气相色谱法同时测定大蒜素原料药中三硫二丙烯、二硫二丙烯及有关物质的含量

目的建立一种同时检测大蒜素原料药指标成分及有关物质的气相色谱方法。方法用HP-5弹性石英毛细管柱及程序升温技术,以苯乙酮为内标,正己烷为溶剂,FID检测器检测,内标法计算三硫二丙烯、二硫二丙烯含量,面积归一化法计算有关物质的量。结果三硫二丙烯回收率98.71%,RSD=0.86%;二硫二丙烯回收率97.28%,RSD=1.33%。结论该方法简单、快速、准确,可用于大蒜素原料药含量测定及有关物质的限度控制。

聚乙二醇相转移催化法合成三硫二丙烯

以PEG-400为相转移催化剂合成三硫二丙烯，以提高收率和产品中三硫二丙烯含量。运用正交实验寻找该反应的最佳工艺条件。最佳反应条件为：在40℃保温3h，PEG～400用量是氯丙烯量的2％，pH值维持在8～9。在最佳反应条件下，产品收率达86．3％，其中三硫二丙烯含量达94．2％。

薄层扫描对蒸馏法制备的大蒜油中三硫二丙烯的含量测定

采用双波长薄层扫描法对蒸馏法制备的原蒜油和豆油的混合物中主要有效成份三硫二丙烯进行了含量测定的研究,结果三硫二丙烯在检测范围内线性关系良好。相关系数为0.9979,加样回收率平均为98.7%,RSD 为2.7%(n=5),本法可用于蒸留法制备的大蒜软胶囊中三硫二丙烯的含测。

三硫二丙烯调节免疫因子保护异烟肼和利福平联合引起的小鼠肝损伤

目的探讨三硫二丙烯(Diallyltrisulfide,DATS)对异烟肼(Isonicotinic acid hydrazide,INH)和利福平(Rifampicin,RFP)联合用药所导致小鼠肝损伤的保护效果评价及其可能的机制。方法将96只雄性昆明小鼠完全随机分空白对照组、DATS对照组、INH+RFP处理组和DATS低、中、高剂量联合处理组,每组16只。DATS低、中、高联合处理组及DATS对照组分别给予10、20、40和40 mg/kg的DATS,空白对照组和INH+RFP处理组给予等体积的玉米油;2 h后给予INH+RFP处理组及DATS低、中、高联合处理组INH(150 mg/kg)和RFP(100 mg/kg),空白对照组和DATS对照组给予等体积的生理盐水。连续灌胃11 d后处死,测定小鼠肝脏重量及肝/体比值、血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(T-BIL)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)的水平;肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1-β(Interleukin 1-β,IL-1-β)和肝脏组织病理检查。结果与空白对照组比较,INH+RFP处理组出现了明显的体重下降(P<0.01);肝/体比值升高(P<0.01);ALT、AST、T-BIL和ALT/GGT水平升高(PALT、T-BIL、GGT<0.01,PAST<0.05);肝脏病理切片显示,INH+RFP处理组肝内细胞排列不规则,出现大量的空泡及细胞坏死,肝细胞核变大深染,DATS组明显减少;肝组织匀浆中模型组TNF-α水平显著增高(P<0.01),IL-1-β水平降低(P<0.01);DATS低、中、高浓度联合处理组各指标出现明显好转,且DATS高剂量联合处理组保护效果最好,与正常对照组没有明显的差别。保护作用呈一定的剂量-反应关系。结论三硫二丙烯能抑制异烟肼和利福平所致的小鼠肝损伤,其机制与调节肝组织内免疫因子的分泌有关。

二烯丙三硫抑制人前列腺癌细胞生长

【目的】研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用及相关机制。【方法】MTT法测定DATS对PC-3细胞生长的影响;细胞形态学,流式细胞仪(FCM)等检测细胞凋亡;western blot、比色法分别检测凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和Bcl-xL/Bcl-xS的表达以及Caspase-3活性变化。【结果】DATS明显抑制PC-3细胞的生长,呈浓度和时间依赖性;DATS作用72h的IC50为14μmol/L;14μmol/LDATS作用PC-3细胞不同时间后,细胞凋亡率增高;western blot显示凋亡抑制蛋白Bc1-2、Bcl-xL表达减少,比色法表明Caspase-3活性增高。【结论】DATS诱导细胞凋亡是其抑制前列腺癌PC-3细胞生长的重要机制,该机制可能与Bc1-2、Bcl-xL和Caspase-3表达及活性变化有关。

