E3泛素连接酶三结构域蛋白59对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨三结构域蛋白59(TRIM59)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法将非小细胞肺癌细胞系A549分为siControl组、siTRIM59组、Flag-Vector组和Flag-TRIM59组,用CCK-8实验检测细胞增殖活力;用TUNEL染色实验检测细胞凋亡率;用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;用蛋白质免疫印记实验检测AKT表达水平和磷酸化水平。结果与siControl组相比,siTRIM59组细胞增殖活力下降(P<0.05),凋亡比例升高(P<0.05),细胞迁移率降低(P<0.05),侵袭到Transwell下层小室的细胞数减少(P<0.05),AKT磷酸化水平下降。与Flag-Vector组相比,Flag-TRIM59组细胞增殖活力增强(P<0.05),凋亡比例降低(P<0.05),细胞迁移率升高(P<0.05),侵袭到Transwell下层小室的细胞数增加(P<0.05),AKT磷酸化水平上升。结论TRIM59促进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,以及AKT的磷酸化。

下调三结构域蛋白59(TRIM59)阻断NF-κB信号通路抑制人鼻咽癌细胞的侵袭和迁移

目的探讨三结构域蛋白59(TRIM59)能否通过调控核因子κB(NF-κB)信号通路影响鼻咽癌细胞生物学行为。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库预测TRIM59在鼻咽癌和癌旁组织的表达情况;反转录PCR和Western blot法分别检测鼻咽癌和癌旁组织中TRIM59 mRNA和蛋白相对表达量;以人正常鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)为对照,采用反转录PCR和Western blot法分别检测HNE1和CNE-2Z鼻咽癌细胞TRIM59 mRNA和蛋白相对表达量;采用小干涉RNA技术下调HNE1细胞TRIM59水平,设置对照组、小干涉RNA阴性对照(si-NC)组、TRIM59小干涉RNA(si-TRIM59)组。噻唑蓝(MTT)法检测各转染组细胞增殖抑制率,TranswellTM小室检测各转染组细胞侵袭和迁移能力,Western blot法检测NF-κB、磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)、波形蛋白(vimentin)、存活蛋白(survivin)的蛋白表达,ELISA法检测培养细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果TRIM59在鼻咽癌组织表达异常增高;与HNEpC细胞相比,TRIM59在HNE1相对表达量显著增加;下调HNE1细胞中TRIM59表达后,显著抑制细胞存活以及细胞的侵袭和迁移;下调TRIM59表达后,HNE1细胞NF-κB、vimentin、survivin mRNA以及p-NF-κB、vimentin、survivin蛋白表达均受到抑制,IL-6、IL-8、TNF-α含量显著降低。结论下调TRIM59能够抑制HNE1细胞NF-κB信号通路和肿瘤炎症相关因子进而抑制细胞侵袭和迁移。

