放大镜目测法联合三磷酸腺苷生物荧光法在腹腔镜手术器械清洗效果检测中的应用分析

目的:观察放大镜目测法联合三磷酸腺苷(Adenosine Triphosphate,ATP)生物荧光法在腹腔镜手术器械清洗效果检测中的作用。方法:选择清洗后拟行低温等离子灭菌的腹腔镜手术器械72套,每套12件,随机分为三组,每组288件。A组采用放大镜目测法,B组采用裸视目测法联合ATP生物荧光法,C组采用放大镜目测法联合ATP生物荧光法,检测并记录各组器械的清洗不合格情况,记录B组和C组每套器械的检测费用。结果:检测出清洗不合格的器械分别为A组11件(3.8%)、B组23件(8.0%)、C组25件(8.7%),B组和C组检测出的器械清洗不合格率明显高于A组(P<0.05);C组每套器械的平均检测费用为(802.08±35.63)元,明显低于B组的(825.42±41.18)元(P<0.05)。结论:放大镜目测法联合三磷酸腺苷生物荧光法检测结果客观可靠,灵敏度高,检测费用低,适用于腹腔镜手术器械清洗效果的日常监测、重点加测或定期抽查。

三磷酸腺苷生物荧光法联合环节质量管理在低温器械手工清洗效果监测及改进中的作用

目的采用三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生物荧光法联合环节质量管理方法,探讨手工清洗的低温灭菌器械的清洗效果,发现问题并进行改进。方法便利抽样选取2015年7-9月在手术室低温器械清洗间需人工清洗的手术器械共32件,于清洗前和清洗干燥后进行物表取样,结构复杂部位同时进行细缝取样,读取相对光单位(relative light unit,RLU)值,判断手工清洗效果;根据环节质量管理中发现的问题对清洗不合格的情况进行分析,改进后再次测定清洗效果。结果绝大部分低温器械经人工清洗后生物残留明显降低,但结构复杂的器械生物残留仍比较严重。改进清洗流程并加强医辅人员的培训,对清洗不合格的器械进行再次清洗,结果显示,改进清洗方法后所有器械的生物残留明显小于改进前,且均已合格。结论 ATP生物荧光法能提供手术器械清洗效果的实时监测及持续改进的作用,并提高手工清洗器械的环节质量控制。

浅谈三磷酸腺苷生物荧光法在消毒供应中心的应用

目的:利用监测手段加强消毒供应中心(CSSD)院内感染控制管理,以降低院内感染率。方法:通过检测生物物质三磷酸腺苷(ATP)的含量,评估环境、医疗器械及手卫生的洁净度。结果:CSSD是院内感染的重点控制科室,医疗器械是由CSSD引起院内感染的直接祸首,故加强其清洁区、无菌区环境是CSSD管理的重点,也是院内感控重点部位。结论:运用新的技术方法,即ATP生物荧光法在CSSD加强环境、医疗器械及手卫生的洁净度三方面的监测,可有效降低院内感染率。

三磷酸腺苷生物荧光法评价达芬奇机器人手术器械清洗效果对照研究

目的探讨三磷酸腺苷生物荧光法在达芬奇机器人手术器械清洗中的应用,并比较不同评价方法的差异。方法采用简单随机抽样方法,于2016年4—11月份选取消毒供应中心完成清洗但并未消毒灭菌的达芬奇机器人手术器械作为研究对象。采用10倍放大镜目测法、3M蛋白残留测试棒法及三磷酸腺苷生物荧光法分别检测达芬奇机器人穿刺套管、机械臂的清洗效果。结果放大镜法、残留蛋白法和三磷酸腺苷生物荧光法分别检测清洗后机器人穿刺套管45件,合格率分别为93%、87%和82%(χ~2=2.557,P=0.278);检测清洗后机器人机械臂60件,合格率分别为97%、88%和85%(χ~2=4.815,P=0.090);差异均无统计学意义(P>0.05)。三磷酸腺苷生物荧光法对2类器械不合格检出率均最高。结论三磷酸腺苷生物荧光法可作为检测达芬奇机器人手术器械清洗效果的有效方法。

三磷酸腺苷生物荧光法在急性髓系白血病细胞体外药物敏感性检测的初步应用

目的初步探索三磷酸腺苷生物荧光肿瘤体外药敏检测(ATP bioluminescence-tumor chemosensitivity assay,ATP-TCA)技术在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的临床应用价值。方法采集18例初治AML患者的骨髓或外周血,分离单个核细胞,应用ATP-TCA技术,观察体外白血病细胞对化疗药物的敏感性,并分析体外药敏结果、危险度分层及临床疗效三者之间的关系。结果 18例初治AML患者的白血病细胞在体外对8种化疗药物显示出不同的敏感性,有效率最高的是阿柔比星,无效率最高的是吡柔比星。在14例可进行疗效评价的初治AML患者中观察到蒽环类药物体外敏感性与临床疗效之间的完全相符率为78.6%,不同危险度分层患者之间的临床疗效(P=0.012)和生存时间(P=0.018)均有显著差异,高危组患者生存时间最短。结论 AML体外药敏检测结果与临床治疗反应之间具有相关性趋势,ATP-TCA可能是开展AML个体化化疗的一种有效的体外药物筛选方法,尤其是老年AML。

