自建微阵列化学发光免疫分析法定量检测心肌肌钙蛋白I自身抗体及其初步临床应用

目的基于微阵列蛋白质芯片技术建立定量检测心肌肌钙蛋白I自身抗体(cTnIAAb)的微阵列化学发光免疫分析法,并评价该方法的检测性能。方法以心肌肌钙蛋白I(cTnI)-C融合蛋白为检测抗原,对抗原点样浓度、封闭液、封闭时间和二抗进行筛选,以检测结果信噪比最大为标准优化条件。以100名健康体检者(正常对照组)cTnIAAb检测灰度值的第95百分位数为临界值,建立cTnIAAb检测的标准曲线,并评价微阵列化学发光免疫分析法的检测性能(稳定性、精密度、最低检测限、线性范围等)。采用微阵列化学发光免疫分析法检测500例血清cTnI>0.1 ng/mL的急性冠状动脉综合征(ACS)患者(ACS组)的血清cTnIAAb,采用免疫印迹法验证其特异性。结果最优实验条件:抗原点样浓度为50μg/mL,封闭液为2%人乳,最佳封闭时间为12 h,二抗为辣根过氧化物酶(HRP)-羊抗人IgG抗体。微阵列化学发光免疫分析法检测高、低值cTnIAAb的精密度良好,变异系数(CV)均<15%;空白限(Lo B)、检测限(LoD)分别为0.12、0.23 AU/mL;线性范围为0.23~815.00 AU/mL。免疫印迹法结果显示,cTnIAAb阳性样本和阳性对照在相对分子质量40000~55000处均出现特异性条带。ACS组血清cTnIAAb阳性率为8.4%(42/500),明显高于正常对照组[2%(2/100)](χ^(2)=5.023,P<0.05);但血清cTnIAAb浓度2个组之间差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关性分析结果显示,ACS组cTnIAAb与cTnI无相关性(r^(2)=0.1,P>0.05)。结论自建的定量检测cTnIAAb的微阵列化学发光免疫分析法具有良好的检测性能,可为cTnIAAb的临床应用提供较好的方法学基础。

电化学与化学发光免疫传感器与细胞膜受体原位免疫分析新方法

近年来,对免疫传感器的研制与细胞在仿生界面上的固定化技术、细胞膜受体原位免疫分析新方法的建立等进行了研究,取得如下研究进展.

化学发光免疫分析法的研究进展

化学发光免疫分析法操作难度低、灵敏度与特异度高、检测速度快,在临床疾病诊断、环境检测、食品检测等诸多领域均得到了广泛应用。为进一步提升化学发光免疫分析法的诊断效率,需对其进行优化。新型化学发光免疫分析法是在传统化学发光免疫分析法的基础上加用纳米粒子或与微阵列芯片、免疫层析技术、流动注射技术联合应用的检测方法。该文综述了化学发光免疫分析法的发展及其与其他技术联合应用的现状,并展望了化学发光免疫分析法的研究前景。

化学发光免疫分析技术在微生物检测中的应用

本文详细介绍了化学发光免疫分析技术在微生物检测中的应用,同时明确了化学发光免疫分析技术具备高灵敏度、免疫反应高特异性等优势,同时针对样品处理、检测新方式等进行了简要的综述。整体来看明确化学发光免疫分析技术优势突出,可以有效替代抗体识别分子和以往各种处理技术方式,具备较高的实践性应用价值,希望可以借助本文为相关从业者提供理论帮助。

制备醛固酮多克隆抗体建立检测血浆醛固酮的化学发光免疫分析法

目的:制备可用于免疫分析的醛固酮(ALD)多克隆抗体,并建立基于生物素-链霉亲和素放大系统的ALD化学发光免疫分析方法,用于测定人血液中的ALD含量。方法:对ALD进行化学改造,制备醛固酮肟,再与BSA偶联制备免疫原,免疫兔,制备抗ALD多克隆抗体。以生物素-链霉亲和素放大系统采用竞争法建立ALD化学发光免疫分析方法。结果:经检测免疫的3号兔获得的抗ALD抗体灵敏度最高,50%抑制率(IC50)ALD浓度是268 pg/ml。用该抗体建立的化学发光免疫分析法的检测范围为62.5~2 000 pg/ml,灵敏度为23.7 pg/ml,批内变异系数为6.9%~9.5%,批间变异系数为8.5%~12.7%,回收率范围为93.1%~104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.996,与放射免疫分析试剂盒的相关性方程分别为y=0.932x+4.596,相关系数r=0.948(n=95)。结论:建立的检测ALD的化学发光免疫分析法符合临床应用的基本要求。

化学发光法微阵列蛋白芯片临床应用专家共识

微阵列蛋白芯片是研究蛋白质与蛋白质相互作用和识别疾病相关自身抗原的平台,也可以高通量的形式检测抗原与抗体之间免疫结合反应。该方法是一种微型化的固相免疫检测方法,在肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病及变态反应性疾病的筛查、辅助诊断和治疗监测中逐渐得到临床认可。该共识对以平面基质为载体,采用化学发光法检测的蛋白芯片的临床应用进行规范化和标准化。

新生儿甲状腺功能指标生物参考区间的建立及验证研究

目的:探讨适用于本实验室的新生儿甲状腺功能指标促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的生物参考区间。方法:依照美国临床实验室标准化协会(CLSI)C28-A3文件的方法,随机收集120例新生儿的新鲜血清,通过化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)进行测定,测定结果依据C28-A3的方法用SPSS 19.0软件进行统计分析,从而建立相应的生物参考区间,另外随机抽取LIS系统60份新生儿科的标本结果对新参考区间进行验证。结果:新生儿甲状腺功能指标(TSH、FT4、FT3)的生物参考区间分别为0.606~13.863 mIU/L、9.29~23.05 pmol/L、2.75~5.60 pmol/L,经过与60份参考个体的对比,结果验证是相符合的。结论:通过验证,初步建立的生物参考区间基本符合本实验室的要求。

