中国汉族人三磷酸肌苷焦磷酸酶活性的分布

目的:研究三磷酸肌苷焦磷酸酶(ITPA)活性在中国汉族人中的分布。方法:运用HPLC法测定402名健康汉族人红细胞的ITPA活性。结果:不同性别、不同血型汉族人的红细胞ITPA活性均值差异无统计学意义(P>0.05),其ITPA活性呈双峰分布,活性缺乏率为27.6%。此外发现6例ITPA活性缺乏者,占研究总人数的1.47%。结论:中国汉族人红细胞ITPA活性呈双峰分布。

金属有机框架Cu@Sc-MOF纳米酶对5'-三磷酸腺苷的比色/荧光检测

通过溶剂热法制备了一种铜/钪金属有机框架(Cu@Sc-MOF)纳米酶,在H2O2存在下,Cu@Sc-MOF可催化氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)得到蓝色氧化产物oxTMB,并在652 nm处产生特征吸收峰。同样,Cu@Sc-MOF也可氧化邻苯二胺(OPD)生成2-氨基吩嗪(DAP),并在570 nm产生特征荧光发射峰(激发波长为390 nm)。由于5’-三磷酸腺苷(ATP)与Cu2+络合,抑制了Cu@Sc-MOF的催化活性,使得652 nm处的吸光度和570 nm处的荧光强度减弱,基于Cu@Sc-MOF的类过氧化物酶活性,构建了一种用于检测ATP的比色/荧光双模式光谱法。比色和荧光分析法的线性范围分别为2.50~40.00μmol/L和1.00~22.50μmol/L,检出限(LOD)分别为0.60和0.27μmol/L。将上述比色/荧光双模式分析法用于肝癌细胞HepG2细胞裂解液中ATP的检测,加标回收率分别为92.0%~101%和93.2%~97.9%,具有良好的应用前景。

急性淋巴细胞白血病患儿维持治疗期肌酐三磷酸焦磷酸酶活性与6-巯基嘌呤毒性的关系

目的预测肌酐三磷酸焦磷酸酶(ITPA)活性与6-巯基嘌呤(6-MP)维持治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)不良反应发生。方法选取于2002年3月至2012年9月就诊,采用6-MP和甲氨蝶呤维持治疗的54例ALL患儿作为研究对象。回顾性分析患儿ITPA浓度与治疗期间白细胞减少和肝毒性等不良反应发生,检测患儿ITPA以及6-巯嘌呤基转移酶等位基因突变体(TPMT)的基因型。结果 54例患儿的ITPA活性在2.2-343μmol/(h.gHb)之间。18例为ITPA 94C>A突变杂合子,2例为纯合子。6-MP不良反应发生率为70.4%,其中白细胞减少发生率为35.8%,肝毒性发生率为58.2%。有肝毒性患儿的ITPA活性低于无肝毒性患儿,差异有统计学意义(P=0.01)。20例ITPA活性<126μmol/(h.gHb)患儿中有10例(50.0%)因肝毒性而不得不降低6-MP治疗浓度者,而34例ITPA活性≥126μmol/(h.gHb)患儿中无一降低治疗浓度,差异有统计学意义(P=0.01);ITPA活性<126μmol/(h.gHb)患儿的6-MP治疗浓度低于ITPA活性≥126μmol/(h.gHb)的患儿,差异有统计学意义(P=0.01)。结论 ALL患儿维持治疗期ITPA活性与6-MP不良反应发生有关。

蛇床子素对小麦赤霉病菌葡萄糖、钙吸收和三磷酸腺苷酶活性的抑制

蛇床子素可抑制小麦赤霉病菌菌丝生长干重;含有14C标记的葡萄糖培养基中培养小麦赤霉病菌,以100μg/mL蛇床子素处理,其菌体内14C放射强度比对照降低43%,表明蛇床子素能抑制小麦赤霉病菌对葡萄糖的吸收;以100μg/mL蛇床子素处理小麦赤霉病菌12h,菌体内总钙含量仅为对照的60%,表明蛇床子素能抑制菌体对钙的吸收;蛇床子素处理对β-1,6葡聚糖酶活性没有显著影响;离体条件下,蛇床子素能抑制小麦赤霉病菌三磷酸腺苷(ATP)酶活性。

