1－烯丙基－3－甲基三硫化物的化学合成

１－烯丙基－３－甲基三硫化物为百合科植物葱、蒜、薤白挥发油中的生物活性成分之一，具有较强的抑制血小聚集作用等。采用碘甲烷、氯丙烯为主要原料，以化学方法合成了这一化合物。所得化合物，经结构鉴定，得到确认。其方法简单，原料易得，反应步骤少，实用性强。

二烯丙基三硫化物对大鼠离体肾内动脉血管张力的影响

目的观察二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)对离体肾内动脉张力的影响及其机制。方法 SD大鼠体质量250～300 g,脱臼处死后,显微操作下取出肾内动脉,制备成1.8～2.0 mm长的血管条,每根血管条固定于微血管测定仪的浴槽内,记录张力变化。分别给予血管收缩剂苯肾上腺素(Phe)、血栓素A2受体激动剂(U46619)、5-羟色胺(5-HT)和KCl刺激血管产生持续性收缩,采用累积给药法加入DATS,观察不同浓度的DATS对肾内动脉张力的影响。观察DATS舒张效应的同时用等体积的药物溶剂二甲基亚砜(DMSO)作为对照。结果 DATS能呈浓度依赖性诱导舒张1μmol.L-1 Phe、0.1μmol.L-1 U46619和2μmol.L-1 5-HT预收缩内皮完整的肾内动脉环,pD2分别为(6.06±0.17),(6.14±0.26)和(5.37±0.16),其最大舒张率(Emax)分别为(91.24±2.71)%,(93.44±2.14)%和(92.51±1.15)%;但是,对60 mmol.L-1 KCl预收缩的肾内动脉环无明显舒张作用;分别用eNOS抑制剂L-NAME和sGC抑制剂ODQ预处理内皮完整的肾内动脉环不影响DATS舒张效应;去除肾内动脉血管内皮也不影响DATS对其舒张作用。结论 DATS有浓度依赖性舒张大鼠肾内动脉作用,无明显内皮依赖性。

二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后血管壁内iNOS蛋白表达及NO水平的影响

目的:研究二烯丙基三硫化物涂层支架对犬冠状动脉损伤后血管壁内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达及NO水平的影响.方法:进行冠状动脉左回旋支支架置入术的犬,将二烯丙基三硫化物涂层支架和对照支架分别置入左回旋支的远端和近端.术后1,3,10和28d分别处死动物,蛋白质印迹杂交法测定血管壁中iNOS蛋白的表达、硝酸还原酶法检测NO水平.结果:对照支架组术后1d血管壁中有少量iNOS蛋白表达,3d表达增加,10d达高峰,28d时仍有表达,二烯丙基三硫化物涂层支架组iNOS蛋白在各时间点的表达量均高于对照支架组;对照支架组术后1d时NO生成量低于正常组织,3d时NO水平升高,10d时最高,28d时降至基线水平,二烯丙基三硫化物涂层支架组各时间点的NO水平明显高于对照支架组.结论:二烯丙基三硫化物涂层支架可显著增加iNOS表达,并提升NO产量,提示二烯丙基三硫化物涂层支架可能是抑制内膜增生的一个重要机制.

二烯丙基三硫化物键合硅胶的制备、表征及抗菌作用

采用固液相表面连续反应法,制备含硫的偶联剂γ-巯基丙基键合硅胶(MPS),通过引发剂,使偶联剂键合硅胶表面的巯基与二烯丙基三硫化物发生巯烯加成反应制备二烯丙基三硫化物键合硅胶(DTS)。采用元素分析、红外光谱、热重分析和质谱分析测试技术进行结构表征,MPS和DTS的键合量分别为1.73和0.27 mmol/g。通过抑菌环试验考察了DTS对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、产气杆菌和变形杆菌的抑菌活性,抑菌环分别为9.0、8.1、10.1、9.2和8.9 mm。实验同时采用搅拌涂布平板法考察了牛肉膏蛋白胨基中DTS含量对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌效果的影响。结果表明,DTS对5种细菌均有良好的抑制活性。消除了蒜素固有的浓烈的大蒜气味,同时保存了二烯丙基三硫化物的抗菌活性。初步探讨了该DTS的抗菌机理。

