三联体基序包含蛋白28在胃癌组织中的表达及其对胃癌HGC-27细胞侵袭、迁移、增殖和硼替佐米诱导的细胞凋亡的影响

目的:探讨三联体基序包含蛋白28(TRIM28)在胃癌组织中的表达及其对胃癌HGC-27细胞侵袭、迁移、增殖和硼替佐米(BTZ)诱导的细胞凋亡的影响。方法:收集10例胃癌患者的癌组织和癌旁组织,采用免疫组化和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测TRIM28阳性率及mRNA的表达水平。采用RNA干扰技术敲低人胃癌细胞株HGC-27中的TRIM28表达,采用Transwell和划痕愈合实验探究敲低TRIM28表达对胃癌细胞的侵袭、迁移能力的影响,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞的凋亡情况。结果:胃癌组织中TRIM28阳性率及其mRNA表达水平高于癌旁组织(均P<0.05)。敲低TRIM28表达可抑制胃癌细胞的侵袭和迁移能力。敲低TRIM28表达显著抑制了胃癌细胞的增殖能力,并显著增强了BTZ诱导的细胞凋亡。结论:TRIM28在胃癌组织过表达,且与胃癌HGC-27细胞的侵袭、迁移、增殖和凋亡有关,同时影响BTZ的抗肿瘤作用。

升格与复归:符号三联体在演示叙述中的表意路径

身体与日常物(实在物、虚拟物)是形成演示叙述的主要媒介,在进入演示框架之后,二者的意义会发生改变,呈现出符号三联体的滑动态势:进入演示框架的日常物,会跃出其原本携带的使用功能,或回到澄明的物质本源,呈现出日常物向实用符号、艺术符号滑动的升格趋势;进入演示框架中的身体,会转化为某种器-物或姿态物,体现出身体向物性的复归。符号三联体的横向滑动影响着身体和日常物的升格与复归,共同构成演示叙述的两条纵向表意路径,更清晰地勾勒出演示叙述的三类演示性质:以人为主导的演示形态(包含物被拟人化的情况),融合人、物的演示形态(包含表演者成为器-物、人+装置等情况),以物为主导的演示形态(包含纯物表演、身体被数字化的情况)。

组氨酸三联体核苷酸结合蛋白2通过调控巨噬细胞焦亡抑制动脉粥样硬化

目的:探讨组氨酸三联体核苷酸结合蛋白2(HINT2)对动脉粥样硬化(AS)的影响及其可能机制。方法:分离胸痛患者的外周血单个核细胞(PBMCs)并诱导分化为巨噬细胞,检测细胞中HINT2的表达水平。体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,检测细胞上清液炎症因子的水平及细胞死亡情况。建立载脂蛋白E基因敲除(apoE^(−/−))小鼠AS模型,检测小鼠主动脉根部斑块形成及巨噬细胞的脂质代谢和泡沫化程度。RT-qPCR和Western blot法检测RAW264.7细胞和apoE^(−/−)小鼠主动脉内焦亡相关因子的表达水平。结果:急性冠脉综合征患者PBMCs源性巨噬细胞中HINT2的表达水平显著降低,且与血清中促炎因子水平呈负相关,与抗炎因子水平呈正相关,提示HINT2可能抑制AS的炎症反应。体外实验结果表明,过表达HINT2基因能够抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激下巨噬细胞的脂质积累和泡沫化,降低细胞上清中白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-18和肿瘤坏死因子α等炎症因子的分泌,减少细胞死亡和焦亡相关因子的mRNA及蛋白表达。动物实验结果表明,过表达HINT2基因能够减轻apoE^(−/−)小鼠主动脉根部的斑块负荷,降低巨噬细胞的泡沫化程度,抑制焦亡相关因子核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1β和IL-18的mRNA及蛋白表达。结论:HINT2可以抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡,减轻AS过程中的炎症反应,减缓AS的发生与发展。

