ABCB1基因C3435T多态性对苯巴比妥透过癫痫患者血-脑屏障的影响

目的探讨ABCB1基因C3435T多态性对苯巴比妥(PB)透过癫痫患者血-脑屏障(BBB)及癫痫发作的影响。方法选择62例接受PB单药治疗的全身强直-阵挛发作癫痫患者,记录6个月治疗期间的癫痫发作次数。对患者进行ABCB1基因C3435T多态性基因分型,测定脑脊液(CSF)及血清(S)中PB的药物浓度,计算CSF/S-PB浓度比作为PB透过BBB的指标。结果62例患者经ABCB1基因C3435T基因测序分型,其中CC型17例,CT型32例和TT型13例;CC型、CT型和TT型患者CSF-PB分别为(44.71±10.95)μmol/L、(52.75±13.24)μmol/L、(65.64±14.34)μmol/L,CSF/S-PB分别为0.47±0.12、0.53±0.17、0.66±0.19,差异有统计学意义(P<0.05)。CC型发作9次2例,8次1例,7次3例,6次2例,发作超过5次CT型和TT型仅有1例,CC基因型和低CSF/S-PB与癫痫发作频率增加相关(P<0.05)。结论ABCB1基因C3435T多态性显著影响癫痫患者CSF/S-PB浓度比和癫痫发作频率,可能是癫痫耐药的机制之一。

miRNA-145通过靶向调节ABCC1增强胃肠道间质瘤细胞对伊马替尼的敏感性

目的 :探讨miRNA-145(miR-145)通过调控三磷酸腺苷结合盒转运蛋白亚家族C成员1(adenosine triphosphate binding cassette subfamily C member 1, ABCC1)的表达介导胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, GIST)细胞对伊马替尼敏感性的影响。方法:实时定量聚合酶链式反应法(real time polymerase chain reaction, RT-PCR)检测间质瘤细胞株GIST-T1及伊马替尼耐药株GIST-TI-R中miR-145的表达水平;脂质体转染法将miR-145 mimic转染至GIST-TI-R细胞,RT-PCR检测GIST-TI-R细胞中miR-145水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-145对ABCC1的调节作用;Western Blot检测ABCC1蛋白水平的变化;细胞增殖试验(cell counting kit-8, CCK-8)检测细胞药物敏感性的改变。结果:相比于GIST-T1细胞,miR-145在GIST-TI-R细胞中表达下调,而ABCC1蛋白表达上调;过表达miR-145后,GIST-T1-R细胞中ABCC1表达降低,且miR-145可以靶向调节ABCC1的3′非编码区;miR-145过表达组GISTT1-R细胞的药物敏感性显著增加。结论:miR145可通过下调ABCC1的表达,增强GIST-T1-R细胞对伊马替尼的药物敏感性。

肿瘤患者ABCB1基因多态性与紫杉醇疗效及药物不良反应的相关性研究

目的 探讨肿瘤患者腺苷三磷酸结合盒B家族成员1(ABCB1)基因多态性与紫杉醇疗效及药物不良反应的相关性。方法 选取接受紫杉醇化疗的肿瘤患者作为研究对象,检测其ABCB1 T3435C、C1236T、G2677T/A基因型,并将患者分为野生型组和突变型组。2个周期后,对疗效和药物不良反应进行评估,分析患者的疗效及药物不良反应和ABCB1基因多态性的相关性。结果 67例肿瘤患者中,ABCB1 G2677T/A基因的野生型组的有效率(69.23%)高于突变型组(25.93%),差异有统计学意义(P<0.05);在药物不良反应指标中,ABCB1 G2677T/A基因的野生型组的谷丙转氨酶(21.42±6.93)U·L^(-1)低于突变型组(28.80±17.96)U·L^(-1),两者存在显著性差异(P<0.05)。而ABCB1 C3435T、C1236T基因的野生型组、突变型组之间的疗效和药物不良反应均不存在显著性差异(均P>0.05)。结论 ABCB1 G2677T/A基因多态性与紫杉醇的疗效和肝毒性具有相关性,而ABCB1 C3435T、C1236T基因多态性与紫杉醇的疗效和药物不良反应均不具有相关性。

ABCB1基因多态性与糖皮质激素性股骨头坏死的关联

目的分析三磷酸腺苷结合盒转运子B亚家族成员1(ABCB1)基因多态性与糖皮质激素性股骨头坏死(SANFH)的关联性。方法选取2017年01月-2019年01月厦门大学附属第一医院收治的长期使用糖皮质激素治疗的95例患者,其中发生股骨头坏死(ONFH)患者55例为坏死组,未发生ONFH患者40例为对照组,检测两组骨代谢指标[Ⅱ型胶原羧基端端肽(CTXⅡ)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)],血流流变学指标(血黏度高切、血黏度低切、血浆黏度及红细胞压积);采用Sanger测序法检测ABCB1基因C1236T、G2677T/A及C3435T位点单核苷酸多态性(SNPs)。结果坏死组CTXⅡ(209.51±10.37)ng/L、TRACP-5b(52.04±6.55)U/L水平及血黏度高切(5.08±0.77)、血黏度低切(11.38±2.74)、血浆黏度(2.23±0.30)mPa·s及红细胞压积(50.92±7.12)%均高于对照组(P<0.05);坏死组ABCB1基因C3435T位点CC基因型及C等位基因频率高于对照组(P<0.05)。结论糖皮质激素性股骨头坏死患者骨代谢和血流流变学指标水平升高,ABCB1 C3435T位点C等位基因与SANFH易感性有关。