二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x_1表达的影响

目的观察二烯丙基三硫化物涂层支架对犬冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x1表达的影响。方法犬进行冠状动脉左回旋支支架植入术,将二烯丙基三硫化物涂层支架和对照支架分别植入左回旋支的远端和近端,术后28d处死,进行细胞凋亡检测、Bcl-x1免疫组化和蛋白质印迹杂交。结果术后28d,二烯丙基三硫化物涂层支架组细胞凋亡率为(9.18±3.41)%高于对照支架组的(3.28±1.74)%,P<0.01。对照支架组血管壁内Bcl-x1蛋白表达为,12.17±5.02,显著高于二烯丙基三硫化物涂层支架组的5.46±2.50,P<0.05。蛋白质印迹杂交也显示对照支架组有高水平Bcl-x1蛋白表达(37.52±6.15),明显高于二烯丙基三硫化物涂层支架组(10.48±2.75),P<0.01。结论二烯丙基三硫化物可逆转血管损伤后内膜中Bcl-x1的高表达,促进细胞凋亡,可能是二烯丙基三硫化物涂层支架抑制内膜增生的机制之一。

大蒜提取物二烯丙基三硫化物对人膀胱癌T24细胞增殖的影响

目的研究大蒜提取物二烯丙基三硫化物(DATS)于体外对人膀胱癌细胞系T24细胞增殖和细胞周期的影响及其可能机制。方法采用MTT法观察不同浓度的DATS作用不同时间后对T24细胞增殖的影响。同时应用集落形成试验观察不同浓度的DATS对T24细胞集落形成的影响。采用流式细胞仪对经不同浓度DATS作用24h后T24细胞进行细胞周期分析。应用Western blotting方法检测细胞周期相关蛋白Cdc25C的表达,以观察DATS对其的影响。结果DATS对T24细胞的增殖有明显的抑制作用,MTT法显示随药物浓度升高和作用时间延长其抑制作用逐渐增强。DATS抑制T24细胞集落形成,随着浓度增高集落形成率逐步下降。经流式细胞仪检测,不同浓度DATS作用后,G2/M期细胞逐渐增多,表明DATS可引起G2/M期停滞。不同浓度DATS作用后,Cdc25C蛋白表达随药物浓度增加。结论DATS能显著抑制T24细胞增殖和集落形成,其抑制呈时间和剂量依赖性。DATS能显著抑制T24细胞中Cdc25C蛋白的表达,这可能是诱导T24细胞G2/M期停滞的分子机制之一。

二烯丙基三硫化物包被支架术后冠状动脉管壁基质金属蛋白酶2及其抑制物表达的变化

目的探讨二烯丙基三硫化物包被支架对犬冠状动脉基质金属蛋白酶2及基质金属蛋白酶组织抑制物2表达的影响。方法利用犬冠状动脉置入过大支架致内膜损伤,建立血管狭窄的动物模型。28个支架平分为基础对照组(单纯蛋白包被支架)和二烯丙基三硫化物治疗组(二烯丙基三硫化物包被支架),分别置入14只杂种犬的冠状动脉前降支或回旋支,未置入支架的另一支冠状动脉作为正常对照组(n=14)。在不同时点(5 h,1、7、14天和28天)处死动物,术后4周的血管标本做病理切片,部分组织抽提总RNA,应用RT-PCR方法测定不同时点冠状动脉壁内基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达。结果与基础对照组相比,4周后二烯丙基三硫化物包被支架组显著抑制新生内膜的形成(P<0.01),面积狭窄率显著降低(P<0.01);与基础对照组相比,在5 h、1、14天和28天二烯丙基三硫化物包被支架显著抑制冠状动脉壁内基质金属蛋白酶2 mRNA的表达(P<0.05)。在5 h、1天和14天3个时点,二烯丙基三硫化物组与基础对照组基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达差异无显著性;在7天和28天,二烯丙基三硫化物组基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达明显高于对照组(P<0.05)。结论二烯丙基三硫化物包被支架明显抑制基质金属蛋白酶2基因的表达和增加基质金属蛋白酶组织抑制物2基因的表达,这可能是二烯丙基三硫化物抑制内膜增生的机制之一。

锕系元素的三硫化物■的几何结构和键合作用的理论研究

采用密度泛函理论的B3LYP/cc-pVTZ水平对锕系元素的三硫化物AnS3(An=Pa,U,Np,Pu)进行理论模拟和计算。结果表明基态的PaS3和US3都具有一个对称面Cs点群的近平面结构,而基态的NpS3和PuS3则是具有两个对称面C2v点群的平面型分子,且PuS3几乎成T型结构。根据分子轨道分析,在这四个分子中的NpS3最易被激发,US3最难被激发。并且在这些分子中存在着共轭结构,根据π轨道的电子定域化分析(ELF-π)表明在AnS3分子中的共轭程度大小趋势:US3>PaS3>NpS3>PuS3。