三磷酸腺苷生物荧光法检测肿瘤药敏的价值

目的 :探讨三磷酸腺苷生物荧光法 (ATP TCA)评估肿瘤药物敏感性和指导术后化疗的价值。方法 :以ATP TCA法在体外分别检测了 5 9例 5种实体瘤细胞对 6种化疗药物的耐药率和敏感率。结果 :5 FU、MMC、DDP等 6种常用化疗药物的耐药率 >75 %。胃肠肿瘤的化疗药物敏感性差异无显著意义 ,泰素、羟基喜树碱、丝裂霉素和吡柔比星对肝癌的敏感率分别为 91 7%、6 0 0 %、5 0 0 %和 4 2 8% ;诺维本、博莱霉素对食管癌敏感率为 85 7%、4 2 9%。结论 :ATP TCA法用于检测肿瘤化疗药物敏感性较为可靠 。

三磷酸腺苷生物荧光法和细菌培养法监测中度危险医疗用品安全性研究

目的:采用三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法和细菌培养法监测中度危险医疗用品,评估存放中的中度危险医疗用品的安全性,并进行效果分析。方法:采用ATP生物荧光法和细菌培养法对清洗消毒后的中度危险医疗用品进行采样和监测,将清洗消毒后的中度危险医疗用品分别采用医用塑料自封袋、棉布双层布袋和聚乙烯塑料袋3种包装,存放0 d、7 d、14 d、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月后进行8个时间段的采样和监测,对比分析两种方法的监测效果。结果:细菌培养法的8个时间段检测中,医用塑料自封袋和聚乙烯塑料袋均未检出有害细菌;棉布双层布袋在存放3个月时检出干燥棒状杆菌1个,存放6个月时检出四联球菌2个;3种包装微生物监测合格率比较无差异。ATP检测医用塑料自封袋中的高效消毒物品ATP值1年内均为正常值;棉布双层布袋存放1个月时ATP值超出正常值;聚乙烯塑料袋0 d至1年的8个时间段ATP值均不合格,棉布双层布袋与聚乙烯塑料袋比较无差异;7 d,14 d、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月医用塑料自封袋与棉布双层布袋和聚乙烯塑料袋比较,差异有统计学意义(F=3.142,F=3.900,F=9.556,F=7.705,F=10.596,F=10.282,F=14.204;P<0.05)。结论:ATP检测法结果检出及时,细菌培养法结果检出则需2 d;ATP检测值为升高或下降,细菌培养检测可检出具体细菌;ATP检测快速且有效,但无法检出具体致病菌。

三磷酸腺苷生物荧光检测技术在清洗消毒效果评价中的应用及研究进展

三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测技术是一种快速微生物检测方法,具有简便、灵敏度高和实时检测等优点,被广泛应用于多种行业微生物检测。该研究对ATP生物荧光检测技术在各类复用器械清洗及医疗环境消毒效果评价中的应用进行综述,为ATP生物荧光检测技术的使用及推广提供参考。

金属有机框架Cu@Sc-MOF纳米酶对5'-三磷酸腺苷的比色/荧光检测

通过溶剂热法制备了一种铜/钪金属有机框架(Cu@Sc-MOF)纳米酶,在H2O2存在下,Cu@Sc-MOF可催化氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)得到蓝色氧化产物oxTMB,并在652 nm处产生特征吸收峰。同样,Cu@Sc-MOF也可氧化邻苯二胺(OPD)生成2-氨基吩嗪(DAP),并在570 nm产生特征荧光发射峰(激发波长为390 nm)。由于5’-三磷酸腺苷(ATP)与Cu2+络合,抑制了Cu@Sc-MOF的催化活性,使得652 nm处的吸光度和570 nm处的荧光强度减弱,基于Cu@Sc-MOF的类过氧化物酶活性,构建了一种用于检测ATP的比色/荧光双模式光谱法。比色和荧光分析法的线性范围分别为2.50~40.00μmol/L和1.00~22.50μmol/L,检出限(LOD)分别为0.60和0.27μmol/L。将上述比色/荧光双模式分析法用于肝癌细胞HepG2细胞裂解液中ATP的检测,加标回收率分别为92.0%~101%和93.2%~97.9%,具有良好的应用前景。

