2，3，5-氯化三苯基四氮唑对N80^#钢缓蚀行为的研究

用稳态极化法和交流阻抗法研究了2,3,5-氯化三苯基四氮唑对N80#钢在含H2SO3酸性溶液中发生腐蚀时的缓蚀作用及其缓蚀机理.结果表明:2,3,5-氯化三苯基四氮唑是一种以抑制阳极过程为主的缓蚀剂.其还原产物在N80#钢表面的吸附阻止了腐蚀性的酸性溶液与钢表面的接触,从而起到缓蚀作用.

应用氯化三苯基四氮唑染色快速判定超声引导下微波凝固范围

目的:探讨应用氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色快速判定微波凝固范围的可行性。方法:纯种新西兰长耳大白兔18只,随机分成即时、1 d、3 d、7 d、10 d、21 d 6组。超声引导下,45 W微波辐射肝组织3 min。取凝固标本,肉眼观察,并行TTC染色、HE染色、电镜观察。结果:活体兔肝凝固灶,电镜、HE染色证明凝固坏死区TTC不染色;非凝固坏死区TTC染色成玫瑰红色。活检标本TTC染色后,染色区域行HE染色,仍然可以观察细胞形态和组织结构。结论:TTC大体染色判定微波凝固范围,即时、准确、经济且操作简单。TTC不染色区域为凝固区,染成玫瑰红色区域为非凝固区。

氯化三苯基四氮唑对细菌生长指示的适用性研究

对TTC的细菌指示作用及其适用范围进了实验研究和现场考核。结果表明,TTC含量在0.005％时,革兰氏阴性菌红色指示效果最佳,且对细菌影响也较小。但对大多数革兰氏阳性菌则呈现较强的抑制作用,若再降低使用浓度,则其对阳性菌指示效果不佳。现场考核提示用TTC做指示剂进行食品微生物菌落计数测定时,可误使微生物超标的不合格食品错判为合格食品之弊。

2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在支原体培养中的应用研究

为了分析细菌培养指示剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在支原体培养中的应用,笔者将牛支原体、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体、鸡毒支原体、肺炎支原体分别接种于含有TTC的改良Thiaucourt’s液体培养基(TTC-MTB)和改良Thiaucourt’s固体培养基(TTC-MTA)中,同时以常规酚红指示剂培养基作为对照,观察支原体在2种培养基中的生长情况,并筛选TTC在培养基中的最适指示浓度。结果显示,与常规酚红指示剂相比较,TTC有更为灵敏的培养指示效果;在固体培养基中,TTC指示的支原体红色菌落更有利于菌落的计数及形态的观察;TTC的最佳使用浓度为0.2 mg/mL。本研究可为支原体培养和优化疫苗生产工艺提供参考。

不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色方式对心肌梗死面积检测的对比

目的比较应用不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色方式对心肌梗死面积的检测结果。方法实验在中国医科大学完成,采用Langendorff离体心脏灌注装置建立全心缺血模型。将20只健康SD大鼠（雌雄不拘、2周龄,体重250~300 g）按随机数字表法分为两组,每组10只。A组：TTC经主动脉根部直接灌注,B组：心脏切片后染色。两组鼠心均平衡10 min,阻断灌注30 min,复灌30 min。染色后观察心肌切片改变,计算心肌梗死面积。结果 A组和B组均能很好地对梗死心肌进行标记,且两组心肌梗死面积差异无统计学意义（45.80%±6.07%vs.47.40%±6.80%,P〉0.05）;A组心肌组织切片平整,颜色对比更明显,计算面积较准确,形态美观;而B组心肌组织切片凸凹不平,较难进行后续处理,计算面积不准确,形态不美观。结论 TTC染色是一种较为经济、快捷检测心肌梗死范围的染色方法,且经主动脉根部直接灌注染色法较心脏切片后染色法更简单、易操作,节省费用,染色效果好,染色后标本更平整、美观,有利于拍照和计算心肌的梗死面积。