大蒜活性成分二烯丙基三硫化物调控Wnt通路抑制香烟烟雾增强的胃癌干细胞干性

目的:探讨大蒜活性成分二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)能否干预香烟烟雾促进的SGC-7901源胃癌干细胞干性,并探究Wnt通路在其中的作用。方法:用不同浓度(0%、0.25%和0.50%)的香烟烟雾悬液和DATS单独或联合处理SGC-7901源胃癌干细胞7 d,显微镜下观察胃癌干细胞球大小及数量的变化,实时定量PCR及蛋白质印迹检测干性基因NANOG、OCT-4、SOX2、LIN28的mRNA和蛋白表达;香烟烟雾悬液、DATS和氯化锂单独或联合处理胃癌干细胞,蛋白质印迹检测干性基因及Wnt通路相关蛋白表达的变化。结果:DATS能明显抑制香烟烟雾促进的胃癌干细胞球的形成及干性基因NANOG、OCT-4、SOX2、LIN28的mRNA和蛋白表达;蛋白质印迹结果显示,DATS能抑制香烟烟雾诱导的β-连环蛋白、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)表达异常;氯化锂能增强NANOG和OCT-4的表达,与对照组相比,DATS和氯化锂联合处理组GSK3β蛋白表达水平下调,而β-连环蛋白表达水平上调,同时NANOG和OCT-4的蛋白表达水平上调。结论:DATS能抑制香烟烟雾促进的SGC-7901源胃癌干细胞干性,Wnt通路在其中发挥重要作用。

二烯丙基三硫化物诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

目前临床上广泛应用的一般化疗药物在杀死肿瘤细胞的同时会无选择地损伤正常组织和细胞，对患者的身体造成严重的不可逆性的损伤．影响患者的生存质量。流行病学调查显示，长期食用大蒜可降低多种恶性肿瘤的发病率。其抗癌作用主要归功于它所含的有机硫化物，主要包括二烯丙基硫化物（diallylsulfide，DAS）、二烯丙基二硫fdiallyldisulfide，DADS）、

二烯丙基三硫化物抗肿瘤作用机制的研究进展

二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)是大蒜素的主要分解产物和活性成分之一。研究发现DATS具有抗肿瘤、抑菌、抗氧化应激及参与炎症反应调节等多种生物学效应。DATS能够通过多种途径抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制包括细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡、调节氧化应激及参与肿瘤免疫等。本文就近年来国内外研究DATS抗肿瘤效应的文献进行回顾和综述。

生长抑素三硫化物的制备与质谱分析

采用生长抑素与硫代硫酸钠(Na_(2)S_(2)O_(3))反应生成生长抑素三硫化物,并使用高压制备液相色谱法将其纯化后冻干,利用高分辨质谱对其精确分子量、肽序列与三硫键连接位点进行检测。结果表明,当生长抑素与Na2S2O3摩尔比为1∶2时,60℃水浴下反应1 h,即可生成生长抑素三硫化物,对其纯化、脱盐、冻干后,最终获得纯度大于95%的目标物。通过质谱分析,其加合离子[M+2H]^(2+)的m/z为835.3539、[M+3H]^(3+)的m/z为557.2369,肽序列为A-G-C-K-N-F-F-W-K-T-F-T-S-C,三硫键连接位点为Cys(3)-Cys(14),均与理论结构一致。该研究可为生长抑素的质量研究提供依据。

啤酒老化期间二甲基三硫化物对还原力的影响

在啤酒中由于存在抗氧和强氧化物的影响,3-甲硫基丙醛降解,在陈化的啤酒中主要的前驱物质是二甲基三硫化物(DMTS),奇怪的是,在啤酒老化期间并没有确认二甲基三硫化物对啤酒的原还力,可是,另一些抗氧和强氧化物必须考虑.例如:3-甲硫基丙醛(S的加合物)或甲烷硫醇(铜络合物)的键合能力.这种键合能力的差异导致二甲基三硫化物含量有时较高、有时较低.

