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过表达多巴胺脱羧酶、酪氨酸羟化酶和三磷酸鸟苷环化水解酶1重组慢病毒构建及其在帕金森病大鼠模型治疗作用的研究
被引量:
1
1
作者
赵慧慧
史明超
金庆文
《中国临床神经科学》
2018年第2期133-144,共12页
目的构建同时表达3种多巴胺(DA)合成相关酶的重组慢病毒(rLV),验证其在6-羟基多巴胺(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型中治疗作用,为PD临床基因治疗提供实验基础。方法构建过表达多巴胺脱羧酶(DDC)、酪氨酸羟化酶(TH)和三磷酸鸟苷环化水解酶...
目的构建同时表达3种多巴胺(DA)合成相关酶的重组慢病毒(rLV),验证其在6-羟基多巴胺(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型中治疗作用,为PD临床基因治疗提供实验基础。方法构建过表达多巴胺脱羧酶(DDC)、酪氨酸羟化酶(TH)和三磷酸鸟苷环化水解酶1(GCH1)rLV及对照rLV。6-OHDA制备的PD模型大鼠,随机分为生理盐水组(n=6)、阴性病毒组(n=6)和阳性病毒组(n=12),分别经立体定向向大鼠纹状体注射生理盐水、对照rLV和DDC+TH+GCH1-rLV。观察构建病毒对PD大鼠旋转行为的影响,免疫荧光法检测病毒转染情况,同时使用高效液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS/MS)检测纹状体内DA及其代谢产物改变情况。结果 PD大鼠纹状体注射后,阳性病毒组行为改变与生理盐水组、阴性病毒组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01);阳性病毒组呈现显著的旋转行为改善。免疫荧光显示阳性病毒转染表达有TH活性的阳性细胞。阳性病毒组纹状体内DA及其代谢产物与生理盐水组、阴性病毒组比较,显著增高(P<0.01)。结论成功构建过表达DDC+TH+GCH1-rLV,并且在PD模型大鼠中呈现显著的行为改善及DA水平增加,为PD的基因治疗提供实验基础。
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关键词
帕金森病
多巴胺脱羧酶
酪氨酸羟化酶
三
磷酸
鸟
苷
环化
水解酶
1
重组慢病毒
基因治疗
高效液相色谱
-
串联质谱联用法
原文传递
GLP-1类似物的葡萄糖浓度依赖性降糖机制研究
2
作者
陈寒蓓
林宁
苏青
《中国现代医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第15期15-18,共4页
目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物(Exendin-4)对MIN6细胞的葡萄糖浓度依赖性降糖作用机制。方法检测GLP-1类似物(Exendin-4)在不同葡萄糖浓度下对体外培养的MIN6细胞的ATP水平、cAMP含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量的变化。...
目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物(Exendin-4)对MIN6细胞的葡萄糖浓度依赖性降糖作用机制。方法检测GLP-1类似物(Exendin-4)在不同葡萄糖浓度下对体外培养的MIN6细胞的ATP水平、cAMP含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量的变化。结果在2.8 mmol/L葡萄糖培养条件下,Ex-endin-4使细胞三磷酸腺苷(ATP)水平无明显变化,环磷酸腺苷(cAMP)含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量无明显增加(P>0.05);在25 mmol/L葡萄糖培养条件下,Exendin-4使细胞ATP水平明显降低,cAMP含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量明显增加(P<0.05)。结论 GLP-1类似物(Exendin-4)具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素分泌作用,细胞内cAMP含量增加是其引起胰岛素释放的关键环节。
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关键词
胰高糖素样肽
-
1
类似物
三
磷酸
腺
苷
环
磷酸
腺
苷
腺
苷
酸
环化
酶
胰岛素
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职称材料
Segawa病基础研究最新进展
3
作者
张社卿
乔德丽
+1 位作者
郑惠民
丁素菊
《罕少疾病杂志》
2004年第2期25-28,共4页
Segawa病的发病与黑质多巴胺神经元轴突末端酪氨酸羟化酶活性下降有关,在儿童的生长发育阶段,多巴胺活性随年龄而逐渐下降,本病的发病年龄多在多巴胺活性急剧下降的阶段(10左右),症状进行性加重,至30岁以后趋于稳定。最可靠和最有诊断...