脆性组氨酸三联体基因甲基化与前列腺癌的相关性及临床意义

目的:检测前列腺癌患者血清中脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad,FHIT)甲基化状态,探讨FHIT甲基化与前列腺癌患者临床病理特征及5年生化复发和临床进展之间的关系。方法:采用MSP法检测78例前列腺癌和45例前列腺增生患者血清中FHIT甲基化表达状态,分析FHIT甲基化率与前列腺癌患者临床病理的关系,采用Kaplan-Meier生存分析FHIT甲基化率与前列腺癌5年生化复发和5年临床进展之间的关系。结果:前列腺癌患者血清中FHIT基因甲基化率为48.72%,高于前列腺增生患者的4.44%,差异有显著意义(PP<0.05)。FHIT甲基化与前列腺癌患者年龄、术前前列腺特异抗原(PSA)、TNM分期、Gleason分级有关;在前列腺癌Gleason分级≤7和Gleason 8~10分级中,FHIT甲基化率分别为59.18%和31.03%,在Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期前列腺癌患者中,FHIT甲基化率分别为37.50%和66.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。甲基化组5年复发率和5年累计临床进展率高于非甲基化组(P<0.05)。结论:FHIT甲基化与前列腺癌临床病理有关,检测FHIT甲基化状态有助于评估前列腺癌患者的临床预后。

头颈部鳞状细胞癌组织中脆性组氨酸三联体基因的表达

目的 :研究头颈部鳞状细胞癌组织 (HNSCC)中脆性组氨酸三联体 (FHIT)基因的表达及其与淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组化SP法 ,检测 80例HNSCC及 4 1例正常鳞状上皮标本中FHIT的表达。结果 :HN SCC及正常鳞状上皮组织中FHIT的阳性表达率分别为 5 3.75 % (4 3/80 ) ,10 0 % (4 1/41) ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。HNSCC中 ,有淋巴结转移组与无淋巴结转移组FHIT的阳性率分别为 37.1% (13/35 )和 6 6 .7% (30 /45 ) ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :HNSCC的发生、演进中FHIT起重要作用 。

三联体亲权指数的统一算法及其扩展应用

目的介绍一种在生母参与情形下,孩子与被鉴定人间常用亲缘关系指数的统一算法。方法以计算三联体亲权指数(paternity index in trios,PIT)的公式为基础,分析不同亲缘关系指数计算公式中的公因子,并以此公因子对不同情形下PIT计算公式进行统一描述,采用叔伯指数定律和亲缘系数(r)将上述PIT统一计算公式扩展至祖孙、半同胞、叔侄及第一代堂兄弟等不同情形下的亲缘关系指数的运算。结果以状态一致性等位基因的频率倒数加1为公因子,在引入亲缘系数(r)的情形下,获得了可计算在生母参与时,孩子与被鉴定人间任意亲缘关系指数的两个公式。结论在生母参与情形下,孩子与被鉴定人间亲缘关系指数的统一算法简化了运算过程,有利于编程实现批量计算。

喉声门型癌脆性组氨酸三联体基因蛋白表达与吸烟的关系

目的观察脆性组氨酸三联体基因(fragilehis tidinetriad,FHIT)蛋白在喉声门型癌组织细胞中定位及分布情况,比较其在吸烟组和非吸烟组癌组织中的表达差异以及吸烟量和FHIT表达的关系。方法运用免疫组织化学SP法检测66例喉声门型癌手术切除组织中FHIT蛋白的表达。结果FHIT蛋白在喉声门型癌组织中表达阳性率为33.3%(22/66),吸烟组FHIT蛋白表达阳性率为24.5%(12/49),比非吸烟组58.8%(10/17)低,差别有统计学意义(x2=6.70,P=0.01)。结论FHIT蛋白在喉声门型癌组织中的表达减弱或缺失是常发事件。喉声门型癌吸烟组FHIT蛋白表达减弱或缺失较非吸烟组高,吸烟组FHIT蛋白表达减弱或缺失与患者吸烟的年支数(每天吸烟量与吸烟年数的乘积)无明显相关关系(rs=-0.0499,P=0.7334)。