三苯基四氮唑菌落总数检测纸片在食品卫生监督中的应用

由于菌落变异和食品颗粒状物的不可避免,干扰了食品卫生检查中营养琼脂平板法菌落计数的准确性,为此作者以三苯基四氮唑(TTC)为菌落指示剂,研制了一种纸片培养基,并与GB4789-85标准规定营养琼脂平板法进行了对照观察,结果显示两种方法所得菌落计数结果间无显著性差别(P<0.05)。国标法培养时间为18—24h,而纸片法为16—18h。结果提示纸片法在结果准确性上与国标法基本一致,且操作方便,缩短了培养时间,尤其适合基层部队卫生部门用于日常卫生监督。

2,3,5-三苯基氯化四氮唑浓度对细菌菌落总数测定的影响

目的了解2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度对细菌菌落总数测定的影响,以规范该法在食品细菌菌落总数测定中的应用。方法采用细菌定量培养的方法,观察含不同浓度TTC营养琼脂培养基对不同细菌生长形成菌落数的影响。将不同稀释度的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌纯培养物各1mL,分别依次接种到TTC质量浓度分别为0.02、0.05、0.10g/L的平板计数琼脂中,同时设空白对照和盐水试剂对照,观察菌落生长状况。结果大肠埃希菌在不同TTC浓度培养基中均能正常生长,其形成菌落数不受影响。培养基中含TTC质量浓度≥0.05g/L对金黄色葡萄球菌菌落数形成有明显影响,≥0.02g/L对蜡样芽胞杆菌的菌落数形成有明显影响。结论培养基中含TTC浓度≤0.10g/L对大肠埃希菌生长基本无影响,>0.02g/L对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌生长均会产生影响。

肉制品检验中未被0.001%2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色菌落的研究

目的鉴定1批肉制品样品中不能被2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色菌落的菌落。方法依照GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物检验菌落总数测定》和GB 29921-2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》对样品前处理后进行分离纯化,采用VITEK 2以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行检测鉴定。结果经VITEK 2和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定,肉制品样品中不能够被0.001%TTC染色的菌落分别为鲁氏不动杆菌和奇异变形杆菌。结论在出现TTC无法染色的情况下,应该采用适当的菌种鉴定方法对样品的颗粒和菌落进行详细区分,进而防止漏检和误检。

利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)测定细胞活力的方法与应用

目的：利用细胞内脱氢酶对2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）的催化作用建立比目前常用的3-（4，5-二甲基-2-噻唑）-2，5-二苯基溴化四氮唑（噻唑蓝，MTT）法更可靠的测定细胞活力的方法。方法使用不同浓度的TTC溶液测定细胞活力，并确定TTC的有效浓度范围。在计算所测定值与细胞数量函数关系的基础上，通过与传统测定细胞活力的MTT法进行比较，分析该方法的可行性。结果0．5％～1．0％浓度范围内的TTC溶液可用来测定细胞活力，测定值与细胞数量之间存在线性关系，与MTT法得到的结果基本一致，可避免MTT法测定过程中来自于细胞培养体系中其他抗氧化物质的非特异性干扰。结论 TTC可用于测定细胞活力，可替代常规的MTT法，具有操作简便，费用经济，结果可靠等优点。

2,3,5-三苯基氯化四氮唑在增菌液中的应用研究

目的确立2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)在增菌液中,对不同的细菌产生抑制和被完全抑制时的浓度。方法用金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌配制不同的菌液浓度,分别加到含1.0 mg/ml琼脂粉的普通营养肉汤增菌液中(副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水代替普通营养肉汤),再加入不同量的10.0 mg/ml TTC储备液,记录TTC对各菌产生抑制和被完全抑制时的浓度。结果在菌量30～300 cfu/ml时,金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌开始被抑制和被完全抑制时的TTC浓度分别为0.02、0.1、0.2、0.6、0.6、0.1 mg/ml和0.1、0.7、0.5、>2.0、>2.0、0.2 mg/ml。结论检测样品时,在增菌液中加入1.0 mg/ml的琼脂粉和适量的TTC可提高致病菌的检出率,可直观样品中细菌数量。选择含不同TTC浓度的增菌液,可选择性地进行筛选增菌,进一步提高检出率。