Segawa病的发病与黑质多巴胺神经元轴突末端酪氨酸羟化酶活性下降有关,在儿童的生长发育阶段,多巴胺活性随年龄而逐渐下降,本病的发病年龄多在多巴胺活性急剧下降的阶段(10左右),症状进行性加重,至30岁以后趋于稳定。最可靠和最有诊断意义的实验室检查是测定脑脊液中生物喋呤和新喋呤的含量,以及外周血单核细胞内三磷酸鸟苷环化水解酶(GTPcyclohydrolase,GCH-1)活性。本病患者黑质神经细胞数量正常。迄今在GCH-1基因的6个外显子已经发现各种形式的突变。
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关键词
Segawa病
发病机制
三磷酸乌苷环化水解酶-1
酪氡酸羟化酶
四氢生物喋呤
常染色体显性遗传
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职称材料
CD39在转化医学中的作用
4
作者
张波
张杰
+2 位作者
谭涛
张灏
朱骅
《转化医学杂志》
2014年第3期180-183,192,共5页
CD39/膜外三磷酸腺苷二磷酸水解酶-1是一个细胞膜整合的跨膜结构,细胞外有核苷脱磷酸化作用的结合区域的糖蛋白酶,其表达于细胞膜外表面,能使细胞外三磷酸腺苷、二磷酸腺苷水解为磷酸腺苷。目前,研究发现CD39在多器官缺血再灌注损失、...
CD39/膜外三磷酸腺苷二磷酸水解酶-1是一个细胞膜整合的跨膜结构,细胞外有核苷脱磷酸化作用的结合区域的糖蛋白酶,其表达于细胞膜外表面,能使细胞外三磷酸腺苷、二磷酸腺苷水解为磷酸腺苷。目前,研究发现CD39在多器官缺血再灌注损失、血栓形成、器官移植排除反应、肿瘤发生等疾病中起着重要作用,并且在以上疾病中的表现存在交叉作用和共同作用。
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关键词
膜外
三
磷酸
腺
苷
二
磷酸
水解酶
-
1
三
磷酸
腺
苷
腺
苷
缺血再灌注
血栓
移植排斥
抗肿瘤
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职称材料
题名
过表达多巴胺脱羧酶、酪氨酸羟化酶和三磷酸鸟苷环化水解酶1重组慢病毒构建及其在帕金森病大鼠模型治疗作用的研究
被引量:
1
1
作者
赵慧慧
史明超
金庆文
机构
南京医科大学第一附属医院神经内科
南京医科大学附属逸夫医院神经内科
出处
《中国临床神经科学》
2018年第2期133-144,共12页
基金
江苏省自然科学基金面上项目(编号:BK20141439)
国家自然科学基金面上项目(编号:81671117)
文摘
目的构建同时表达3种多巴胺(DA)合成相关酶的重组慢病毒(rLV),验证其在6-羟基多巴胺(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型中治疗作用,为PD临床基因治疗提供实验基础。方法构建过表达多巴胺脱羧酶(DDC)、酪氨酸羟化酶(TH)和三磷酸鸟苷环化水解酶1(GCH1)rLV及对照rLV。6-OHDA制备的PD模型大鼠,随机分为生理盐水组(n=6)、阴性病毒组(n=6)和阳性病毒组(n=12),分别经立体定向向大鼠纹状体注射生理盐水、对照rLV和DDC+TH+GCH1-rLV。观察构建病毒对PD大鼠旋转行为的影响,免疫荧光法检测病毒转染情况,同时使用高效液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS/MS)检测纹状体内DA及其代谢产物改变情况。结果 PD大鼠纹状体注射后,阳性病毒组行为改变与生理盐水组、阴性病毒组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01);阳性病毒组呈现显著的旋转行为改善。免疫荧光显示阳性病毒转染表达有TH活性的阳性细胞。阳性病毒组纹状体内DA及其代谢产物与生理盐水组、阴性病毒组比较,显著增高(P<0.01)。结论成功构建过表达DDC+TH+GCH1-rLV,并且在PD模型大鼠中呈现显著的行为改善及DA水平增加,为PD的基因治疗提供实验基础。
关键词
帕金森病
多巴胺脱羧酶
酪氨酸羟化酶
三
磷酸
鸟
苷
环化
水解酶
1
重组慢病毒
基因治疗
高效液相色谱
-
串联质谱联用法
Keywords
Parkinson's disease
dopamine decarboxylase
tyrosine hydroxylase
GTPcyclihydrolase
1
recombinant lentivirus
gene therapy
high performance liquidchromatography combined with tandem mass spectrometry
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
Q189 [生物学—神经生物学]
原文传递
题名
GLP-1类似物的葡萄糖浓度依赖性降糖机制研究
2
作者
陈寒蓓
林宁
苏青
机构