氟化物对家蚕幼虫中肠(钙,镁)-三磷酸腺苷酶活性的影响

添食NaF抑制家蚕幼虫中肠(钙,镁)-三磷酸腺苷酶[(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase]的活性。该抑制作用随添食NaF的浓度提高,或添食日数延长而增加,有累积效应。添食适量的CaCl_2或CaCl_2和Na_2ATP能降低NaF对(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase活性的抑制。试验结果说明,应用Lee的(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase动力学模型可获得满意的解释。氟化物抑制家蚕幼虫体内组织细胞膜上(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPasc活性,致使Ca^(2+)在蚕体内平衡失调,是家蚕氟中毒的一种重要的毒理学上的分子机制。

NaCl胁迫对高粱根、叶鞘和叶片液泡膜ATP酶和焦磷酸酶活性的影响

NaCl胁迫初期 ,Na+主要在根和叶鞘中积累。相应地 ,根和叶鞘液泡膜ATP酶和焦磷酸酶水解活性、依赖ATP和PPi的质子泵活性及Na+/H+逆向转运活性均明显增加 ,根和叶鞘的生长没有受到抑制。NaCl胁迫后期 ,Na+开始向地上部分运输并在叶片中积累。此时 ,叶片液泡膜质子泵和Na+/H+逆向转运活性开始增加 ,根和叶鞘的Na/K比增加 ,其液泡膜ATP酶和焦磷酸酶水解活性、质子泵活性和Na+/H+逆向转运活性下降。相应地 ,根和叶鞘的生长也下降。当保温介质中Na/K比超过 1时 ,液泡膜微囊ATP酶和焦磷酸酶活性均随Na/K比的增加而下降。

转PPase基因对马铃薯无机焦磷酸酶活性和无机磷含量的影响

对转正义和反义无机焦磷酸酶(PPase)基因马铃薯PPase活性及其测定最适条件和无机磷(Pi)含量进行了研究,结果表明,PPase活性测定最适pH值是8.0,最适温度是42℃,二价阳离子以Mg2+最好。叶片中PPase活性和Pi含量较高,茎和生长期微型薯中PPase活性和Pi含量较低,贮存3个月的微型薯中PPase活性和Pi含量比生长期块茎更低。另外,与未转基因的对照相比,转正义PPase基因提高了转基因马铃薯中PPase活性和Pi含量,转反义PPase基因降低了转基因马铃薯中PPase活性和Pi含量。

焦磷酸显色法检测PCR产物及酶活性（英文）

聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是分子生物学领域的一项具有划时代意义的技术,但定量PCR产物或测定能生成焦磷酸的酶活性仍需要新技术的发展。本文提供了一种PCR产物定性及定量检测方法(Color PCR kit)及其用途;该方法通过焦磷酸(pyrophosphate,PPi)显色测定PCR的副产物PPi。利用试剂盒中的试剂与PPi反应,最终生成物为甲暨(formazan),呈红色。根据显色现象(红色)判断PCR的阳性结果,由目测实现PCR的定性检测;或通过测定490 nm处的吸光度值定量检测PCR过程中生成的副产物PPi的含量,定量检测PCR产物的生成量;目测情况下Color PCR kit可检测到2.5 ng水平的PCR产物,用紫外分光光度计可检测到低限为1 pg;Color PCR kit法比琼脂糖凝胶电泳检测法(低限为4 ng)灵敏。Color PCR kit还可用于连接酶和转移酶活性的测定。

焦磷酸盐微晶玻璃对β-磷酸三钙生物陶瓷的抗弯强度及生物活性的影响

通过熔融法制备组成为Na2O-MgO-CaO-P2O5的基础玻璃,在800℃进行热处理,得到主要组成为Na4P2O7和β-Ca2P2O7(β-calcium pyrophosphate,β-DCP)的焦磷酸盐微晶玻璃(pyrophosphate glass,PG)。将PG和β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)按质量比为10:90混合,干压成型,烧结制得PG/β-TCP生物陶瓷。采用差热分析、X射线衍射、扫描电镜、能谱、模拟体液浸泡等方法研究了基础玻璃的析晶、PG/β-TCP生物陶瓷材料体系的相组成、力学性能和生物活性。结果表明:PG能有效提高PG/β-TCP陶瓷的抗弯强度,1 300℃烧结3 h制备的PG/β-TCP陶瓷的弯曲强度与纯β-TCP陶瓷相比,由87.4 MPa提高至113.2 MPa;同时,PG可有效改善β-TCP基体的生物活性,在模拟体液中浸泡14 d后,PG/β-TCP陶瓷表面形成Ca与P摩尔比为1.46的叶状磷灰石。