非小细胞肺癌患者癌组织异常纺锤体样小头畸形相关蛋白和三结构域蛋白59表达及意义

目的观察非小细胞肺癌患者癌组织异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(abnormal spindle-like microcephaly-associated protein,ASPM)、三结构域蛋白59(tripartite motif-59,TRIM59)表达变化,探讨其与非小细胞肺癌患者预后的关系。方法79例非小细胞肺癌患者均行手术治疗。取手术切除癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测ASPM、TRIM59阳性表达率;Spearman相关法分析癌组织ASPM与TRIM59表达的相关性;比较不同年龄、性别、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移非小细胞肺癌患者癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率;绘制ROC曲线,评估癌组织ASPM、TRIM59阳性表达诊断非小细胞肺癌的价值;随访24~36个月,Kaplan-Meier法分析癌组织ASPM、TRIM59表达与非小细胞肺癌患者预后的关系。结果癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率(56.96%、73.42%)均高于癌旁组织(24.05%、29.11%)(P<0.05)。癌组织ASPM与TRIM59表达呈正相关(r=0.672,P=0.002)。癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率在临床分期Ⅲ~Ⅳ期(73.81%、85.71%)、低分化(70.59%、84.31%)、有淋巴结转移者(75.76%、87.88%)分别高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期(37.84%、59.46%)、高分化(32.14%、53.57%)、无淋巴结转移者(43.48%、63.04%)(P<0.05);不同年龄、性别、病理类型者癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。癌组织ASPM、TRIM59阳性表达诊断非小细胞肺癌的AUC分别为0.812(95%CI:0.781~0.855,P<0.001)、0.803(95%CI:0.763~0.839,P<0.001),灵敏度分别为78.48%、75.95%,特异度分别为74.68%、72.15%,准确率分别为76.58%、74.05%;二者联合诊断非小细胞肺癌的AUC为0.875,灵敏度为82.28%,特异度为77.22%,准确率为79.75%。79例患者随访期间死亡18例,癌组织ASPM、TRIM59阳性表达者中位生存期(18.98、17.51个月)均短于阴性表达者(22.58、20.29个月)(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者癌组织ASPM、TRIM59表达上调提示临床分期晚、分化程度低、有淋巴结转移、预后差,二者联合诊断非小细胞肺癌有较高价值。

TRIM59,EIF5A2在非小细胞肺癌组织中的表达及对转移分化的预估价值

目的探讨三结构域蛋白59(TRIM59)、真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)在非小细胞肺癌组织中的表达及对转移分化的预估价值。方法选取非小细胞肺癌组织80例、正常肺组织80例,qRT-PCR法、免疫组化法检测2种组织中TRIM59、EIF5A2 mRNA与蛋白表达情况。收集肺癌患者临床资料,根据其是否出现转移分化进行分组:转移分化组、未转移分化组,分析其出现转移分化的影响因素。绘制ROC曲线分析TRIM59、EIF5A2表达对肺癌患者转移分化的预估价值。结果NSCLC组织中TRIM59、EIF5A2 mRNA表达水平高于正常组织,TRIM59、EIF5A2蛋白高表达率高于正常组织(P<0.05)。转移分化组与未转移分化组患者之间的TRIM59、EIF5A2蛋白表达情况、肿瘤分化程度差异有统计学意义(P<0.05),TRIM59、EIF5A2蛋白高表达和肿瘤低分化为NSCLC肿瘤转移分化的危险因素。NSCLC组织中TRIM59联合EIF5A2蛋白表达水平预估肿瘤转移分化的AUC以及特异度均明显高于单独检测。结论TRIM59、EIF5A2在非小细胞肺癌组织中的表达水平异常升高,是非小细胞肺癌转移分化的影响因素之一,且对其转移分化有一定预估价值。

TRIM59、Twist及E-cadherin在肝癌中的表达及临床意义

目的:观察肝癌组织中三结构域蛋白59(TRIM59)、Twist和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达变化,并探讨其临床肿瘤学意义。方法:应用免疫组织化学方法检测80例肝癌组织及癌旁肝组织中TRIM59、Twist及E-cadherin的表达状况,分析其与临床病理参数的关系。结果:肝癌组织及癌旁肝组织中TRIM59的阳性率分别为76.3%,8.0%,差异具有统计学意义(P<0.05);肝癌组织及癌旁肝组织中Twist的阳性率分别为66.3%,6.0%,差异具有统计学意义(P<0.05);肝癌组织及癌旁肝组织中E-cadherin的阳性率分别为27.5%,90.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。TRIM59、Twist及E-cadherin阳性表达均与肝癌病理学分级、分化、血管侵袭及TNM分期有关(P<0.05)。相关性分析表明,TRIM59与Twist表达呈正相关(P<0.05),TRIM59和E-cadherin表达呈负相关(P<0.05),Twist和E-cadherin表达也呈负相关(P<0.05)。生存分析结果表明,TRIM59是肝癌预后的独立因素。结论:联合检测TRIM59、Twist及E-cadherin有助于阐述肝癌发生发展、侵袭转移的分子机制,TRIM59有可能成为治疗肝癌的一个靶基因。