三磷酸腺苷生物荧光法在手工器械清洗效果评价中的应用研究

目的探讨三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法在手工器械清洗效果评价中应用的可行性及能反映清洗合格的ATP相对吸光值。方法采用ATP生物荧光法与目测、细菌培养计数法比较,检查手工清洗后器械的清洁度,并用百分位数法计算ATP生物荧光仪的测量相对光单位(RLU)值95%正常值上限。结果目测、细菌培养合格率均为100%,ATP生物荧光仪测量的RLU值与上述两项结果不成线性关系,RLU值95%正常值上限为64.53。结论ATP生物荧光法可快速评价手工清洗后器械的清洁度,并能在实际工作中及时纠正不彻底的清洁程序。

应用三磷酸腺苷生物荧光法对手术体位垫表面细菌含量快速检测

目的观察三磷酸腺苷生物荧光法快速监测体位垫清洁消毒效果应用的可能性。方法采用棉拭涂抹法采样和三磷酸腺苷生物荧光法,对手术后体位垫表面清洁消毒后细菌含量进行检测,同时与细菌培养计数法作平行比较。结果三磷酸腺苷生物荧光检测结果合格率为96.66%,细菌培养计数检测结果合格率为93.33%,两者检测结果基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。三磷酸腺苷生物发光法检测所需费用比细菌培养计数法低8.07元,且前者出结果快。结论三磷酸腺苷生物荧光法能快速监测体位垫清洁消毒效果,且操作成本较低。

三磷酸腺苷生物荧光法快速监测医务人员手清洁消毒效果

目的观察三磷酸腺苷生物荧光法快速监测医务人员手清洁消毒效果。方法采用棉拭涂抹采样法和三磷酸腺苷生物荧光法,对医务人员手消毒效果随机采样68例次,同时利用细菌培养计数法和ATP生物荧光法对卫生手清洁消毒后细菌含量进行检测。结果用三磷酸腺苷生物荧光法检测医务人员手消毒后68份样,合格率为89.71%;用细菌培养计数法检测医务人员手消毒后68份样,合格率为85.29%;两者方法检测结果基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论三磷酸腺苷生物荧光法能快速监测卫生手消毒效果,出结果快,省时省力。

三磷酸腺苷生物荧光法快速监测外科手消毒的效果评价

三磷酸腺苷（ATP）生物发光法是一种快速检验方法,检测结果间接反映出微生物或有机物的含量,具有简便、灵敏、便于携带、方便现场操作等优点。为此,我院手术室初步尝试将ATP生物发光法应用于监测外科手消毒效果,观察其发光值、细菌培养计数法检测结果进行分析。现报道如下。

三磷酸腺苷生物荧光法在医院生物学监测中的应用

目的了解医疗机构环境卫生、医疗器械清洗效果,探索三磷酸腺苷生物荧光法在医院生物学监测中的应用。方法采用现场采样检测方法,对北京市37所医疗机构ICU环境卫生和23所医疗机构无菌医疗器械及内镜清洗消毒效果进行了调查。结果 ICU物体表面、呼吸机湿化液合格率分别为88.40%、77.53%,手术室灭菌后医疗器械合格率为95.83%,内镜合格率较低,为50.00%。结论医院听诊器、宫腔组织吸引管、内镜清洗消毒存在不同程度的问题,需要进一步改进和提高,三磷酸腺苷生物荧光法与传统生物学监测比较,操作简便且能快速查找出医院清洗消毒的薄弱环节,但是其检测合格标准,尤其是内镜检测合格标准需进一步研究。

三磷酸腺苷生物荧光法体外药敏试验指导复发或难治性非霍奇金淋巴瘤化疗的临床研究

目的探讨三磷酸腺苷生物荧光法（ATP—TCA）体外药敏试验在复发或难治非霍奇金淋巴瘤（NHL）治疗中的临床应用价值。方法应用ATP—TCA技术对复发或耐药淋巴瘤患者术后新鲜组织标本共34例进行体外药敏试验，观察用敏感药物化疗疗效。结果淋巴瘤标本的药物敏感性具有个体差异性，不同化疗药物的体外抑瘤活性不同。药敏试验组总有效率（RR）为82．4％（28／34），完全缓解（CR）率为52．9％（18／34）；DICE化疗组RR为60．0％（18／30），CR率为33．3％（10／30）；GDP化疗组RR为62．3％（33／53），CR率为26．4％（14／53）。药敏试验组的RR与DICE组及GDP组相比，差异有统计学意义（x2=3．93，P=0．047；x2=3．98，P=0．046）。结论ATP—TCA体外药敏检测结果与临床治疗反应有很好的相关性，是开展肿瘤个体化化疗的一种重要的体外药物筛选方法。

