三硝基苯磺酸钠诱导的实验性大鼠结肠炎模型中的凝血异常

目的探讨炎症性肠病中凝血异常与炎症的关系。方法检测三硝基苯磺酸钠(trinitro-benzene-sulfonic acid TNBS)灌肠诱导大鼠结肠炎模型中的凝血指标明确有无凝血异常。将30只SD大鼠分为三组,(1)正常对照组:仅用生理盐水灌肠。(2)结肠炎1周组,TNBS灌肠1周后处死,模拟结肠炎中的急性炎症期。(3)结肠炎2周组:TNBS灌肠2周后处死,模拟慢性炎症期。处死后取血检查凝血酶原时间(prothrombin time PT)、活化部分凝血激酶时间(activated partial thromboplastin time APTT)、血小板计数以及抗凝血酶活性(antithrombin AT)。处死同时检查组织损伤和炎症水平指标。结果TNBS诱导的结肠炎模型中凝血酶原时间、活化部分凝血激酶时间均较正常对照组为短;抗凝血酶活性较正常对照组下降,血小板数目较对照组升高。差异均有统计学意义(P<0.05)。通过相关分析,组织损伤以及炎症指标和PT、APTT以及抗凝血酶活性成负相关(P<0.01),与血小板计数成正相关。结论TNBS诱导的结肠炎模型中存在凝血异常,且与病情严重程度有相关性。提示临床上的炎症性肠病中存在凝血异常和炎症活动水平关系紧密。本模型可以作为炎症激活凝血异常的模型来研究这一现象。

罗格列酮通过抑制肠系膜脂肪组织炎症改善三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS诱导的结肠炎小鼠的治疗作用及可能机制。方法选取雄性BALB/c小鼠20只建立TNBS结肠炎模型,造模成功后随机分为罗格列酮处理组及模型组,每组10只。罗格列酮处理组给予罗格列酮灌胃(0. 2 m L,[20 mg/(kg·d)]),模型组给予生理盐水(0. 2 m L/d)灌胃。处理6周后,处死所有小鼠。采用炎症性肠病疾病活动度指数(DAI)及HE染色结合Spencer结肠炎组织学评分评估两组小鼠肠道炎症程度及组织学改变,ELISA检测肠黏膜白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10水平及肠系膜脂肪组织IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平;脂肪组织HE染色后200倍光镜下拍照依据比例尺计算脂肪细胞直径;免疫组织化学染色法检测小鼠肠系膜脂肪组织F4/80阳性巨噬细胞浸润数量、脂肪细胞成熟标志物外周蛋白(peripherin)、脂连蛋白(adiponectin)及瘦素(leptin)水平。Western blot法检测小鼠肠系膜脂肪组织核因子κB(NF-κB)和信号通路中的NF-κBp65、磷酸化的NF-κBp65(p-NF-κBp65)、磷酸化的NF-κB抑制蛋白(p-IκB)及磷酸化的IκB激酶(p-IKK)的蛋白水平。结果罗格列酮处理后第5及6周,小鼠DAI评分显著低于模型组。同时,处理组小鼠肠黏膜IL-1β及TNF-α水平显著低于模型组,而IL-10水平显著高于模型组。与模型组小鼠相比,罗格列酮处理组小鼠肠系膜脂肪细胞直径及脂肪细胞成熟标志物perilipin水平均显著高于模型组。同时,罗格列酮处理组小鼠肠系膜脂肪组织巨噬细胞浸润数量及炎症介质IL-6、MCP-1水平均显著低于模型组。罗格列酮治疗显著促进处理组小鼠肠系膜脂肪细胞adiponectin的表达,而抑制leptin的水平。罗格列酮处理组小鼠肠系膜脂肪组织NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IKK及p-IκB蛋白水平均显著低于模型组。结论罗格列酮可显著抑制TNBS模型小鼠肠道炎症,可能与抑制肠系膜脂肪组织NF-κBp65通路有关。