脆性组氨酸三联体与caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体(F HIT)与caspase一3在不同的卵巢组织中的表达及其临床意义。方法正常卵巢14例,均为子宫肌瘤行子宫全切加一侧卵巢切除术的卵巢组织;良性囊腺瘤15例;交界性囊腺瘤15例;上皮性卵巢癌38例,上皮性卵巢癌标本未经任何抗癌治疗。检测脆性组氨酸三联体与caspase-3。结果除FHIT在上皮性卵巢癌组织中的缺表达率分别显著高于正常卵巢、良性囊腺瘤和交界性囊腺瘤等三种卵巢组织外,在正常卵巢、良性囊腺瘤、交界性囊腺瘤卵巢组织中差异无显著性,在上皮性卵巢癌组织中的比较差异无显著性;caspase-3在正常卵巢、良性囊腺瘤、交界性囊腺瘤等三种卵巢组织中的表达率差异有显著性,在正常卵巢、良性囊腺瘤、交界性囊腺瘤卵巢组织中差异无显著性。结论病理分级越低和临床分期越高则FHIT的表达率越低,FHIT的表达与年龄和月经无关。提示FHIT的缺表达可能与卵巢癌细胞的恶性程度、侵袭力和转移能力,以及卵巢癌的发展及预后有关,可能成为卵巢癌的恶性程度和预后的预测性指标。caspase-3在未化疗的上皮性卵巢癌中的表达率显著低于正常卵巢、良性囊腺瘤和交界性囊腺瘤;caspase-3还与临床分期有关,临床分期越晚则表达率越低。

人类乳头瘤病毒与脆性组氨酸三联体基因蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的作用

目的探讨人类乳头瘤病毒(HPV)和脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的作用及其之间的关系。方法用免疫组化SP法检测SCC和癌旁组织皮损中HPV及FHIT蛋白的表达。结果HPV和FHIT蛋白在癌旁正常皮肤鳞状上皮组织、非典型增生组织、原位癌及浸润癌组织中的表达具有明显差异性(P<0.05);且FHIT蛋白在分化不同的肿瘤组织表达具有差异性(P<0.01);HPV和FHIT蛋白在肿瘤组织中的表达呈负相关。结论HPV和FHIT共同参与了SCC的发生,FHIT表达状况与SCC的分化程度有关。

肝细胞癌组织中脆性组氨酸三联体和Survivin蛋白的表达

目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)和Survivin蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测48例HCC组织、25例癌旁组织和15例正常肝组织中FHIT蛋白和Survivin蛋白的表达,并分析2者的表达与HCC临床病理特征的关系。结果:HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中FHIT的阳性表达率分别为45.8%、88.0%及93.3%,差异有统计学意义(P<0.05);FHIT蛋白的表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),与肿瘤大小、有无包膜、是否有门静脉癌栓、甲胎蛋白的含量、是否感染乙肝无关(P>0.05)。HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中Survivin的阳性表达率分别为72.9%,16.0%及20.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Survivin阳性表达率与HCC患者的肿瘤大小有关(P<0.05),与其他临床病理特征无关(P>0.05)。HCC组织中FHIT与Survivin的表达呈负相关(r=-0.341,P=0.018)。结论:FHIT的表达缺失和Survivin的过表达可能共同参与了HCC的发生和发展。

口腔癌及癌前病变中脆性组氨酸三联体基因的表达及其意义

目的检测抑癌基因脆性组氨酸三联体基因(FHIT)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)及癌前病变中的表达情况,并探讨其在口腔癌发生过程中的作用及其意义。方法采用SP免疫组化方法检测64例OSCC、39例口腔癌前病变、12例正常粘膜中FHIT蛋白情况的表达。结果正常粘膜的FHIT蛋白100%(12/12)高表达;癌前病变组中均为中度和高表达,与正常组相比无统计学差异;64例OSCC中,3例为阴性表达、8例低表达、43例中度和高度表达;OSCC中FHIT蛋白缺乏或减少的比率为17%(11/64),与正常组、癌前病变组相比有显著差异,而与OSCC的分化程度无关。结论FHIT在口腔鳞癌的发生过程中起着一定的作用。