二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后内皮结构和功能的影响

目的观察二烯丙基三硫化物涂层支架置入犬冠状动脉后内皮修复、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白质表达和一氧化氮水平的变化,探讨该药物支架对血管内皮结构和功能的影响。方法将8只犬进行冠状动脉左回旋支支架置入术,将二烯丙基三硫化物涂层支架(药物组)和对照支架(对照组)分别置入左回旋支的远端和近端。术后28d处死动物,采用光镜观察内膜增生情况,扫描电镜观察内皮修复情况,用免疫组织化学和Western印迹法测定eNOS蛋白质表达,硝酸还原酶法检测一氧化氮水平。结果术后28d,药物组血管内膜增生(内膜厚度0·12mm±0·05mm,内膜面积1·17mm2±0·25mm2)明显轻于对照组(内膜厚度0·35mm±0·11mm,内膜面积1·81mm2±0·36mm2,P<0·01,P<0·05);血管内膜表面的内皮细胞较对照组分布更紧密,排列更整齐,覆盖更完整;药物组eNOS蛋白质表达量(免疫组化法11·1±1·9,Western印迹法37·5±6·2)明显高于对照组(5·6±0·6,10·4±2·7,均P<0·01);药物组一氧化氮水平(279μmol/L±72μmol/L)明显高于对照组(160μmol/L±57μmol/L,P=0·01)。结论二烯丙基三硫化物涂层支架可加速内皮化、促进eNOS表达和提高一氧化氮水平,表明该药物支架在促进内皮结构修复的同时,实现了内皮功能的恢复和完善。

二烯丙基三硫化物对肝移植术后大鼠肝癌生长的抑制作用

目的探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对肝移植术后大鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响及其机制。方法建立大鼠肝移植术后肝癌皮下移植瘤模型24只，随机分为对照组、DATSⅠ组（每日1mg／kg）、DATSⅡ组（每日5mg／kg）。用药2周后观察肿瘤体积和重量，生化法测定大鼠血清肝肾功能，荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测肿瘤的血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-2mRNA的表达，肿瘤组织切片行透射电镜检查。结果与对照组比较，DATS能抑制肿瘤生长，对照组、DATSⅠ组和DATSⅡ组皮下移植瘤体积分别为（0．78±0．25）、（0．42±0．17）、（0．38±0．21）cm。（P〈0．01）；DATS抑制肝癌细胞VEGFmRNA、MMP-2mRNA的转录（P〈0．01），DATS对肝移植术后大鼠肝、肾功能无明显毒性作用（P〉0．05）；透射电镜下可见DATS组肿瘤组织内有较多细胞凋亡现象。结论DATS可以抑制肝癌细胞VEGFmRNA和MMP-2mRNA的转录，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肝移植术后皮下移植瘤的生长。

二丙烯三硫化物对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的观察二丙烯三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puneture,CLP)诱导大鼠急性肺损伤的保护作用。方法采用CLP法制作急性肺损伤动物模型。30只雄性SD大鼠术前禁食16h,腹腔注射10%水合氯醛4ml/kg麻醉后,采用随机数字表法将动物分成3组(每组10只):sham手术组(Ⅰ组)、CLP+生理盐水(normal saline,NS)组(Ⅱ组)和CLP+DATS组(Ⅲ组)。Ⅰ组和Ⅱ组经尾静脉注射NS 10ml/kg,而Ⅲ组尾静脉注射DATS 10mg/kg。模型制作完毕后0h(T0)、6h(T6)和12h(T12)经大鼠左颈总动脉抽动脉血测动脉血气。术后所有30只雄性SD大鼠皮下注射生理盐水0.05ml/g。手术后12h处死SD大鼠留取肺组织标本,测定肺组织湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,测定肺组织胞质NF-κB P65、NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB,IκB-α)和胞核NF-κB P65的水平,光镜下观察大鼠肺组织的病理变化。另取30只雄性SD大鼠,分组和实验方法同前,观察3组大鼠24h生存率。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组T6和T12时PaO2及SOD活性降低(P<0.05),PaCO2、肺组织W/D、MPO活性、MDA和NO含量升高(P<0.05)。与Ⅰ组比较,Ⅱ组光镜下炎症反应明显加重,胞质NF-κB P65和IκB-α减少(P<0.05),胞核NF-κB P65增加(P<0.05),24h生存率降低(P<0.05)。与Ⅱ组比较,Ⅲ组T6和T12时PaO2、SOD活性增加(P<0.05),PaCO2、肺组织W/D、MPO活性、MDA和NO含量降低(P<0.05),光镜下肺组织的炎症反应明显减轻,胞质NF-κB P65和IκB-α增加(P<0.05),胞核NF-κB P65减少(P<0.05),24h生存率提高(P<0.05)。结论DATS对CLP诱导的SD大鼠急性肺损伤有保护作用。

2A12-T6铝合金表面双-(γ-三乙氧基硅丙基)四硫化物薄膜的特性

采用傅立叶变换红外光谱分析了2A12-T6铝合金表面自组装双-(!-三乙氧基硅丙基)四硫化物硅烷偶联剂(SCA)薄膜结构特征,并采用电化学极化曲线评价了薄膜的耐蚀性能.结果表明,铝材表面自然晾干,SCA薄膜分子之间主要通过氢键连接,腐蚀电流密度减小1个数量级以上.120℃的加热处理促进铝板表面通过SiOSi链接而形成SCA网状薄膜结构,并通过在界面上形成SiOAl界面相结构而与铝板表面牢固连接,腐蚀电流密度降低2个数量级以上.SCA乙醇溶液浸泡处理10min比浸泡2s～1min的铝板表面SCA薄膜内氢键缔合羟基要多.