多西紫杉醇联合二烯丙三硫协同诱导前列腺癌细胞凋亡的研究

【目的】探讨多西紫杉醇联合二烯丙三硫(DATS)对前列腺癌PC-3细胞的协同杀伤效应及其机制。【方法】PC-3细胞接种96孔板,分别给予多西紫杉醇(5～60 nmol/L)和DATS(5～60μmol/L)单药处理24、48、72 h;联合用药采用15μmol/L DATS联合不同浓度多西紫杉醇(5～60 nmol/L)处理48 h。MTT法检测多西紫杉醇和(或)DATS对PC-3细胞生长的影响。DAPI染色、流式细胞仪检测多西紫杉醇、DATS及二者联合对PC-3细胞凋亡和细胞周期的影响;Western-blot测定Bcl-2、Bax、Bcl-xL/xS及细胞色素C、caspase-9、caspase-3的表达及活性变化。【结果】多西紫杉醇、DATS均能抑制PC-3细胞的生长,DATS可明显提高多西紫杉醇的杀伤效应,DATS(15μmol/L)联合多西紫杉醇(10 nmol/L)作用48 h的细胞生存率为(50.1±1.0)%,低于多西紫杉醇(67.4±1.0)%和DATS(69.2±1.8)%,二者具有协同抑瘤作用;联合组使细胞凋亡率及G2/M期细胞比率明显增高,并更能显著抑制Bcl-2、Bcl-xL的表达,而且联合组使细胞色素C的释放及caspase-9、caspase-3的裂解活化时间提前了8 h。【结论】多西紫杉醇及DATS共同诱导细胞凋亡是二者发挥协同效应抑制前列腺癌细胞生长的重要机制,其可能与细胞周期阻滞、Bcl-2、Bcl-xL的表达降低、细胞色素C的释放及caspase-9、caspase-3的活性变化有关。

吡柔比星联合二烯丙三硫抑制膀胱癌细胞生长的协同作用研究

目的探讨吡柔比星(THP)联合二烯丙三硫(DATS)对膀胱癌细胞T24的协同杀伤效应及其机制。方法 MTT法、TUNEL法、流式细胞仪分别检测THP、DATS及二者联合对T24细胞生长、细胞周期及凋亡的影响;western-blot测定Bcl-2、Bax的表达变化;比色法测定caspase-3活性。结果 THP、DATS均能抑制T24细胞生长,DATS可明显提高THP的杀伤效应;THP(0.25mg/L)联合DATS(3mg/L)作用48h的细胞生存率为(32.3±2.6)%,低于单独应用THP(63.2±1.4)%和DATS(61.9±4.2)%,二者具有协同抑瘤作用;联合药物组可明显提高细胞凋亡率及G2/M期细胞比率,并更能显著抑制Bcl-2的表达,促进caspase-3的活性增加。结论 THP联合DATS可通过共同诱导肿瘤细胞凋亡发挥协同作用,抑制膀胱癌细胞生长,该机制可能与细胞周期阻滞、Bcl-2的表达及caspase-3的活性变化有关。

二烯丙三硫治疗食管癌的疗效观察

二烯丙三硫(Ait)是存在于多种蔬菜中的一种化合物。近年来国内外许多学者发现其具有抗癌作用,但目前都处于基础研究阶段,临床应用的研究未见报道。为此我们将其应用于中晚期食管癌患者得到较好疗效。1 材料与方法①二烯丙三硫:连云港东风制药厂生产,批号911004。②胃镜:olympus GIFXQ20。③病历选择:经病理或胃镜确诊的中晚期不愿或不宜手术食管癌31例、贲门癌6例,其中男34例,女3例,年龄50—75岁,分别在门诊或住院观察。④方法:按常规胃镜检查,通过胃镜活检孔插入注射针,将 Ait 以每点注射0.

大蒜和二烯丙三硫的抗MNNG诱变作用

以E coli WP2 trp^-.和E coli WP2 trp^- uvrA^-两菌株为靶细胞,以甲基硝基亚硝基胍(MNNG)力诱变因子,以靶细胞回复突变率下降为指标,观察生大蒜提取液和二烯丙三硫的抗诱变作用。实验结果显示,它们都能显著抑制MNNG的诱变作用而且其抑制环节存在细胞外。

二烯丙三硫的抗诱变作用

近年来许多研究表明大蒜具有防癌、抗癌作用。二烯丙三硫(diallyl trisulfide,DTS)是人工合成的大蒜油5种成分中的主要成分,性质稳定。本研究应用大肠杆菌色氨酸营养缺陷株探讨了二烯丙三硫对诱变物和(或)致癌物MNNG、4-NQO诱变性的拮抗作用。材料和方法一、材料 1.菌株和培养基大肠杆菌色氨酸营养缺陷株E.coli WP2 trp^-和E.coliWP2 trp^- uvrA^-系Bridges教授1987年赠。