TRIM59、Akt及MMP-9在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 :探讨三结构域蛋白59(TRIM59)、蛋白激酶B(Akt)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肝细胞肝癌中的表达相关性及预后评价。方法:应用免疫组织化学方法回顾性分析TRIM59、Akt及MMP-9蛋白在98例肝癌组织中的表达状况,并分析各指标与临床病理参数之间的关系,应用Spearman等级检验分析TRIM59与Akt、MMP-9的相关性。结果:肝癌组织中TRIM59、Akt及MMP-9蛋白阳性表达率分别是73.5%、65.3%、61.2%,均明显高于癌旁肝组织(P<0.05)。研究发现TRIM59、Akt及MMP-9蛋白表达与病理分级、包膜完整、肿瘤分化、血管侵犯和TNM分期明显相关(P均<0.05)。肝癌组织中TRIM59与Akt、MMP-9表达均呈正相关(P<0.05),Akt和MMP-9表达也呈正相关(P<0.05)。生存分析表明,TRIM59可作为肝癌预后的一个独立性因素。结论:TRIM59、Akt和MMP-9在肝癌组织中明显高表达。TRIM59过表达与肝癌恶性进展和患者预后密切相关,提示TRIM59是肝癌患者的潜在治疗靶点。

肝细胞癌组织中TRIM59、Akt及N-cadherin表达及其临床意义

目的探讨三结构域蛋白(TRIM)59、蛋白激酶B(p-Akt)与N-钙黏蛋白(N-cadherin)在肝细胞癌(HCC)中的表达情况及临床意义。方法选取98例HCC和60例癌旁组织中TRIM59、p-Akt和N-cadherin蛋白表达,并分析三指标与临床病理参数间关系。结果HCC中TRIM59、p-Akt和N-cadherin阳性表达率(73.5%、65.3%、57.1%)均明显高于癌旁肝组织(11.7%、13.3%、16.7%),差异均有统计学意义(P<0.05)。TRIM59、p-Akt和N-cadherin表达与血管侵袭、肿瘤的分化程度、病理学分级和TNM分期有关(P<0.05)。Spearman等级结果表明,HCC中TRIM59和p-Akt蛋白表达呈正相关(P<0.05);HCC中TRIM59和N-cadherin蛋白呈正相关(P<0.05),p-Akt和N-cadherin蛋白也呈正相关(P<0.05)。生存分析显示,TRIM59高表达是HCC一个不良预后因子。结论HCC组织中TRIM59、p-Akt和N-cadherin异常表达与肿瘤侵袭转移明显有关,TRIM59有可能成为HCC预后的一个新分子标志物。

沉默TRIM59对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡、侵袭与迁移能力的影响

目的探究沉默三结构域蛋白59(TRIM59)对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡、侵袭与迁移能力的影响。方法构建shRNA TRIM59载体转染至SiHa细胞,将细胞随机分为3组:Control组、shRNA-NC组和TRIM59-shRNA2组。克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭;划痕愈合实验检测细胞迁移;Western blot检测Ki67、PCNA、c-Myc、Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果与Control组比较,TRIM59-shRNA2组细胞克隆形成率降低,Ki67、PCNA蛋白表达水平降低,细胞凋亡率升高,c-Myc蛋白表达水平降低,cleaved Caspase-3/Caspase-3、Bax/Bcl-2比值升高,侵袭细胞数降低,划痕愈合率降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论沉默TRIM59抑制宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭和迁移,并诱导其凋亡。