篦子三尖杉牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因的克隆与序列分析

三尖杉是我国特有植物,主要含有生物碱、黄酮及萜类等生物活性物质。以篦子三尖杉为试验材料,根据同源克隆的方法扩增三尖杉牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(GGPPS)基因,并通过生物信息的方法对该基因进行鉴定和分析。结果表明,篦子三尖杉GGPPS基因全长1 217 bp,含有1个完整的1 182 bp开放阅读框(ORF),编码393个氨基酸的蛋白序列,GGPPS蛋白相对分子量为43.042 ku,理论等电点(p I)为6.57,其二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成;蛋白质同源分析表明,三尖杉GGPPS含有多聚异戊二烯基合成酶家族中保守的5个特征性结构和2个富含天冬氨酸的区域;同源模建分析显示,三尖杉GGPPS具有GGPPS蛋白典型的三维结构,特别与薄荷GGPPS蛋白的三维结构及活性位点极其相似;系统进化分析表明,三尖杉GGPPS蛋白归属植物进化支,且与加拿大红豆杉、曼地亚红豆杉、海南粗榧的GGPPS蛋白归为同一分支。

次黄苷三磷酸焦磷酸酶遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和不良反应影响的研究进展

硫嘌呤类药物作为一类常用的免疫抑制剂,广泛应用于临床。然而其治疗窗窄,药动学个体差异大一直是困扰该类药物临床应用的难题。尽管硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine methyltransferase,TPMT)基因多态性被认为是影响硫嘌呤类药物药动学的主要遗传因素,但研究结论并不统一。而最近的一些研究将焦点集中到了次黄苷三磷酸焦磷酸酶(inosine triphosphate pyrophosphatase,ITPA)的遗传多态性上。因此,本文就ITPA遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和毒性影响的研究进展作一综述,以期为临床个体化应用硫嘌呤类药物提供理论指导。

铜缺乏对奶牛红细胞及组织细胞膜三磷酸腺苷酶活性的影响

从1995年3月至1999年6月,在黑龙江省大庆地区陆续发生犊奶牛地方性共济失调症,经初步流行病学调查及水土食物链中微量元素状态的分析,诊断为犊奶牛地方性铜缺乏症(血清、全血、肝铜含量分别为0.45 mg/L、0.58 mg/L、42 mg/kg),发病率为12.6%,发病死亡率为90%.以前对动物铜缺乏的研究,注重于对含铜酶类的测定,并以此来解释铜缺乏导致的一些特征性病理变化.我们认为这种解释具有一定的局限性.本试验首次对比测定了铜缺乏奶牛、正常奶牛红细胞及组织细胞膜三磷酸腺苷(ATP)酶的活性及补铜后亚临床铜缺乏奶牛ATP酶活性的变化,从铜缺乏影响奶牛细胞膜离子泵功能的角度探讨铜缺乏症的发病机理.

运动训练对骨骼肌三磷酸腺苷脱氢酶活性的影响

概述了三磷酸腺苷脱氢酶(ATPase)的生理生化作用以及运动对骨骼肌中这种酶活性的影响.运动训练可引起骨骼肌中ATPase活性发生改变,改变的程度与运动、运动持续时间,以及运动训练环境、运动类型等因素有关.

小麦腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶同工酶基因型与酶活性及淀粉含量的关系

采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定了我国60个代表性小麦品种的腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGP)同工酶基因型,并测定了AGP活性及总淀粉含量,以明确小麦籽粒AGP同工酶基因型组成及其与AGP活性和淀粉含量的关系。结果表明,AGP有AGPa、AGPb、AGPc和AGPd4个等位基因位点,其出现频率分别为96.7%、80.0%、86.7%和16.7%;共检测到5种基因型,其中基因型AGPabc出现频率最高,为46.7%。不同基因型的品种间AGP活性和总淀粉含量差异显著(P<0.05)。其中具有基因型AGPabcd的品种酶活性及总淀粉含量最高,表明小麦籽粒中不同AGP同工酶基因型对酶活性及淀粉含量有不同遗传效应。

家蚕幼虫消化管内三磷酸腺苷酶活性的测定

家蚕幼虫的营养是生长的基础,是获得蚕茧优质高产的重要条件.营养是获得外来物质的机制,幼虫通过消化管的消化吸收机能获得营养物质.幼虫消化管的吸收作用主要由中肠组织的主动运输作用来完成.主动运输作用是一种逆浓度梯度的物质移动,需要能量的供应.能量来源于中肠组织中三磷酸腺苷(ATP)的分解、ATP的分解需要三磷酸腺苷酶(ATPase)的催化作用.