健脾清肠通络方对三硝基苯磺酸钠诱导重症炎症性肠病肠纤维化小鼠作用机制研究

目的探讨健脾清肠通络方对三硝基苯磺酸钠(TNBS)灌肠诱导重症炎症性肠病小鼠肠纤维化的抑制作用。方法将40只C57BL/6雄性小鼠根据体质量编号,随机分为正常组、模型组、健脾清肠通络方组和美沙拉嗪组。除正常组小鼠外,其余3组小鼠均建立TNBS诱导炎症性肠病肠纤维化模型,正常组和模型组给予等体积(0.3 mL/d)生理盐水,健脾清肠通络方组和美沙拉嗪组分别用健脾清肠通络方、美沙拉嗪给小鼠灌胃,干预2周。观察各组小鼠体质量、疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度及质量,小鼠结肠组织大体评分比较,小鼠血清结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)表达及结肠组织转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组小鼠体质量明显减轻(P<0.05)、DAI评分明显增加(P<0.05),结肠长度明显缩短(P<0.05)、结肠质量明显增加(P<0.05);经健脾清肠通络方和美沙拉嗪干预后,小鼠体质量、DAI评分、结肠长度和结肠质量均有不同程度的改善(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组小鼠结肠组织大体评分、病理评分均增加(P<0.05);与模型组比较,健脾清肠通络方组和美沙拉嗪组小鼠结肠组织大体评分、病理评分均减少(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清CTGF和PCⅢ表达均增加(P<0.05);经健脾清肠通络方干预后小鼠血清CTGF和PCⅢ表达均减少(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组结肠组织TGF-β1、CTGF、PCⅢ蛋白表达增加(P<0.05);经健脾清肠通络方和美沙拉嗪干预后小鼠结肠组织TGF-β1、CTGF、PCⅢ蛋白表达减少(P<0.05)。结论健脾清肠通络方可能通过降低TGF-β1、CTGF、PCⅢ蛋白表达来抑制肠纤维化。

三硝基苯磺酸结肠炎动物模型的建立

目的：建立三硝基苯磺酸（ＴＮＢＳ）诱导的结肠炎动物模型，探讨炎症性肠病（ＩＢＤ）的发病机制。方法：每只实验组大鼠用０．８５ ｍｌ含３０ ｍｇ ＴＮＢＳ的５０％乙醇灌肠１次诱发远端结肠炎，对照组大鼠仅以５０％乙醇或ＴＮＢＳ盐水溶液灌肠。观察结肠大体形态和组织学改变，并检测肠粘膜髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性。结果：灌肠后第１～３周，实验组大鼠远端结肠表现为充血、水肿及溃疡形成，组织学以中性粒细胞浸润为主；第４～８周，溃疡逐渐愈合，组织学表现为淋巴细胞和浆细胞浸润；组织ＭＰＯ活性于ＴＮＢＳ／乙醇灌肠后第１天即开始升高，持续３周，第４周起明显降低。对照组大鼠结肠大体形态、组织学改变及ＭＰＯ活性在第１周即恢复正常。结论：ＴＮＢＳ／乙醇诱导大鼠远端结肠炎是一种较理想的ＩＢＤ动物模型，可作为研究ＩＢＤ发病机制及评估药物疗效的有益工具。

己酮可可碱对2,4,6-三硝基苯磺酸肠炎模型的影响

目的 :观察己酮可可碱 (PTX)对 2 ,4 ,6 三硝基苯磺酸 (TNBS)肠炎模型影响。方法 :通过直肠给予雄性BALB/c小鼠TNBS诱导结肠炎 ,应用PTX对其进行治疗 ,6d后收集结肠标本评价结肠炎症程度 ;采用半定量RT PCR检测肠黏膜IL 18mRNA表达 ,采用免疫组织化学染色显示IL 18阳性细胞。结果 :直肠内给予BALB/c小鼠TNBS后可造成小鼠结肠炎性改变 ;PTX治疗可使小鼠疾病活动指数、结肠重量和炎症指数均显著下降 (P <0 .0 5 ) ,结肠IL 18mRNA和肠黏膜固有层表达IL 18细胞数显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 :PTX治疗可使TNBS肠炎模型小鼠肠黏膜局部IL 18表达显著下降 ,肠炎得以减轻。