用TTC与INT-电子传递体系活性表征重金属对污泥活性的影响

研究了不同浓度的Cu2 + 、Zn2 + 、Cd2 + 、Hg2 + 、Ni2 + 、Pb2 + 和Ag+ 对污泥TTC和INT 电子传递体系活性产生的影响 ,比较了这 2个参数在表征污泥活性受重金属抑制时的灵敏性 .结果表明 ,各种重金属抑制污泥TTC 电子传递体系活性的IC50 小于抑制INT 电子传递体系活性的IC50 ,TTC 电子传递体系活性反映重金属毒性作用的灵敏性大于INT 电子传递体系活性 .实验的重金属离子呈现出不同的毒性作用 ,以TTC 电子传递体系活性为评价参数 ,毒性顺序为 :Hg2 + >Cd2 + >Cu2 + >Ag+ >Zn2 + >Ni2 + >Pb2 + ,以INT 电子传递体系活性为评价参数 ,毒性顺序为 :Hg2 + >Ag+ >Cu2 + >Cd2 + >Zn2 + >Ni2 + >Pb2 + .

大鼠缺血性卒中模型MRI与TTC染色法测量脑梗死体积的对比研究

目的对比活体下MRI与大体标本2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评估缺血性卒中大鼠脑梗死体积的差异。方法对19只大鼠利用线栓法建立急性缺血性卒中模型,并于造模24h后行头颅MRI扫描,扫描完毕后进行TTC染色,利用配对t检验评价T2WI及TTC染色测量脑梗死体积的统计学差异。结果除2只大鼠死亡外,共有17只纳入本研究中。T2WI序列与TTC染色法测量的脑梗死体积无明显统计学差异(t=0.50,P=0.62)。结论对于有MRI条件的动物实验研究,T2WI序列可以取代TTC染色法快速、准确的测量缺血性卒中动物模型的脑梗死体积,简化实验流程。

TTC-脱氢酶还原法测定铜绿微囊藻活性

利用氯化三苯基四氮唑（TTC）-脱氢酶还原法定量地测定了铜绿微囊藻细胞的活性,并对影响活性测定的因素进行了分析与研究.结果显示,TTC浓度大于0.6%时会抑制酶活性,最适TTC浓度为0.2%;脱氢酶还原反应在Tris-HCl缓冲液中能正常进行,而在磷酸盐缓冲液中受到抑制,最适pH值为7.5-8.0;培养时间和培养温度对TTC脱氢酶还原反应的影响较大,最适培养时间为8-16h,最适培养温度为30-35℃;反应不需加入非离子去垢剂,吐温20和曲拉通X-100对脱氢酶反应会产生较强抑制作用.TTC还原所生成的三苯基甲臢（TPF）可采用50%乙醇提取.研究显示TTC-脱氢酶还原法可以很好地进行藻细胞活性定量化测定.

脱氢酶活性检测方法及应用

介绍了分别用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)以及碘硝基四唑紫(INT)等作为人工受氢体进行脱氢酶活性(DHA)检测的几种常见方法,以及它们自身在反映微生物活性等方面的优缺点。论述了TTC在DHA检测中的发展,重点讨论了TTC作为受氢体进行DHA测定过程中其标准曲线制作方法的改进,并对测定中诸多影响因素如温度、pH及萃取剂等进行了比较分析,确定了最佳实验条件。简要概括了目前DHA测定方法在废水生化处理、评价化学毒物和金属毒物的毒性、土壤污染等方面的应用。

镇江地区市售纯牛奶和生鲜牛奶中抗生素残留情况的调查

对镇江地区市售纯牛奶和奶源户生鲜牛奶中抗生素残留情况进行调查,为加强乳制品质量控制提供依据。采用TTC法(GB4789.27-2003)对鲜乳中抗生素残留进行检验,以农业部2001年9月发布的《无公害食品生鲜牛奶》行业标准中不得检出抗生素为判定标准。结果显示奶源户生鲜牛奶抗生素残留阳性率为5.86%,市售包装纯牛奶阳性率4.67%,袋装纯牛奶阳性率为4.41%,盒装纯牛奶阳性率为4.79%。镇江市售生鲜牛奶还存在一定程度的抗生素残留,建议有关卫生管理部门需加大对乳制品质量的监测力度,加强生产鲜牛奶的抗生素残留检测工作。