非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体和PCNA的表达

目的:观察人非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。方法:应用免疫组织化学(SP法)检测80例非小细胞肺癌和40例肺良性病变组织中FHIT和PCNA的表达。结果:非小细胞肺癌组织中FHIT表达阳性率(57.5%)低于肺良性病变组织(90.0%)(P<0.01);腺癌组织中FHIT的表达阳性率高于鳞癌,且表达阳性率与鳞癌分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05);非小细胞肺癌组织中FHIT表达阳性率与患者是否有吸烟史有相关性(P<0.05);非小细胞肺癌组织中PCNA表达阳性率(60.0%)高于肺良性病变组织(10.0%)(P<0.01);FHIT表达阳性率与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05);非小细胞肺癌组织中FHIT和PCNA表达呈负相关(rs=-0.547,P<0.01)。结论:FHIT表达下调是肿瘤细胞增殖活跃的分子基础之一,FHIT与非小细胞肺癌的发生、发展关系密切。

分化型甲状腺癌组织中脆性组氨酸三联体基因外显子5、8纯合性缺失及突变检测

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因外显子5、8(E5、E8)纯合性缺失及突变情况。方法:分别采用外显子特异PCR及PCR-SSCP技术检测65例DTC组织及其相应非癌上皮(NCE)组织中FHIT基因E5、E8纯合性缺失及点突变。结果:甲状腺NCE组织中,E5、E8纯合性缺失率均为0;DTC中,E5纯合性缺失率为30.8%(20/65),且与患者淋巴结转移有关(P<0.05);E8纯合性缺失率为29.2%(19/65),且与患者TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。DTC组织中,FHIT基因E5、E8纯合性缺失的发生相关(χ2=23.212,P<0.01)。所有标本未检测到E5、E8点突变。结论:FHIT基因E5、E8纯合性缺失可作为检测DTC生物学行为的重要标志。点突变可能不是DTC组织中FHIT基因失活的主要机制。

喉鳞癌组织中脆性组氨酸三联体基因编码外显子纯合性缺失检测

目的:探讨喉鳞癌(LSCC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因编码外显子纯合性缺失及其临床意义。方法:分别采用外显子特异PCR技术及免疫组化SP法检测41例LSCC(肿瘤发生部位位于声门上15例,声门24例,声门下2例;TNM分期Ⅰ期10例,Ⅱ期13例,Ⅲ期15例,Ⅳ期3例;病理分级:高分化15例,中分化18例,低分化8例;淋巴结转移阳性15例,阴性26例)及其相对应的喉正常黏膜组织中FHIT基因全部编码外显子E5～E9纯合性缺失及增殖细胞核抗原(PCNA)表达,并分析其与临床病理特征及PCNA的关系。结果:41例喉正常黏膜组织中,E5～E9无1例发生纯合性缺失。LSCC组织中,E5～E9纯合性缺失率分别为26.8%(11/41)、14.6%(6/41)、9.8%(4/41)、29.3%(12/41)和7.3%(3/41)。FHIT基因编码外显子总纯合性缺失率为41.5%(17/41),且与患者TNM分期、淋巴结转移及复发有关(P<0.05)。FHIT基因编码外显子纯合性缺失与PCNA标记指数有明显的负相关关系(P<0.05)。结论:LSCC组织中FHIT基因编码外显子纯合性缺失可能为其基因失活的重要机制之一,可作为检测LSCC生物学行为的重要标志。

食管鳞癌组织中脆性组氨酸三联体蛋白的表达

目的:检测食管鳞癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学SP法检测39例正常食管黏膜组织、23例不典型增生组织及39例食管鳞癌组织中FHIT蛋白的表达。结果:癌旁不典型增生组织和食管鳞癌组织中FHIT蛋白的阳性表达率分别为52.17%和28.21%,均低于正常食管黏膜组织的89.74%(P均<0.01)。FHIT蛋白的表达与食管鳞癌的分化程度及淋巴结转移有关,而与浸润深度无关。结论:FHIT蛋白的缺失与食管鳞癌的发生密切相关。