三硝基苯磺酸/乙醇与免疫复合物联合诱导的结肠炎动物模型

目的建立三硝基苯磺酸/乙醇与免疫复合物联合诱导的结肠炎动物模型,探讨炎症性肠病的发病机制。方法SD大鼠168只,雌雄各半,分为:①正常对照组42只,②三硝基苯磺酸/乙醇模型组42只,③免疫复合物组42只,④三硝基苯磺酸/乙醇与免疫复合物联合诱导的结肠炎动物模型组42只(以上每组雌雄各半)。分别于造模后1、2、3、4、6、9、12周末将大鼠处死(每组每周处死6只)。观察各组结肠大体形态和组织学改变,并检测肠黏膜髓过氧化物酶(MPO)活性,大便潜血实验。结果三硝基苯磺酸/乙醇与免疫复合物联合诱导的结肠炎动物模型组大鼠大体形态损伤评分均数为5·8571±0·8431;组织学损伤评分均数为4·8571±0·3542;MPO均数为3·8588±0·8625;OBT积分均数为4·1429±0·6010皆明显高于其余各组,具有统计学意义。结论上述联合诱导的结肠炎动物模型是一种较理想的IBD动物模型,可作为研究IBD发病机制及评估药物疗效的有益工具。

结肠康对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

目的:探讨结肠康对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro picrylsulfonic acid,TNBS)诱导的溃疡性结肠炎的治疗作用。方法:2%TNBS的50%乙醇溶液一次性灌肠建立小鼠溃疡性结肠炎模型,结肠康51.2、25.6、12.8g/kg三个不同剂量灌胃治疗两周,通过观察小鼠体重变化、死亡率、是否有稀便、血便及血便的潜伏期和持续时间以及结肠病理学改变,检测结肠康对TNBS诱导小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。结果:与空白组小鼠相比,模型组小鼠体重增加明显减少、死亡率高、稀便/血便的潜伏期短和持续时间长以及结肠炎性改变;三个剂量结肠康不同程度地使小鼠的体重减轻、死亡率增加、稀便/血便潜伏期缩短和持续时间延长以及结肠的炎性病理改变得到改善。结论:结肠康对小鼠实验性溃疡性结肠炎具有治疗作用。

植物乳杆菌对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎的治疗作用

目的:评估益生菌植物乳杆菌(LP)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导小鼠肠道炎症损伤的治疗作用,并探讨其可能的作用机制.方法:将成年♀Balb/c小鼠随机分成3组:正常对照组(Control组),TNBS灌肠诱导小鼠结肠炎组(TNBS组)和LP干预组(TNBS+LP组).TNBS诱导肠炎模型建立后,给予TNBS+LP组小鼠灌胃LP3wk,其余两组灌胃空白对照PBS液.实验结束后对大鼠一般情况、结肠大体损伤及组织学损伤进行评估,并对各组小鼠结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性、LTB4含量及促炎细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达进行测定.结果:与TNBS诱导的TNBS组相比,LP明显减轻了TNBS诱导的小鼠结肠炎症,表现为疾病活动指数下降(3.37±0.36vs0.97±0.47,P<0.05),结肠大体和组织学评分显著降低(1.11±0.61vs4.62±0.40;1.48±0.40vs5.39±1.12,均P<0.05),且LP显著降低了TNBS诱导的小鼠结肠黏膜内中性粒细胞浸润,这与MPO活性降低相一致(25.14U/g±5.22U/gvs90.3U/g±7.70U/g,P<0.05).此外,LP明显降低了TNBS诱导的小鼠结肠内具有化学趋化活性的LTB4含量(3.13ng/g±0.10ng/gvs8.43ng/g±0.49ng/g,P<0.05)和增加了促炎细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达(205ng/g±68ng/gvs375ng/g±79ng/g;446ng/g±116ng/gvs603ng/g±109ng/g,均P<0.05).结论:口服植物乳杆菌能有效缓解TNBS诱导的小鼠结肠炎症状,其作用机制可能与其降低白细胞聚集及促炎细胞因子的表达有关.