TRIM59在结直肠癌中的表达及其与临床病理指标的关系

目的:探讨三结构域蛋白59(TRIM59)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集86例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织,分别采用实时荧光定量PCR(q PCR)和免疫组化检测TRIM59 m RNA和蛋白在结直肠癌及癌旁组织中的表达情况;分析其与患者临床病理指标和生存率的关系。结果:结直肠癌组织中TRIM59 m RNA表达水平较配对的癌旁组织升高(t=12.86,P<0.01)。结直肠癌组织中TRIM59蛋白阳性表达率为62.79%(54/86),高于癌旁组织的32%(37/86),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.74,P=0.009)。TRIM59蛋白高表达与患者TNM分期(χ^(2)=8.515,P=0.003)、肿瘤浸润深度(χ^(2)=7.167,P=0.007)以及淋巴结转移情况(χ^(2)=5.511,P=0.018)相关。Kaplan-Meier生存分析结果显示TRIM59高表达患者总生存率(OS)和无病生存期(DFS)均明显短于TRIM59低表达患者(均为P<0.05)。结论:结直肠癌组织中TRIM59呈高表达,且与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及患者预后相关。

鼻咽癌组织中TRIM59、PPM1B的表达及临床意义

目的研究鼻咽癌(NPC)组织中三结构域蛋白59(TRIM59)、蛋白磷酸酶1B(PPM1B)的表达及临床意义。方法收集2014年2月至2018年2月四川省遂宁市中心医院诊治的97例NPC患者,免疫组织化学染色法检测癌组织和癌旁组织中TRIM59、PPM1B的表达;分析两者的关系及与临床特征的关系。Kaplan-Meier生存曲线分析TRIM59、PPM1B对NPC患者预后的影响。结果与癌旁组织比较,癌组织中TRIM59阳性表达率较高(P<0.05),而PPM1B阳性表达率较低(P<0.05)。TRIM59与PPM1B表达呈负相关(r=-0.524,P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移的NPC患者TRIM59阳性表达率、PPM1B阴性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的NPC患者(P<0.05)。TRIM59阳性表达者3年生存率低于TRIM59阴性表达者(P<0.05);PPM1B阳性表达者3年生存率高于PPM1B阳性表达者(P<0.05)。结论NPC中TRIM59表达上调,而PPM1B表达下调,两者表达与肿瘤TNM分期及淋巴结转移有关,在鼻咽癌预后评估上有一定临床意义。

E3泛素连接酶TRIM59 在肺癌肿瘤相关巨噬细胞中的表达及临床意义

目的:探讨E3泛素连接酶TRIM59在肺癌肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中的表达水平与临床病理参数的关系以及对患者预后的影响。方法:采用多重荧光免疫组化技术(mIHC)检测E3泛素连接酶TRIM59在肺癌TAMs中的表达水平。根据E3泛素连接酶TRIM59在肺癌TAMs中的表达水平及平均荧光强度(MFIs)评分,统计分析E3泛素连接酶TRIM59的表达与临床病理参数(如肿瘤大小、肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期)及患者预后的关系。体外通过上调或下调巨噬细胞(THP-1源性巨噬细胞)中TRIM59的表达水平来进一步验证TAMs中TRIM59的表达水平对肺癌细胞功能的影响。结果:mIHC结果显示,与癌旁组织中的巨噬细胞相比,TAMs中E3泛素连接酶TRIM59的表达水平显著上调,并且TAMs中E3泛素连接酶TRIM59高表达与淋巴结转移、肿瘤分期、远处器官转移有关(P<0.05)。生存分析显示,TAMs中E3泛素连接酶TRIM59表达水平升高,则患者的预后结果较差(P<0.001)。Transwell实验和细胞克隆形成实验表明,巨噬细胞过表达TRIM59促进了肿瘤细胞的侵袭和增殖(P<0.01),与此相反,抑制巨噬细胞TRIM59的表达,则遏制肿瘤细胞的侵袭和增殖(P<0.01)。结论:E3泛素连接酶TRIM59在肺癌TAMs中的表达水平升高,其表达水平与临床病理参数有关。TAMs中TRIM59的表达水平升高则患者的预后较差。TAMs中TRIM59的表达水平升高促进了肿瘤细胞的侵袭和增殖能力。