砷对巨噬细胞胆固醇流出及ABCA1、ABCG1、SRBI基因表达的影响

目的分析砷对巨噬细胞胆固醇流出及腺苷三磷酸结合盒家族A亚家族成员1(ABCA1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G1(ABCG1)和清道夫受体-BI(SRBI)基因表达的影响,为砷致动脉粥样硬化的机制研究提供依据。方法人髓系白血病单核细胞(THP-1)加入佛波酯诱导成巨噬细胞,与小鼠原代巨噬细胞用0、0.625、1.25、2.5和5μmol/L的亚砷酸钠处理48 h,采用荧光定量PCR和免疫印迹法检测ABCA1、ABCG1和SRBI基因表达水平;采用同位素示踪法检测胆固醇流出率。用含2.5μmol/L亚砷酸钠培养基处理巨噬细胞48 h,再换无砷培养基培养48 h,每隔12 h收集细胞,分析砷对ABCA1表达水平和胆固醇流出的时间效应。结果砷以剂量依赖方式抑制ABCA1、ABCG1的表达和胆固醇流出;5μmol/L砷处理组THP-1细胞和小鼠原代巨噬细胞中ABCA1 mRNA相对表达量分别下降69%和72%,ABCG1 mRNA相对表达量分别下降42%和34%,胆固醇流出率分别下降55%和59%(均P<0.05)。砷对SRBI的表达无明显影响(均P>0.05)。砷以时间依赖方式抑制THP-1细胞ABCA1表达和胆固醇流出,砷处理48 h时ABCA1 mRNA相对表达量和胆固醇流出率下降至最低,分别为0 h时的43%和42%;去除砷影响后ABCA1 mRNA相对表达量和胆固醇流出率逐渐恢复。结论砷通过下调巨噬细胞ABCA1和ABCG1的表达抑制胆固醇流出。

胆结石病人肝脏核受体LRH-1及其调控基因表达的研究

目的研究胆囊胆固醇结石病人肝脏的肝脏受体类似物1（Liver receptor homolog 1，LRH-1）及其调控的三磷酸腺苷结合盒（ABC）转运体家族成员abcg5／8的表达，探讨胆固醇结石病发病的机制。方法27例胆囊胆固醇结石病人，男6例，女21例；年龄平均52岁。10例无胆石症的胆囊息肉病人为对照，男6例，女4例；平均年龄48岁。测定胆汁脂类成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1及abcg5／8mRNA的表达量。结果胆石组LRH-1表达高于对照组（14．18±1．80VS7．22±2．22，P〈0．05），胆石组肝脏abcg基因mRNA表达量均较对照组增高（abcg5：49．34±3．68vs33．48±2．77，P〈0．05；abcg8：38．93±5．70vs18．70±3．42，P〈0．05）。胆石组胆汁呈胆固醇过饱和（1．17±0．02）。结论该研究结果提示人类肝脏LRH-1及其调控的abcg5／8的表达增高与胆囊胆固醇结石形成有关。

大黄灵仙胶囊调控胆结石小鼠肝细胞转运蛋白表达及胆汁代谢谱的机制研究

目的通过Western blot法和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术观察大黄灵仙胶囊对小鼠胆结石肝细胞转运蛋白表达及胆汁代谢谱的影响,探讨其可能机制。方法将50只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)、熊去氧胆酸(UDCA)对照组(U组)、药物对照组(Y组)及大黄灵仙胶囊治疗组(D组),每组10只。N组和Y组小鼠普通饲料喂养,M、U、D组给予高脂、高热量、高胆固醇饲料诱导胆囊结石的形成。同时U组每天给予130mg/kg UDCA溶液灌胃;Y组和D组每天给予大黄灵仙胶囊汤药13g/kg灌胃,N组和M组给予相同体积的生理盐水灌胃。干预8周后,观察小鼠成石率,利用Western blot法观察肝胆管侧膜细胞转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运子B亚族成员11(ATP binding cassette subfamily B member 11,Abcb11)和三磷酸腺苷结合盒转运体c2(ATP binding cassette subfamily C member 2,Abcc2)变化,GC-MS技术检测小鼠胆汁代谢组学特征。结果造模期间因灌胃操作不慎,U组1只小鼠挣扎时灌胃针扎破小鼠食管导致死亡。M组成石率为100.00%,高于N组和Y组(均为0.00%,χ2=20.00,P<0.01);与M组比较,U组及D组成石率降低(44.44%,χ2=7.54,P=0.011;30.00%,χ2=10.77,P=0.003)。经红外光谱分析检测后在2939、1 446、1 382、1 056cm-1处可见胆固醇特有吸收峰。5组小鼠Abcb11和Abcc2转运蛋白总体比较差异有统计学意义(F=41.89;P<0.01;F=90.01,P<0.01)。与N组比较,M组Abcb11和Abcc2表达降低(P<0.01);与M组比较,U、Y、D组转运蛋白Abcb11和Abcc2表达均升高(P<0.01)。与其他组比较,模型组小鼠胆汁内源性代谢物丙氨酸、柠檬酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、胆固醇、LDL、甘油、苹果酸及丙酮浓度升高,乳酸、谷氨酰、胺甘氨酸、胆碱及牛磺酸浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论大黄灵仙胶囊具有稳定肝胆管侧膜细胞转运蛋白表达、改变或改善病理性胆汁的分泌及其代谢物的作用,从而达到防治胆结石的目的。