采用三硝基苯磺酸法测定乳基婴幼儿配方奶粉中的有效赖氨酸

采用三硝基苯磺酸法建立了乳基婴幼儿配方奶粉中有效赖氨酸的测定方法,研究了乙醚用量、水解时间以及三硝基苯磺酸的孵化时间对水解液吸光度的影响。方法线性范围为0.02～0.12 mg/mL,相关系数r2=0.999 3,检出限为3.72μg/mL,定量限为10.23μg/mL,样品重复性相对标准偏差RSD为1.55%～5.57%,回收率为86%～115%。

1,3,5-三硝基苯在高岭石表面吸附的理论研究

构造了高岭石硅氧层和铝氧层的团簇模型(分别为Si13O37H22和Al6O24H30),并分别在B3LYP/6-31G(d),MP2/6-31G(d)//B3LYP/6-31G(d)和B3LYP/6-311++G(d,p)//B3LYP/6-31G(d)理论水平上对1,3,5-三硝基苯(TNB)在高岭石表面的吸附性质(如优化的几何构型、结构参数、吸附能、振动频率、静电势和分子轨道等)进行了研究.结果表明,TNB和硅氧层表面间的相互作用以静电和范德华相互作用为主;TNB与铝氧层间的相互作用以氢键为主,且TNB和铝氧层间相互作用的能量更低,结构更稳定.

TNBS诱导的草鱼肠炎模型

通过建立草鱼肠道炎症模型，为经济鱼类炎症性肠病发病机理研究及药物筛选提供实验平台。于水温28℃条件下，从草鱼肛门插管注入0．25mL浓度为2．5％的三硝基苯磺酸（TNBS）50％乙醇溶液，诱发草鱼肠炎，注入等体积0．7％生理盐水作为对照，观察草鱼机体损伤程度、肠道组织病理，分析不同肠段组织内髓过氧化物酶（MPO）活性及IL-1β、IL-8和TNF-a等炎性相关基因表达量。病理观察结果显示，实验期间实验鱼未出现死亡现象，经TNBS诱导后出现较严重的肠道炎症，肠灌TNBS后1d，草鱼肠粘膜严重充血溃烂，肠道组织中出现大量炎性细胞浸润；3d后出现腹水，损伤部位招募大量炎性细胞，溃疡开始愈合；7d后炎性细胞逐渐减少，出现杯状细胞，呈慢性炎症；14d时腹水减少，肠粘膜中杯状细胞丰富，21d仅有少量炎性细胞，肠道组织基本恢复正常。TNBS诱导后1d，MPO活性极显著升高，3d后明显下降，至第7天趋于正常，与组织病理变化趋势一致。TNBS致炎后第1天，IL-1β、IL-8和TNF-a等炎性相关基因表达量极显著升高，3d时开始下降，3～14d表达量略高于对照组，急性炎症转为轻微的慢性炎症，21d时基本恢复到正常水平。结果还显示，不同肠段间的炎症反应存在差异，第三、四肠段明显较第一、二肠段严重。本研究构建的草鱼TNBS肠炎模型稳定，可作为鱼类肠炎病理机制研究和新型药物筛选的良好工具。