二烯丙三硫对二甲基肼引起小鼠致突作用影响

为探讨大肠癌的发生机理和防治机制，选用二甲基肼作为昆明种小鼠大肠致突（癌）物，将二烯丙三硫作为阻断剂，应用大肠隐窝上皮细胞核异常检测法和嗜银核仁形成区检测法技术，观察二烯丙三硫对二甲基肼引起大肠癌早期突变作用的影响。实验证明：用二烯丙三流处理组小鼠与单纯用二甲基肼处理组小鼠的隐窝上皮细胞核异常和核仁形成区变化相比较均有显著性差异（P＜0．01），其核仁形成区的形态上也有显著不同。表明二烯丙三硫在二甲基肼引起小鼠大肠癌变的早期致突作用时起到抑制作用，同时提示大肠隐窝上皮细胞核异常的检测可用于检测致突（癌）物和抑制物，而核仁形成区的观察亦可反映化学物质对染色体的损伤或修复所起的作用。

SOX4基因在前列腺癌中的表达及二烯丙三硫对其表达的调节作用

目的研究SOX4基因在前列腺癌患者中的表达;探讨二烯丙三硫(DATS)对SOX4表达阳性前列腺癌细胞的生物学作用及对SOX4表达的调节作用。方法采用免疫组织化学PV-9000二步法检测141例前列腺癌患者SOX4的表达,观察其与临床病理指标和预后的关联。采用不同浓度(0、20、40、60μmol/L)DATS处理前列腺癌Vcap细胞株,细胞增殖活性MTS法测定Vcap细胞的增殖能力;细胞体外侵袭实验检测40μmol/L DATS对Vcap细胞侵袭能力的作用;实时定量PCR(Real-time PCR)检测40μmol/L DATS作用后,Vcap细胞中SOX4mRNA的表达水平变化。结果 SOX4蛋白在21%(28/135)的前列腺癌患者中过表达,与Gleason评分、远处转移呈正相关(P<0.05)。SOX4是影响患者生存的独立预后因素。体外实验显示,20～60μmol/L DATS对前列腺癌细胞株Vcap的生长有较明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。40μmol/L DATS明显抑制Vcap细胞的侵袭能力,并在mRNA水平上下调SOX4的表达。结论 SOX4的过表达提示前列腺癌患者预后不良。DATS抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖和侵袭能力,并在mRNA水平上显著下调SOX4的表达。

二烯丙三硫对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及与uPA系统关系的初探

目的:研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)系统的调节作用。方法:细胞增殖活性(MTS)比色法测定20、40、60μmol·L-1DATS处理前列腺癌PC-3细胞24、48、72h后PC-3细胞的增殖能力;细胞体外侵袭试验检测20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞侵袭能力的作用;划痕试验观察40μmol·L-1DATS处理PC-3细胞24h后PC-3细胞迁移能力;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法分别检测40μmol·L-1DATS作用PC-3细胞后的uPA、uPAR和PAI-1的mRNA及其蛋白表达水平。结果:20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞的生长均有较明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;DATS呈浓度依赖抑制细胞的浸润能力,其中40μmol·L-1与体内试验更接近;40μmol·L-1DATS明显抑制细胞的迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达无显著影响。结论:DATS抑制PC-3细胞的增殖、浸润和迁移,该效应可能与DATS显著上调PAI-1的表达有关系。

二烯丙三硫对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭的抑制及对uPA系统的调节

目的研究二烯丙三硫(DATS)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)系统的调节作用。方法实时定量PCR法(real-time PCR)检测乳腺癌细胞株uPA系统中uPA、uPA受体(uPAR)和uPA抑制物(PAI-1)的表达;使用不同浓度DATS处理乳腺癌细胞,MTS比色法测定细胞的增殖能力;Matrigel体外浸润实验检测DATS(20～60μmol/L)对细胞浸润能力的影响;Transwell小室迁移实验和划痕试验评价60μmol/L DATS对细胞迁移能力的影响;RT-PCR和Western blot分别测定60μmol/L DATS作用后,乳腺癌细胞中uPA、uPAR和PAI-1 mRNA和蛋白表达的变化;ELISA法检测细胞培养液中PAI-1蛋白含量的变化。结果 20～80μmol/L DATS对高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的生长有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。60μmol/L DATS明显抑制MDA-MB-231细胞的浸润和迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达水平无显著影响。结论 DATS抑制MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达。

