有效成分.

新法合成1,3-二氨基-5-甲氨基-2,4,6-三硝基苯(英文)

以氯苯为原料,经过硝化-亲核氨化-氢的替代亲核取代反应合成了1,3-二氨基-5-甲氨基-2,4,6-三硝基苯,总产率达到了60.3%,产物和中间体的结构通过红外、核磁共振氢谱和元素分析进行了表征。DSC曲线显示1,3-二氨基-5-甲氨基-2,4,6-三硝基苯的热分解峰温是303℃,表明它有很好的热稳定性。