黄芩汤抗TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎活性研究

目的研究黄芩汤水煎液中主要成分及对2,4,6-三硝基苯磺酸钠(TNBS)造模balb/c小鼠的溃疡性结肠炎的作用。方法 HPLC-MS法分析水煎液成分。雄性balb/c小鼠随机分为空白对照组,TNBS模型组,柳氮磺嘧啶阳性对照组(500 mg·kg-1),黄芩汤水煎液1,2,4 g·kg-1治疗组。TNBS造模7 d后,研究各组小鼠的结肠病理评分、微观评分、体质量、小鼠结肠长度和血清髓过氧化物酶(MPO)。结果与标准品对照,黄芩汤水煎液中含有复方中主要成分,黄芩汤水煎液可使TNBS造模balb/c小鼠的体质量明显增加,改善身体的一般状况和小鼠结肠黏膜的损伤,下调MPO。结论黄芩汤水煎液中含有各药物的主要成分,对TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用。

己酮可可碱对小鼠TNBS结肠炎的药效学研究

目的观察己酮可可碱(PTX)对小鼠TNBS(三硝基苯磺酸)肠炎的作用。方法通过直肠给予雄性BALB/c小鼠TNBS诱导结肠炎,应用PIX对其进行治疗,6日后收集结肠标本评价结肠炎症程度。结果直肠内给予BALB/c小鼠TNBS后可造成小鼠结肠炎性改变PTX治疗可使小鼠疾病活动指数、结肠重量和炎症指数均显著下降(P <0 0 5 )。结论PTX治疗可使TNBS肠炎模型小鼠肠道炎症减轻。

地塞米松对TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎的治疗作用

目的 观察地塞米松对大鼠实验性结肠炎的治疗作用及副作用。方法 用TNBS/乙醇复制大鼠结肠炎模型 ,6h后给予地塞米松 (Dexamethasone,DX) 0 1mg/kg进行治疗 ,于处死动物前一天采血行白细胞计数并分类 ,5、7、1 0、1 4d处死动物 ,分离结肠 ,计算溃疡面积 ;取结肠粘膜测定SOD、MPO活性。结果 地塞米松能明显缩小溃疡面积 ,抑制炎症反应 ,减轻结肠重量 ,降低结肠粘膜MPO水平 ;并能升高结肠粘膜SOD的活性 ,促进溃疡愈合。在地塞米松发挥治疗作用的同时 ,可见明显的免疫抑制作用 ,表现为胸腺萎缩 ,白细胞数减少。结论 DX对TNBS/乙醇诱导的实验性结肠炎具有显著的治疗作用 ,但长期使用副作用明显 。

微生态制剂对TNBS诱导的大鼠结肠炎的疗效

目的:评价双歧三联活菌对三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的大鼠结肠炎的疗效,并探讨其作用机制.方法:成年♀SD大鼠(n=50),随机分为健康对照组A、未治疗组B、双歧三联活菌治疗组C、奥沙拉秦治疗组D、双歧三联活菌和奥沙拉秦联合治疗组E(n=10).观察大鼠的一般情况,检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、结肠组织TNF-α细胞阳性率,比较结肠组织炎症程度.结果:A组大鼠DAI(P<0.001)、血清TNF-α(P<0.001)水平、肠组织TNF-α细胞阳性率(P<0.05)、肠组织学评分(P<0.05)显著低于未治疗组B;B组大鼠DAI、血清TNF-α水平、肠组织学评分、肠组织TNF-α细胞阳性率最高(P<0.05);3个治疗组C、D、E的大鼠DAI、血清TNF-α、肠组织TNF-α细胞阳性率明显下降,肠组织炎症明显消散,以E组最显著(P<0.05),肠组织TNF-α的表达与结肠炎病情轻重呈正相关.结论:双歧三联活菌能有效治疗TNBS诱导的大鼠结肠炎,其作用机制可能与抑制肠黏膜免疫系统效应细胞TNF-α的表达有关.

