三维细胞培养条件下膀胱肿瘤细胞能量代谢的初步探讨

目的研究膀胱肿瘤细胞能量代谢的变化。方法应用微流控芯片三维立体培养技术建立成纤维细胞及膀胱肿瘤细胞共培养体系,通过免疫荧光染色方法观察线粒体代谢情况。结果实验组膀胱肿瘤细胞线粒体代谢较对照组活跃,对照组成纤维细胞线粒体代谢较实验组活跃。结论膀胱肿瘤细胞的能量代谢并不完全是"瓦伯格"效应所认为的"即便在氧供充足的条件下肿瘤仍以糖酵解的方式功能",膀胱肿瘤能量代谢也有高效氧化磷酸化的过程,同时也有肿瘤相关细胞有着密切联系,现在有假说认为肿瘤能量代谢是通过诱导毗邻的间质细胞进行糖酵解,引起再循环营养素生成增多。这些高能的代谢产物通过定向转运转移到毗邻的肿瘤细胞并进入三羧酸循环,致使氧化磷酸化增加和足量的ATP生成,从而构成代谢耦联。我们仍需要大量的实验进一步验证并得出更为正确的结论。

两种体外培养条件下肺腺癌A549细胞生物学特性的变化

目的 比较体外肺腺癌A5 4 9细胞在平面及立体培养条件下细胞周期、细胞凋亡及对化疗药物敏感性的变化。方法 采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法 ,进行肺腺癌A5 4 9细胞体外立体培养 ,并通过流式细胞技术、原位细胞凋亡检测试剂盒、四唑盐 (MTT)比色法及血球计数器计数法比较两种培养条件下肺腺癌A5 4 9细胞在细胞周期、细胞凋亡及对阿霉素 (ADM)敏感性方面的差异。结果 通过倒置显微镜、电镜观察及照相 ,确定了体外三维立体培养模型的建立 ;同平面培养比较 ,立体培养细胞存在细胞周期中G1期阻滞现象、细胞凋亡率低 ,对阿霉素的敏感性低的特征。结论 腺癌A5 4 9细胞在两种体外培养条件下生物学特性存在明显差异 ,三维立体细胞培养模型更接近实体瘤的体内实际情况。

磷脂酰肌醇3激酶信号通路影响细胞凋亡在肺腺癌A549细胞群集耐药中的作用

目的 探讨PI3K信号通路在肿瘤群集耐药中的作用。方法 采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法 ,进行肺腺癌A5 49细胞体外立体培养 ,通过Westernblot、原位细胞凋亡检测、四唑盐 (MTT)比色法及血球计数器计数法检测Akt、Bcl 2、Bad的表达、细胞凋亡率及对阿霉素 (ADM )敏感性。结果 ①立体培养细胞存在Akt的高表达 ;②同平面培养比较 ,立体培养细胞存在Bcl 2高表达 ,Bad低表达 ,细胞凋亡率低 ,对ADM敏感性低的特征 ,阻断PI3K信号通路后 ,两者差异明显缩小。结论 PI3K信号通路可通过抑制细胞凋亡在肺腺癌A5 49细胞群集耐药中发挥作用 。