三联体高压隔离开关自力型触指结构优化及成形模具设计

Cu-Cr合金的强度、刚度优于紫铜,是高压开关自力型触指零件优先选择的新型材料,目前仍有不少自力型触指结构沿用传统紫铜材料下的结构,没有发挥新型材料的优势。文章以三联体自力型触指为研究对象,以新型Cu-Cr合金材料性能参数为依据,采用有限元数值模拟进行结构分析和参数敏度分析,确定影响触指结构的关键参数为触指的厚度,继而对自力型触指的结构参数进行优化;根据优化后的零件结构设计了精密成形模具,生产出合格制件。经比较表明,优化后触指最大等效应力为315.37MPa,最大剪切应力为181.24MPa,最大变形为2.55mm,满足使用要求;优化后触指厚度由传统紫铜材料的5mm降低为3.43mm,较传统紫铜材料减重达30%。

三联体常染色体STR三带型基因座父权指数计算

目的探讨三联体亲子鉴定中常染色体STR三带型基因座父权指数的计算方法。方法通过9691例三联体亲子鉴定中发现的30例三带型,对其父-母-子表型作分析研究而将相关三带型分为五类,根据孟德尔遗传规律和常规三联体父权指数的计算原理,推算各类型的父权指数。结果循例推断出五种类型三联体常染色体STR三带型基因座父权指数的计算公式。结论对于三联体亲子鉴定中的三带型基因座,其父权指数可按推导的公式进行计算。

一个HLA-A抗原三联体家庭的分子遗传学研究

目的 研究江苏省骨髓库供者SZHD1及其 4名家庭成员的HLA A抗原HLA三联体表型的分子遗传学基础。方法 使用标准微量淋巴细胞毒试验和特异性单克隆抗体 ,测定淋巴细胞HLA血清学抗原特异性。使用PCR SSP方法作HLA基因分型 ,并进一步采用分子克隆和DNA序列方法分析测定相应的基因结构。结果 供者SZHD1的淋巴细胞带有HLA A2、A11.2和A2 4等 3个抗原。分子克隆和DNA序列分析表明相应等位基因为HLA A 0 2 0 6、A 110 2和A 2 4 0 2 0 10 1。家系调查表明该供者的 1条单体型为HLA A 2 4 0 2 0 10 1,A 110 2 ;B 38;DRB1 15。同一条单体型带有 2个表达的HLA A等位基因 ,该单体型按孟德尔定律分离 ,稳定地传递了 3代。供者的父亲、哥哥、妹妹、及其孩子也带有该单体型。结论 供者SZHD1及其 4名家庭成员的 1条HLA单体型上 ,带有 2个表达的HLA A等位基因 ,该单体型稳定地遗传 ,表现出HLA遗传多态性的一种新形式。HLA A座位表达 3种抗原的家庭为世界上首次报告。

人端粒酶反转录酶和脆性组氨酸三联体基因在口腔鳞癌中的表达及意义

端粒酶被认为是迄今为止最具有人体肿瘤特异性和敏感性的分子标志物,人端粒酶反转录酶（human telomerase reverse transcriptase,hTRT）是端粒酶活性的限速酶,只在端粒酶阳性的肿瘤细胞和永生化细胞中表达,与端粒酶活性平行相关[1]。脆性组氨酸三联体基因（fragile histidine triad,FHIT）是1996年发现的一种抑癌基因,

脆性组氨酸三联体与复制蛋白A相互作用的鉴定

目的:研究脆性组氨酸三联体(Fhit)对ATR/CHK1通路的影响,确定Fhit与复制蛋白A(RPA)存在相互作用,为进一步研究Fhit特异的信号通路奠定基础。方法:将Fhit全长基因插入含GST基因的原核表达载体中,在大肠杆菌中表达纯化GST-Fhit融合蛋白,并用GST沉降技术研究Fhit与RPA是否在体外存在相互作用;在表达Fhit的人细胞中用免疫共沉淀技术分析Fhit与RPA是否在体内存在相互作用,同时用免疫荧光染色方法研究Fhit与RPA在细胞内是否可以共定位。结果:通过免疫共沉淀、免疫荧光染色及GST沉降技术,确定了Fhit与RPA在体内及体外均可以相互作用。结论:确定了Fhit与RPA之间存在相互作用,为阐明Fhit在维持基因组完整性方面的机理提供了线索。