宫颈癌组织中TRIM59、CCNE1的表达及其与预后的关系

目的探究三结构域蛋白59(TRIM59)、细胞周期蛋白E1(CCNE1)在宫颈癌组织中的表达及二者与宫颈癌患者预后的关系。方法选择2015年1月至2017年1月在大连市妇女儿童医疗中心接受治疗的宫颈癌患者120例,术中取其癌组织和癌旁组织分别作为观察组和对照组。采用免疫组织化学法测定TRIM59、CCNE1表达。采用Kaplan-Meier法分析TRIM59、CCNE1表达与患者预后的关系;采用多因素COX回归分析影响宫颈癌患者预后的危险因素。结果观察组TRIM59、CCNE1阳性表达率比对照组升高(P<0.05)。宫颈癌患者TRIM59、CCNE1表达与患者年龄、肿瘤直径、病理类型无关(P>0.05),与患者TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,宫颈癌患者TRIM59阳性表达组生存率低于阴性表达组(χ^(2)=4.901,P=0.027);CCNE1阳性表达组生存率低于阴性表达组(χ^(2)=5.583,P=0.018)。TRIM59阳性表达、CCNE1阳性表达、淋巴结转移、低度分化、TNM分期(Ⅱa)是影响宫颈癌患者发生不良预后的危险因素(P<0.05)。结论宫颈癌患者癌组织中TRIM59、CCNE1表达异常升高,二者均为宫颈癌患者发生不良预后的危险因素。

TRIM59、Twist和波形蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨三结构域蛋白59(TRIM59)、Twist基因和波形蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化检测TRIM59、Twist及波形蛋白在80例肝癌组织及50例癌旁组织中的表达情况,分析其与临床病理特征和生存率的关系。结果肝癌组织中TRIM59阳性表达率为76.3%(61/80),高于癌旁组织的8.0%(4/50)(P<0.05)。肝癌组织中Twist阳性表达率为66.3%(53/80),高于癌旁肝组织的6.0%(3/50)(P<0.05)。肝癌组织中波形蛋白阳性表达率为63.8%(51/80),高于癌旁组织的12.0%(6/50)(P<0.05)。TRIM59、Twist和波形蛋白的表达与病理分级、分化程度、血管侵犯及TNM分期密切相关(P<0.05)。TRIM59的表达与Twist和波形蛋白呈正相关(r_s=0.418和0.395,P<0.05),Twist的表达与波形蛋白呈正相关(r_s=0.512,P<0.05)。TRIM59阳性表达和TRIM59阴性表达患者3年生存率分别为42%和78%,5年生存率分别为38%和61%;TRIM59阳性表达患者的累计生存率低于TRIM59阴性表达患者(P<0.05)。结论肝癌组织中TRIM59、Twist及波形蛋白呈现高表达,与肿瘤的侵袭、转移及患者预后密切相关。

miR-655-3p调控TRIM59对神经胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

目的探究微小RNA(miR)-655-3p调控三结构域蛋白59(TRIM59)对神经胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法分别采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测神经胶质瘤组织和瘤旁组织中miR-655-3p水平和过表达miR-655-3p,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测U251细胞增殖情况、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell检测细胞迁移和侵袭、双荧光素酶实验检测miR-655-3p对TRIM59的影响。检测过表达TRIM59和miR-655-3p对U251细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。细胞分组:(1)miR-NC组;(2)miR-655-3p组;(3)anti-miR-NC组;(4)anti-miR-655-3p组;(5)miR-655-3p+pcDNA3.1组;(6)miR-655-3p+pcDNA3.1-TRIM59组。anti-miR-NC组和anti-miR-655-3p组验证miR-655-3p对TRIM59的调控作用。结果与神经胶质瘤瘤旁组织比较,神经胶质瘤miR-655-3p表达水平显著降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-655-3p组miR-655-3p水平显著升高,吸光度(A)值、细胞迁移和侵袭数显著降低、细胞凋亡率显著升高(P<0.05);双荧光素酶和Western blot实验证实miR-655-3p可与TRIM59结合负向调控TRIM59水平;与miR-655-3p+pcDNA3.1组比较,miR-655-3p+pcDNA3.1-TRIM59组A值、迁移和侵袭细胞数显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论 miR-655-3p通过靶向TRIM59抑制神经胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。