食品中有机磷农药残留量检测新方法及进展

为给食品中有机磷农药残留量检测提供参考方法,对目前已报道食品中有机磷农药残留量检测方法作一综述。介绍了生物化学测定法、速测灵法、发光菌检测法、化学发光法、生物传感器法和免疫分析法等有机磷农药残留检测新方法,讨论了各方法的基本原理及其优缺点。

HE4在子宫内膜癌患者血清中的表达及其与各临床病理参数的关系

目的通过检测正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌患者血清HE4表达情况,分析HE4与子宫内膜癌各临床病理参数间的关系,探讨HE4在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法用化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）检测15例正常子宫内膜患者,10例子宫内膜不典型增生患者及40例子宫内膜癌患者血清中HE4的表达情况。结果正常子宫内膜组血清HE4范围为（27.7-84.0）pmol/L,均值为（40.3±16.2）pmol/L;子宫内膜不典型增生组血清HE4范围为（41-83）pmol/L,均值为（54.7±18.5）pmol/L;子宫内膜癌组血清HE4范围为（33.9-1040.9）pmol/L,均值为（120.2±195.6）pmol/L。子宫内膜癌组HE4水平明显较正常子宫内膜组高（Z=-3.444,P=0.01〈0.05）;血清HE4水平与子宫内膜癌患者的年龄、组织分级及病理类型无关（Z=-1.671,P=0.095〉0.05;Z=-1.569,P=0.117〉0.05;Z=-1.155,P=0.248〉0.05）;而与手术-病理分期、肌层浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。子宫内膜癌的期别越晚,血清HE4水平越高,Ⅰ-Ⅱ期患者血清HE4水平明显低于Ⅲ-Ⅳ期患者（Z=-2.583,P=0.010〈0.05）;深肌层浸润的患者血清HE4水平明显高于浅肌层浸润的患者（Z=-2.500,P=0.012〈0.05）。有淋巴结转移的患者血清HE4水平明显高于无淋巴结转移的患者（Z=-3.088,P=0.002〈0.05）。结论血清HE4水平在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌患者血清中表达逐渐升高,因此HE4可能与子宫内膜癌的发生、发展有关。

“食品快速检测技术及智能装备”专题征稿函

近年来,随着经济和科学技术的高速发展,食品安全问题也越来越突出,受到了世界各国的广泛关注。原有的食品检测技术已不能满足目前经济市场和科学研究的需求。新的检测技术与智能装备已经成为一种需求,如何快速、高效、方便和快捷地检测食品已成为目前食品安全检测领域的研究热点并且具有重要的意义。鉴于此,本刊特别策划了＂食品快速检测技术及智能装备＂专题,由江苏大学黄星奕教授担任专题主编,围绕化学比色分析、酶联免疫法（ELISA）、免疫胶体金试纸检测、计算机视觉技术、生物芯片、生物传感器、

“食品快速检测技术及智能装备”专题征稿函

近年来,随着经济和科学技术的高速发展,食品安全问题也越来越突出,受到了世界各国的广泛关注。原有的食品检测技术已不能满足目前经济市场和科学研究的需求。新的检测技术与智能装备已经成为一种需求,如何快速、高效、方便和快捷地检测食品已成为目前食品安全检测领域的研究热点并且具有重要的意义。鉴于此,本刊特别策划了＂食品快速检测技术及智能装备＂专题,由江苏大学黄星奕教授担任专题主编,

两种不同检测系统测定血清降钙素原的比较实验研究

目的探讨三联生物微阵列化学发光检测系统测定血清降钙素原(PCT)结果的可靠性。方法以罗氏Cobas e 601电化学发光检测系统为参照系统,三联生物微阵列化学发光检测系统为待评估系统,对血清PCT浓度进行测定并进行统计分析。结果罗氏电化学发光检测系统血清PCT日内精密度的变异系数(CV)为5.33%～7.88%,日间CV为5.62%～8.56%。三联生物微阵列化学发光检测系统的日内CV为4.93%～7.28%,日间CV为5.47%～8.90%。两种检测系统有较好的相关性(回归方程y=1.174x+0.213,P<0.05),相关系数r^2为0.997。在医学决定水平(PCT为0.50 ng/ml和2.0 ng/ml)处的Kappa值分别为0.878(P=4.60×10^(-7))和0.933(P=7.72×10_(-8)),阳性符合率分别为94.44%和100.00%,阴性符合率分别为93.33%和95.45%。结论三联生物微阵列化学发光免疫分析法与罗氏电化学发光法测定血清PCT结果相关性和一致性好,可用于临床血清PCT的快速检测。

贫血性疾病检验诊断报告模式专家共识

贫血是指外周血单位容积内血红蛋白量、红细胞数和（或）血细胞比容低于参考范围下限的一种症状。全身各系统疾病均可引起贫血，查明贫血的性质和病因对治疗至关重要。近年来，针对贫血的检测技术迅猛发展，免疫学方法从免疫电泳、酶联免疫吸附测定（ELISA）、放射免疫法到化学发光免疫分析法；分离技术从醋酸纤维素薄膜、聚丙烯酰胺凝胶电泳到微量层析柱分析、毛细管电泳、高效液相色谱分析等；分子生物学技术、流式细胞术、染色体分析等也广泛应用到贫血检测中，为临床诊断、鉴别诊断、治疗、预后判断及疗效蛉测提供了重要依椐。