TNB/1,4⁃DNI共晶炸药的制备与表征

采用溶剂挥发法制备获得1,3,5⁃三硝基苯/1,4⁃二硝基咪唑(TNB/1,4⁃DNI)共晶炸药,通过单晶X射线衍射表征共晶结构,其晶体属于正交晶系,P2_(1)2_(1)2_(1)空间群,晶胞参数:a=6.4068(5)Å,b=10.4569(8)Å,c=20.7164(17)Å,α=β=γ=90°,ρ=1.776 g·cm^(-3),Z=4。采用差示扫描量热法(DSC)分析其热性能,结果表明其熔点为84.4℃,明显低于单组份TNB(123.5℃)和1,4⁃DNI(91℃)的熔点,且TNB/1,4⁃DNI共晶炸药经熔融冷却能够重新形成纯共晶炸药。采用经验氮当量法计算得到TNB/1,4⁃DNI共晶炸药的爆速为7704 m·s^(-1),爆压为26.08 GPa,明显优于常用熔铸炸药TNT的爆轰性能。因此,TNB/1,4⁃DNI共晶炸药可作为一种新型熔铸炸药。

溃疡性结肠炎大鼠模型不同建立方式比较

目的对比分析溃疡性结肠炎大鼠三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇模型和右旋糖酐硫酸钠(DSS)模型的差异性。方法18只雄性Wistar大鼠随机分为TNBS/乙醇组(TNBS/乙醇建模)、DSS组(DSS建模)、健康对照组(不做处理)各6只。建模后7 d剖杀取材,行疾病活动指数(DAI)评分,对大鼠结肠组织进行损伤评价及结肠组织病理学苏木素-伊红(HE)染色切片,过碘酸雪夫(PAS)染色的观察。结果TNBS/乙醇组和DSS组DAI评分明显高于健康对照组(P<0.01)。而TNBS/乙醇组和DSS组DAI评分差异无统计学意义(P>0.05)、TNBS/乙醇组死亡2只,较DSS组和健康对照组死亡率显著增加(P<0.01)、结肠损伤评价显示TNBS/乙醇组和DSS组均对结肠黏膜造成损伤,TNBS/乙醇组损伤较重、结肠组织病理学观察HE染色显示健康对照组黏膜结构完整,无炎症,杯状细胞丰富,TNBS/乙醇组和DSS组黏膜损伤,炎症浸润,TNBS/乙醇组炎症浸润较深,范围较广、结肠组织病理学观察PAS染色显示健康对照组可见大量染色阳性的含黏液杯状细胞,TNBS/乙醇组和DSS组黏液素较健康对照组明显减少(P<0.05);TNBS/乙醇组和DSS组未见明显差异(P>0.05)。结论TNBS/乙醇和DSS均可建立溃疡性结肠炎模型,且模型在组织病理学和症状特征等方面具有差异性。

培菲康对实验性溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、IL-10水平的影响

目的阐明培菲康对三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)TNF-α、IL-10水平的影响,寻求UC治疗的有效新途径。方法成年雌性SD大鼠50只,随机分成5组(n=10):正常对照组(G1)、模型对照组(G2)、培菲康治疗组(G3)、奥沙拉嗪治疗组(G4)、培菲康和奥沙拉嗪联合治疗组(G5),经不同处理和治疗后,通过免疫组化染色观测各组大鼠结肠组织中TNF-α(两步法)、IL-10(S-P法)表达情况,通过实时荧光定量PCR分析结肠组织中TNF-α、IL-10mRNA的表达水平。结果G1组各指标显著低于G2组(P<0.001),肠组织结构正常;与G2组相比,G3、G4、G5组TNF-α、IL-10细胞阳性率和TNF-α、IL-10mRNA的表达水平显著降低(P<0.001);与G3或G4组相比,G5组TNF-α、IL-10细胞阳性率和TNF-α、IL-10mRNA的表达水平也显著降低(P<0.001);G3或G4组之间,TNF-α、IL-10细胞阳性率及TNF-αmRNA水平无差别(P>0.05),而G4组IL-10mRNA水平明显低于G3组(P<0.001)。结论TNF-α、IL-10在溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展过程中起重要作用,培菲康能明显降低该过程中肠组织TNF-α、IL-10的表达水平,可能通过调控这两个细胞因子的表达而发挥疗效。