香菇UDP-葡萄糖焦磷酸化酶转录水平及酶活性对不同碳氮源的响应特征

以香菇新808为材料,利用苯酚-硫酸法和qPCR技术分析不同碳氮源下菌丝体多糖含量及尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因相对表达量,并测定其酶活性.结果表明,与对照组相比,除硝酸铵处理外,其余处理均能提高香菇菌丝体生物量,以麦麸处理的生物量最大(0.63g).以小分子糖(蔗糖、麦芽糖和甘露糖)为碳源、有机复合物(麦麸和黄豆芽)为氮源时,UGP基因表达量明显上调,酶活性更高,菌丝胞内多糖含量也明显提高.其中蔗糖和麦麸处理下的UGP基因表达量、酶活性和菌丝胞内多糖含量最高.香菇菌丝UGP基因表达量、酶活性以及胞内多糖间存在明显的正相关关系.显示小分子碳源(蔗糖、麦芽糖和甘露糖)、有机氮源(麦麸和黄豆芽)有助于香菇菌丝多糖的合成,其中蔗糖和麦麸可作为香菇液体发酵优势碳源和氮源.

dUTP焦磷酸酶在大肠癌细胞和组织中的差异表达

目的验证dUTP焦磷酸酶(dUTPase)在人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116和组织的差异表达。方法RT-PCR检测人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116中焦磷酸酶的mRNA表达水平,并通过检测该酶水解dUTP释放的焦磷酸(PPi)来测定这4种大肠癌细胞dUTPase的酶活性。免疫细胞和组织化学检测焦磷酸酶的蛋白表达差异。结果dUTPase在SW620和LoVo细胞的mRNA水平和酶活性高于SW480和SW1116细胞。大肠癌SW620,LoVo细胞免疫化学dUTPase表达高于SW1116、SW480细胞。大肠增生性息肉和腺瘤性息肉dUTPase的表达低于大肠癌。结论焦磷酸酶dUTPase在人4种大肠癌细胞和组织存在差异表达。

黄芪和当归注射液对兔肾缺血再灌注损伤时腺苷三磷酸酶的影响(英文)

背景:近年研究表明,黄芪和当归具有抗自由基的作用,对肾缺血再灌注损伤具有保护作用。目的:观察黄芪、当归注射液在肾缺血再灌注损伤中对腺苷三磷酸酶(ATP酶)的保护作用及机制。设计:以实验动物为研究对象的观察对比实验。单位:一所医学院的生理教研室及肾功能保护研究室。材料:本实验于2001-01/2001-03在泸州医学院生理实验室完成。选择健康成年日本大耳白兔33只,由泸州医学院实验动物中心提供,雌雄不拘,体质量(1.63±0.22)kg。按随机数字表法分为假手术对照组8只、单纯缺血再灌注组8只、黄芪注射液+缺血再灌注组(黄芪组)8只、当归注射液+缺血再灌注组(当归组)9只。方法:术前1d、手术当天、术后1d,黄芪组、当归组每天分别静脉注射药物(黄芪1.25g/kg、当归12.5g/kg),对照组和单纯缺血再灌注组每天注射生理盐水5mL/kg。肾缺血1h再灌注48h后,下腔静脉采血,取右肾上极组织置入30mL/L戊二醛固定,下极组织制成组织匀浆。电镜检查肾组织超微结构,测血清肌酐含量及肾组织中ATP酶活性。主要观察指标:肾组织超微结构、血清肌酐含量及肾组织中ATP酶活性。结果:单纯缺血再灌注组肾组织变性显著,黄芪组、当归组病变较单纯缺血再灌注组明显减轻。单纯缺血再灌注组血清肌酐含量明显高于假手术对照组(P<0.05);黄芪组、?