二烯丙基三硫化物对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用

目的探讨二烯丙基三硫化物(DATS)对TNF-α诱导的人RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖以及炎症因子、MMPs和血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响。方法体外培养RA-FLS,采用不同浓度DATS处理细胞,通过CCK-8法测定细胞增殖的活性,加用TNF-α刺激后,通过实时荧光定量(q)-PCR、ELISA检测IL-1β、MMP-1、VEGF的mRNA和蛋白的表达水平,采用单因素方差分析比较多组定量资料,采用LSD-t法比较组间均数。结果分离出的RA-FLS中CD90、CD29表达的阳性率>90%。经100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L DATS处理,细胞增殖活力分别为[(98.92±0.40)%、(95.91±0.32)%、(94.05±0.24)%],与正常对照组比较增殖活性均下降,加入200 μmol/L、300 μmol/L DATS的实验组差异有统计学意义(t=4.46,P<0.05;t=7.98,P<0.05)。加用TNF-α刺激后,与实验对照组相比,加入100 μmol/L DATS实验A组中的IL-6 mRNA相对表达量升高[(1.14±0.04)倍,t=5.74,P<0.05],但蛋白变化差异无统计学意义,MMP-1、VEGF蛋白及mRNA变化差异无统计学意义。加入200 μmol/L DATS实验B组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平分别为[(108.0±4.7)ng/L,t=-63.79,P<0.05;(26.0±1.0)ng/L,t=-9.68,P<0.05;(57.9±0.7),t=-34.59,P<0.05]、mRNA较实验对照组的相对表达量分别为[(0.42±0.06)倍,t=-23.47,P<0.05;(0.14±0.03)倍,t=-36.59,P<0.05;(0.36±0.09)倍,t=-13.1,P<0.05];加入300 μmol/L DATS实验C组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平[(24.2±2.3)ng/L,t=-88.69,P<0.05;(22.7±1.0)ng/L,t=-14.13,P<0.05;(34.5±1.7),t=-48.45,P<0.05],mRNA较实验组对照组的相对表达量为[(0.041±0.027)倍,t=-38.48,P<0.05;(0.027±0.027)倍,t=-41.22,P<0.05;(0.131±0.047)倍,t=-17.74,P<0.05],均较实验对照组明显降低,且2组蛋白水平间比较差异有统计学意义(t=-24.89,P<0.05;t=-4.45,P<0.05;t=-13.87,P<0.05)。结论DATS浓度≥200 μmol/L时能够抑制RA-FLSs的增殖,并抑制其分泌IL-6、MMP-1、VEGF,而且呈剂量依赖关系。

二烯丙基三硫化物对人神经母细胞瘤细胞SK—N—SH生长的抑制作用

目的探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对人神经母细胞瘤细胞SK．N．SH生长的影响及相关机制。方法光镜下观察不同浓度DATS对SK—N—SH细胞生长的影响；细胞分为对照组、DATSI组（10p晷／L）和DATSⅡ组（40肛∥L），DATS作用24、48h后，流式细胞仪测定细胞凋亡；作用72h后，荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）法测定DATS对SK—N—SH细胞血管内皮生长因子（VEGF）mRNA、细胞间黏附分子一1（ICAM．1）mRNA表达的影响；酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定细胞培养上清液VEGF、ICAM．1浓度。结果不同浓度的DATS均能抑制SK—N—SH细胞的生长，小剂量DATS能诱导细胞凋亡；对照组、DATSI组和Ⅱ组VEGFmRNA、ICAM一1mRNA表达量分别为5．974-1．31、4．21±1．06、3．35±0．77（P〈0．05）和4．41±O．94、3．22±1．17、2．69±O．73（P〈0．05）；对照组、DATSI组和Ⅱ组SK—N．SH细胞培养上清液中VEGF、ICAM一1分别为（72．14-26．9）、（51．6±17．3）、（40．3±11．8）μg／L（P〈0．05）和（311．6±83．7）、（274．2±71．0）、200．6±42．9）ng／L（P〈0．05）。结论DATS在体外可抑制神经母细胞瘤细胞SK-N—SH的生长，DATS能诱导SK—N-SH细胞凋亡，下调其VEGFmRNA、ICAM一1mRNA的转录和蛋白表达。