建立检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2的mRNA相对表达水平的RT-qPCR方法

目的本研究旨在建立一种实时荧光定量PCR方法,用于检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(adenosine triphosphate-binding cassette transporter protein G2,ABCG2)mRNA的基因转录水平。方法使用NCBI上GenBank数据库猕猴(Macaca mulatta)的ABCG2核苷酸序列号NM_001032919.1及内参GAPDH核苷酸序列号NM_001195426.1,借助Primer premier 5.0软件设计PCR引物。提取猕猴新鲜肾组织的总RNA,并反转录合成cDNA。接着,利用PCR引物进行实时荧光定量PCR扩增,并根据反应体系中荧光的变化情况定量分析ABCG2的mRNA相对表达水平。结果PCR产物测序结果显示,扩增的ABCG2和GAPDH核苷酸序列与NCBI上猕猴的序列同源性分别为90.91%和91.14%。ABCG2和GAPDH的扩增效率均达到80%~120%,实时荧光定量PCR标准曲线的熔解曲线为单峰,R2接近1。结论本研究建立的检测猕猴ABCG2 mRNA实时荧光定量检测方法,为研究高尿酸血症的发病机制以及新药开发奠定基础。

氧化石墨烯-DNA纳米探针用于三磷酸腺苷的检测与药物递送

癌细胞内三磷酸腺苷(ATP)浓度异常与肿瘤发生发展过程密切相关,因此,快速、准确地检测细胞内外ATP水平具有重要意义。盐酸阿霉素(DOX)是一种广泛使用的抗癌药物,能嵌入DNA碱基对,并通过抑制DNA复制和转录诱导细胞凋亡。氧化石墨烯(Graphene oxide, GO)由于具有毒性低、比表面积大和易功能化,可以有效、稳定地负载DNA纳米探针进入细胞等优点而被广泛应用。然而,复杂环境中的生物分子容易通过物理吸附竞争性结合到GO表面,导致假阳性信号。基于此,提出了一种新型的GO-DNA纳米探针,并将其应用于ATP的检测与抗癌药物DOX靶向递送。以ATP的核酸适配体与其互补链杂交形成双链DNA(dsDNA),并通过G-C碱基对负载DOX,利用互补链延伸的poly A序列吸附到GO表面构建了GO-dsDNA-DOX纳米探针,能极大程度地降低复杂环境中物理吸附引起的干扰,减少假阳性信号产生。ATP与适配体特异性结合会导致DOX释放,根据其荧光“off-on”实现ATP的定量分析,DOX荧光强度与ATP含量在0.08~8.0 mmol/L范围内呈现良好的线性关系,线性方程为IF=3.0897c+129.08,检测限(3σ/k)为0.059 mmol/L,且方法具有良好的选择性和抗干扰能力。细胞毒性及荧光成像结果表明,负载DOX的纳米探针在人乳腺癌细胞(MCF-7)内有明显的药物释放,显著诱导细胞凋亡。该研究建立了一种免修饰、简单和快速的ATP含量检测分析方法,并利用癌细胞内高浓度ATP实现靶向药物递送,降低了对正常细胞的毒副作用,为癌症的治疗提供了新思路。

三磷酸腺苷生物荧光法在手卫生质量监测中的应用

目的探讨三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法在医院工作人员手卫生清洁度评价方法中的应用。方法抽取医师、护士、技师、行政后勤、保洁人员250人,记录洗手时间和洗手后ATP检测值。结果总体不同人员类别(医师、护士、技师、行政后勤)手卫生ATP清洁度差异有统计学意义(Х^(2)=14.587,P=0.002)。不同职称高级、中级与初级之间手卫生ATP清洁度差异无统计学意义(P>0.05)。女性手卫生ATP清洁度合格率(84.52%)高于男性(65.85%)。洗手时间与ATP清洁度RLU值呈负相关(r=-0.59,P<0.01)。结论工作人员有待于进一步提高洗手方法的正确性,以提高手卫生清洁质量。

三磷酸腺苷生物荧光法在监测手术器械清洗效果中的应用

目的采用三磷酸腺苷（ATP）生物荧光法对多所医院的手术器械清洗效果进行连续、系统的监测,探讨ATP生物荧光法的实际应用性。方法于2012-2015年共监测3所不同地市的三级甲等医院,每季度对监测医院进行ATP生物荧光法检测,采用统一的试验方法和仪器检测手工或机器清洗后的手术器械,结果用SPSS19.0统计软件进行分析。结果经机器清洗后的手术器械ATP中位值为862（328-2631）mol,经手工清洗后的手术器械ATP中位值为1925（797-5320）mol,机器清洗效果优于手工清洗,差异有统计学意义（P〈0.01）;经机器清洗后的手术器械ATP值在不同医院间无差异,在时间上相对稳定。结论可以用ATP生物荧光法快速评价手术器械的清洗效果。