二烯丙三硫提高胸苷激酶基因系统对前列腺癌细胞杀伤效应的研究

目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶／更昔洛韦（HSV—TK／GCV）自杀基因系统联合二烯丙三硫（DATS）对前列腺癌（PCa）细胞PC-3的协同杀伤效应及其机制。方法脂质体将TK基因转染PC．3构建PC-3／TK细胞，噻唑蓝（M．rr）法、细胞形态学、流式细胞仪分别检测GCV、DATS及两者联合对PC-3／TK生长及凋亡的影响；Westernblot测定B淋巴细胞／白血病-2（bd-2）、bax、bcl-xL／xS、细胞色素C、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-9表达变化；比色法测定Caspase-3活性。结果GCV、DATS均能抑制PC-3／TK生长，DATS可明显提高GCV的杀伤效应；DATS（15μmol／L）联合GCV（5μmoL／L）作用48h的细胞生存率为（35．0±2．8）％，低于单独应用GCV（68．0±1．8）％和DATS（63．9±5．9）％，两者具有协同抑瘤作用；联合组细胞凋亡率明显增高，并更能显著抑制bcl-2、bcl-xL的表达，促进细胞色素c释放、Caspase-9裂解及Caspase-3的活性增加。结论HSV-TK／GCV系统联合DATS可通过共同诱导肿瘤细胞凋亡发挥协同作用，抑制PCa细胞生长，该机制可能与相关凋亡蛋白的表达及活性变化有关。

二烯丙三硫对致突变性药物诱导大鼠肝细胞DNA程序外合成（UDS）的…

多数抗肿瘤药物具有致突／致癌性，而大蒜的有效成分之一的二烯丙三硫（大蒜素，ＤＡＴ）可能例外，它不仅能抑制多种实体瘤生长，还能阻断基因毒性剂的致突／致癌作用，是一种抗突变性抗癌物质。利用放射自显影技术，作者研究了ＤＡＴ对致突性抗癌药丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、环磷酰胺（ＣＰ）和顺铂（ＤＤＰ）诱导Ｗｉｓｔａｒ大鼠原代培养肝细胞ＵＤＳ的影响。结果表明：ＭＭＣ（１～１０μｍｏｌ／Ｌ）、ＣＰ（０．３１６～３．

用大肠杆菌CM89菌株对三种化学物抗突变作用的研究

本文以 E.coli CM891为靶细胞,用细菌内抗突变作用模式研究了肉桂醛,鞣酸,二烯丙三硫的抗4NQO 突变性及其作用机制。含质粒 pKM101的 CM891的高抗株(抗50μg/ml 氨苄青霉素)能提高该菌株的自发突变率和4NQO 诱发的突变率以及对鞣酸的杀伤抗性。肉桂醛的抗突变性不依赖质粒 pKM101效应,但与暂时性生长延搁有关。鞣酸及二烯丙三硫的抗突变机制可能包括质粒 pKM101介导的易误修复。上述三种化学物中每二种联合应用均显示抗4NQO 突变性的协同效应及对靶细胞的毒性杀伤作用。

大蒜素微囊制剂的研究与试制

本文报道了以明胶-阿拉伯胶为包材的复凝聚法制备了大蒜素微囊。采用了双囊及物料填充的新工艺解决了由于囊膜网状结构而引起的通透性、掩盖臭味不全的问题。制定了大蒜素胶囊剂的质量检查方法,为控制制剂质量拟定了标准。

大肠杆菌SOS反应诱导动力学和诱导抑制作用的研究

在E.Coli K12带有融合基因Sfi:Lacz的PQ37菌株上,用改良的SOS显色试验程序,研究了化学诱变剂(4NQO和MMC)诱导的SOS反应诱导动力学和化学物质(肉桂醛和二烯丙三硫)对SOS反应的抑制作用。发现用脉冲式诱导的程序,可使4NQO诱导Sfi基因的SOS反应在15分钟内出现,30～60分钟时其峰值比持续诱导高一倍,但 MMC诱导的并不完全相同,表明SOS反应诱导动力学的类型随诱变剂不同而有所不同,改良的脉冲式诱导程序能更如实地揭示诱导效应。与此同时,本研究还证明了肉桂醛和二烯丙三硫对4NQO脉冲诱导的SOS反应的抑制效应(P<0.01),其作用环节可能是在菌体内破坏4NQO或干扰它的代谢活化。