乌司他丁对大鼠实验性溃疡性结肠炎的作用

目的探讨乌司他丁对大鼠实验性溃疡性结肠炎（UC）的作用及机制。方法120只SD大鼠随机分为4组，每组各30只。使用三硝基苯磺酸钠（TNBS）建立UC模型，I组不使用乌司他丁，为造膜对照组；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别于造模0、6、12h使用乌司他丁，剂量为2万单位／kg，为研究组。检测分析各组肠静脉内毒素、肿瘤坏死因子仪（TNF-α）和UC模型症状积分（实验开始24、72、168h各观察10只大鼠）。结果①在实验各时段，使用乌司他丁组UC大鼠病变积分均低于I组（均P〈0．05），且24、72h时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组差异均有统计学意义[24h：（1．8±0．4），（2．7±0．3），（3．0±0．1）；72h：（3．7±2．3），（4．2±1．2），（5．0±0．9），均P〈0．05]，但168h时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组未见明显差异。②使用乌司他丁组肠静脉内毒素含量在实验各时期内均低于I组，24h时Ⅱ组与Ⅲ组、Ⅳ组之间差异均有统计学意义[（97．7±11．7）ng／L比（117．1±9．7）ng／L，（124．3±4．9）ng／L，均P〈0．05]，72、168h时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肠静脉血内毒素含量差异无统计学意义。③24h时Ⅱ组TNF-α低于I组及Ⅲ、Ⅳ组[（6．7±2．6）pg／100μg比（13．5±1．7），（11．8±2．8），（12．4±2．7）pg／100μg，均P〈0．05）]，但72、168h使用乌司他丁各组低于I组。结论乌司他丁对TNBS导致的大鼠UC有明显防护作用，其机制可能通过抑制内毒素水平而降低免疫异常水平。

溃疡性结肠炎模型的构建及其炎症反应机制研究

目的：构建2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS）以及恶唑酮（oxazolone,OXZ）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）模型。方法：120只昆明小鼠（）随机分为4组（n=30）。Ⅰ组、Ⅱ组参照Morris及Walter的方法制备小鼠TNBS模型：Ⅰ组（TNBS溶剂对照组）,50%乙醇0.1 m L灌肠;Ⅱ组（TNBS模型组）,0.6%TNBS溶液0.1 m L灌肠;两组灌肠给药一次后在d 1、d 2、d 3、d 5、d 7每组处死6只。Ⅲ组、Ⅳ组参照Heller方法制备小鼠OXZ模型：Ⅲ组（OXZ溶剂对照组）,皮肤涂抹100%乙醇0.1 m L,每天一次,连续2 d,d 7以50%乙醇0.1 m L灌肠;Ⅳ组（OXZ模型组）,皮肤涂抹1%OXZ溶液（100%乙醇溶解）0.1 m L每天一次,连续2 d（致敏）,d 7以0.5%OXZ（50%乙醇溶解）0.1 m L灌肠;两组灌肠给药一次后在d 1~d 5每天处死6只小鼠。观察Ⅰ~Ⅳ组小鼠疾病活动指数（disease activity index,DAI）、结肠组织大体损伤指数（colon macroscopic damage index,CMDI）和病理组织学评分（histopathological score,HPS）,并检测小鼠结肠组织中髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的水平。结果：两种模型组小鼠DAI,CMDI和HPS均较对照组有明显改变;TNBS和OXZ诱导的结肠炎均可导致MPO明显上升,TNBS结肠炎TNF-α明显上升,OXZ结肠炎IL-4明显下降。结论：TNBS及OXZ均能诱导小鼠溃疡性结肠炎模型。两种模型各有特点,其中TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎以辅助性T1（helper1,Th1）型炎症反应为主,OXZ诱导的小鼠溃疡性结肠炎以辅助性T2（helper2,Th2）型炎症反应为主。