三线镰刀菌M-20液体培养的产毒性

研究了三线镰刀菌M-20液体培养的产毒性。该菌株接种于PSC、GMG和SPM 3种液体培养基,放置在19℃和8℃下静止培养24d后,比较菌丝生长特性、抑制豌豆种子萌发和高效液相色谱鉴定产毒性。结果表明,以葡萄糖、黄豆粉和玉米浆为碳、氮源的GMG培养基中菌丝生长最好,生物毒性强,能检出T-2毒素。M-20菌株具有低温产毒的特性。

三线镰刀菌M-20液体培养产毒的初步研究

本文研究了三线镰刀菌M-20液体培养的产毒性。该菌株分别接种于PSC、GMG和SPM液体培养基以及碎玉米培养基内,培养物用豌豆发芽抑制法测定毒性和高效液相测定T-2毒素,结果表明,M-20菌株在GMG液体培养基于8和19℃下培养21天,其产毒最为合适。

12种杀菌剂对三线镰刀菌的室内毒力测定

采用菌丝生长速率法,选择9种化学杀菌剂,3种生物药剂进行毒力测定。化学杀菌剂毒力由强到弱依次为吡唑醚菌脂、溴菌腈、氟硅唑、菌核净、腐霉利、异菌脲、嘧霉胺、噻呋酰胺和啶酰菌胺,EC50值分别为1.73、2.24、2.51、6.24、11.18、19.51、52.62、111.13和598.58 mg/L,生物杀菌剂毒力由强到弱依次为丁子香酚、中生菌素和多抗霉素,EC50值分别为2.33、4.91和674.39 mg/L。结果表明,三线镰刀菌对药剂敏感性差别很大,为增强杀菌剂效果、延长使用时间,应根据杀菌剂持效期及作用类型科学确定药剂间的合理轮用或混用。为防治三线镰刀菌导致茶叶病提供了科学指导。

东北红豆杉内生真菌Fusarium tricinctum J8的鉴定及抗菌活性研究

目的:从东北红豆杉内生真菌中筛选出一株对常见致病细菌具有广谱拮抗活性的菌株。方法:以大肠杆菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌4种常见致病细菌为指示菌,采用滤纸片扩散法筛选具有广谱抗菌活性的内生真菌,基于形态观察与系统发育分析对该菌株进行种属鉴定,利用高效液相色谱(HPLC)分析该菌株不同发酵时间次级代谢产物的代谢情况,通过超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS)分析该菌株可能产生的抗菌物质。结果:通过筛选获得一株广谱拮抗菌株J8,鉴定为三线镰刀菌(Fusarium tricinctum),根据HPLC色谱图对比,确定最佳培养时间为8天,通过mzCloud数据库比对分析其质谱数据,发现该菌株产生环(脯氨酸-亮氨酸)二肽、环(脯氨酸-苏氨酸)二肽、恩镰孢菌素B1、曲酸4种匹配度大于90%的抗菌物质。结论:从东北红豆杉中获得了一株对4种常见致病细菌均具有抑菌活性的菌株Fusarium tricinctum J8,为开发新型抗生素候选药物提供了菌种资源。

产苦马豆素真菌的筛选与鉴定

为探明青海及内蒙古多种疯草类植物及其根际土壤中是否存在产生苦马豆素的真菌,并对其种属进行鉴定,同时测定其苦马豆素产率。本试验拟对采自内蒙古和青海的疯草样品中的内生真菌及根际土壤真菌进行分离;应用薄层色谱和气相色谱法分别检测菌丝及发酵液中苦马豆素含量,筛选可产生苦马豆素的真菌;运用形态学和分子生物学方法对其属种进行鉴定。从青海采集的疯草样品中分离并筛选出2株可产苦马豆素真菌,一株为土壤真菌,一株为内生真菌,分别命名为FS-5和EFG-7;菌丝中苦马豆素含量分别为0.773和0.11 mg.g-1,结合形态学和分子生物学试验结果,确定这2株真菌分别为裂褶菌属真菌和镰孢菌(霉)属三线镰刀菌。结果显示,我国青海疯草及根际土壤中存在可产生苦马豆素的真菌。