上海交通大学医学院附属新华医院内分泌
出处
《中国现代医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第15期15-18,共4页
文摘
目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物(Exendin-4)对MIN6细胞的葡萄糖浓度依赖性降糖作用机制。方法检测GLP-1类似物(Exendin-4)在不同葡萄糖浓度下对体外培养的MIN6细胞的ATP水平、cAMP含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量的变化。结果在2.8 mmol/L葡萄糖培养条件下,Ex-endin-4使细胞三磷酸腺苷(ATP)水平无明显变化,环磷酸腺苷(cAMP)含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量无明显增加(P>0.05);在25 mmol/L葡萄糖培养条件下,Exendin-4使细胞ATP水平明显降低,cAMP含量、腺苷酸环化酶活性和胰岛素分泌量明显增加(P<0.05)。结论 GLP-1类似物(Exendin-4)具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素分泌作用,细胞内cAMP含量增加是其引起胰岛素释放的关键环节。
关键词
胰高糖素样肽
-
1
类似物
三
磷酸
腺
苷
环
磷酸
腺
苷
腺
苷
酸
环化
酶
胰岛素
Keywords
glucagon
-
like peptide
-
1
analogue
ATP
cAMP
adenylate cyclase
insulin
分类号
R58 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
Segawa病基础研究最新进展
3
作者
张社卿
乔德丽
郑惠民
丁素菊
机构
上海长海医院神经内科
上海杨浦区中心医院
出处
《罕少疾病杂志》
2004年第2期25-28,共4页
文摘
Segawa病的发病与黑质多巴胺神经元轴突末端酪氨酸羟化酶活性下降有关,在儿童的生长发育阶段,多巴胺活性随年龄而逐渐下降,本病的发病年龄多在多巴胺活性急剧下降的阶段(10左右),症状进行性加重,至30岁以后趋于稳定。最可靠和最有诊断意义的实验室检查是测定脑脊液中生物喋呤和新喋呤的含量,以及外周血单核细胞内三磷酸鸟苷环化水解酶(GTPcyclohydrolase,GCH-1)活性。本病患者黑质神经细胞数量正常。迄今在GCH-1基因的6个外显子已经发现各种形式的突变。
关键词
Segawa病
发病机制
三磷酸乌苷环化水解酶-1
酪氡酸羟化酶
四氢生物喋呤
常染色体显性遗传
分类号
R746.9 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
CD39在转化医学中的作用
4
作者
张波
张杰
谭涛
张灏
朱骅
机构
Department of Surgery
汕头大学医学院肿瘤研究中心
出处
《转化医学杂志》
2014年第3期180-183,192,共5页
基金
American Heart Association(12SDG12070174)
文摘
CD39/膜外三磷酸腺苷二磷酸水解酶-1是一个细胞膜整合的跨膜结构,细胞外有核苷脱磷酸化作用的结合区域的糖蛋白酶,其表达于细胞膜外表面,能使细胞外三磷酸腺苷、二磷酸腺苷水解为磷酸腺苷。目前,研究发现CD39在多器官缺血再灌注损失、血栓形成、器官移植排除反应、肿瘤发生等疾病中起着重要作用,并且在以上疾病中的表现存在交叉作用和共同作用。
关键词
膜外
三
磷酸
腺
苷
二
磷酸
水解酶
-
1
三
磷酸
腺
苷
腺
苷
缺血再灌注
血栓
移植排斥
抗肿瘤
Keywords
CD39
Adenosine triphosphate(ATP)
Adenosine
Ischemia
-
reperfusion
Thrombosis
Graft rejection
Anti
-
tumor
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
过表达多巴胺脱羧酶、酪氨酸羟化酶和三磷酸鸟苷环化水解酶1重组慢病毒构建及其在帕金森病大鼠模型治疗作用的研究
赵慧慧
史明超
金庆文
《中国临床神经科学》
2018
1
原文传递
2
GLP-1类似物的葡萄糖浓度依赖性降糖机制研究
陈寒蓓
林宁
苏青
《中国现代医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
下载PDF
职称材料
3
Segawa病基础研究最新进展
张社卿
乔德丽
郑惠民
丁素菊
《罕少疾病杂志》
2004
0
下载PDF
职称材料
4
CD39在转化医学中的作用
张波
张杰
谭涛
张灏
朱骅
《转化医学杂志》
2014
0
下载PDF
职称材料
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