苜蓿根腐病病原菌的分离鉴定及苜蓿品种的抗性评价

苜蓿根腐病病原菌较为复杂,因此明确不同生态环境下苜蓿根腐病病原菌的种类和优势菌株,对于苜蓿根腐病的防治非常重要。利用柯赫氏法则对采自内蒙古三个不同地点苜蓿田中疑似根腐病的病样进行了分离和鉴定。结果表明,从供试病样中共分离得到6个不同种的镰刀菌:木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、锐顶镰刀菌(F.acuminatum)、产黄色镰孢菌(F.thapsinum)、变红镰刀菌(F.incarnatum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和三线镰刀菌(F.tricinctum)。其中,木贼镰刀菌是上述三个供试地点苜蓿根腐病的优势致病菌。在室内条件下,利用优势菌株木贼镰刀菌以及三线镰刀菌对32个苜蓿品种的抗根腐病水平进行了评价,结果表明供试的品种间对根腐病的抗性水平呈现出一定的差异,其中品种康赛对两种不同的镰刀菌种表现出最高的抗性水平,其病情指数分别为26.07和26.81;按照抗性水平的划分标准,32份供试材料中对三线镰刀菌呈现中抗水平的品种18份,占供试品种的56.25%;表现为中感水平的品种14份,占43.75%,未见高感品种。对木贼镰刀菌而言,呈现中抗水平的苜蓿品种9份,占28.13%;呈现中感品种14份,占43.74%;呈现高感水平的苜蓿品种9份,占28.13%。本研究中未发现针对上述两种根腐病病原菌呈现免疫和高抗水平的苜蓿品种。

5种杀菌剂对马铃薯干腐病菌的室内毒力测定

为筛选出防控马铃薯干腐病高效低毒的化学药剂,采用菌丝生长速率法,选用50%硫磺·多菌灵(WP)、60%唑醚·代森联(WG)、60 g/L戊唑醇(SC)、80%多菌灵(WP)和80%代森锰锌(WP)对马铃薯干腐病菌三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)进行抑菌率和室内毒力测定,探究不同种类干腐病菌对不同杀菌剂的敏感性。结果表明:5种药剂对3种病原菌表现出不同程度的抑制作用,60 g/L戊唑醇和60%唑醚·代森联对三线镰刀菌毒力最强,EC 50分别为5.01、7.24 mg/L;60 g/L戊唑醇和50%硫磺·多菌灵对尖孢镰刀菌毒力最强,EC 50分别为5.75、50.11 mg/L;60 g/L戊唑醇和50%硫磺·多菌灵对木贼镰刀菌毒力最强,EC 50分别为2.40、28.84 mg/L。综上所述,60 g/L戊唑醇的毒力较强,且在稀释500~1000倍时对3种病原菌的抑制率也较高,表现出较强的抑制作用。

乌腺金丝桃内生真菌分离鉴定及其醇溶物的抑菌活性

以多年生乌腺金丝桃为材料,分析其内生真菌的种类,并分析乌腺金丝桃醇溶物的抑菌效果;利用形态学与分子鉴定相结合的方式确定其所属种类,抑菌试验采用滤纸片法,观察其抑菌圈的大小。结果表明,采自乌腺金丝桃的1株内生真菌,初步鉴定其为镰刀菌属,通过分子鉴定其为三线镰刀菌。表明,乌腺金丝桃含有丰富的内生真菌,是开发天然药物的潜在资源。

川贝母内生真菌Fusarium tricinctum CBY11抗氧化活性及代谢成分研究

结合形态特征和分子生物学方法,将一株分离自川贝母鳞茎的内生真菌CBY11鉴定为Fusarium tricinctum。分别研究其发酵液石油醚提取物(PEE)、乙酸乙酯提取物(EAE)、正丁醇提取物(BAE)和乙醇提取物(ETE)的DPPH自由基清除活性、总抗氧化活性(以ABTS法测定)和总还原力(FRAP法测定),以及其总多酚含量(TPC)、总黄酮含量(TFC)和总皂苷(TSC)含量。结果发现EAE、BAE和ETE均具有较强的DPPH自由基清除活性(IC50分别为1.95mg/m L、1.19mg/m L、1.64mg/m L)和总抗氧化活性(IC50分别为0.43mg/m L、0.58mg/m L、0.43mg/m L),但总还原能力相对较弱;PEE的抗氧化活性整体较低。此外,EAE、BAE和ETE的TPC、TFC及TSC显著高于PEE(P<0.05)。可见TPC、TFC及TSC与抗氧化活性呈现出一定的正相关性。HPLC分析表明EAE含有多种具有较强抗氧化活性的酚酸等物质,如芹菜素。GC/MS分析表明PEE中含有少量抗氧化酚类物质,最主要成分是烷烯烃类。本研究表明川贝母内生真菌CBY11具有产生丰富抗氧化活性成分的能力,具有多种利用价值。

T-2毒素提取分离方法的改进

本文报道从三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)M-20大米培养物中提取分离T-2毒素的新方法.用70%乙醇渗漉得到粗毒素,经一次硅胶柱层析分离纯化,用苯:石油醚结晶和丙酮:正己烷重结晶,即可得到白色针状结晶.根据熔点、红外、质谱(FD-MS,EI-MS)H核磁共振谱及高效薄层等分析,确证此结晶为T-2毒素.气相色谱分析纯度为98.34～99.59%.本方法操作简便,经济实用.