玉米根系活力及吸收面积的空间分布变化

分别用氯化三苯基四氮唑 ( TTC)还原法和甲基蓝吸附法测定玉米根系活力和吸收面积 ,研究其 0～1 5 cm土层根系的水平分布和离主茎 0～ 2 0 cm范围土壤根系的垂直分布情况。结果表明 ,TTC还原量在离主茎 0～ 2 0 cm的水平方向和离地面 0～ 45 cm的垂直方向上 ,随着离主茎距离的增加和土层深度的加深而降低。TTC还原强度在水平方向上与 TTC还原量的变化趋势类似 ,只是个别生育期 1 5～ 2 0 cm处回升 ;在垂直方向上与 TTC还原量的变化趋势相反 ,随土层深度的加深而增加。同样范围内根系总吸收面积和活跃吸收面积的变化趋势与 TTC还原量相同 ;而比吸收面积和比活跃吸收面积 ,在水平方向上随着离主茎距离的增加而明显增加 。

呼吸缺陷型啤酒酵母菌株的重离子束辐照诱变筛选及其线粒体的限制性酶切分析

利用单核能为5.19MeV/u的22Ne5+辐照啤酒酵母菌株,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl-2H-Tetrazoliumchloride,TTC)筛选培养基快速筛选呼吸缺陷型酵母菌株。通过一种新型而简便的限制性酶切分析手段,发现辐照后的呼吸缺陷型酵母菌株线粒体DNA发生明显变化,主要表现在与对照相比线粒体DNA出现大片段缺失,同时出现了少量新的条带,并在此基础上初步探讨离子束辐照诱变产生呼吸缺陷型酵母菌株的诱变机理。

降纤酶对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的作用

目的探讨降纤酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法用线栓法将易卒中型肾血管性高血压大鼠(108只)复制成一侧大脑中动脉闭塞模型,将模型分为降纤酶组和对照组,每组各54只大鼠。给降纤酶组大鼠静脉注射降纤酶,对照组注射等渗盐水,分别在缺血3h再灌注3、6、24h,缺血6h再灌注3、6、24h进行神经功能评分并处死大鼠,每个时间点为9只大鼠,假手术组8只大鼠。用2,3,5氯化三苯基四氮唑染色,计算脑梗死范围,HE染色观察梗死灶边缘区的病理形态,同时以免疫组织化学方法检测尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)1蛋白的表达。结果降纤酶组与对照组比较,神经功能评分和梗死灶体积均降低,uPA蛋白表达均增加,在缺血3h再灌注3、6、24h和缺血6h再灌注3、6、24h,降纤酶组的灰度值分别为1.240±0.027、1.9±1.1、12±5、2.3±1.2、6.4±2.2和20±7,而对照组分别为1.320±0.043、2.2±1.0、16±7、3.8±1.6、8.3±3.7和24±10,PAI1蛋白表达均减少,并且脑出血发生率低。结论降纤酶有减轻脑缺血再灌注损伤的作用,其可能的机制是减少uPA对梗死灶边缘区微血管基底膜及细胞外间质的降解。

小鼠脑片损伤和保护药物的定量评价方法

目的 :建立小鼠离体脑片损伤及保护药物作用的定量评价方法。方法 :小鼠脑片以缺氧 /缺糖 (OGD)或N-甲基 - D-门冬氨酸 (NMDA)诱导损伤后 ,用 2 ,3,5 -三苯基四氮唑 (TTC)染色 ,然后以图像分析方法计算 TTC染色平均灰度和面积 ,并观察氯胺酮的保护作用。结果 :纹状体和皮层 TTC染色平均灰度和面积随 OGD时间的延长而下降 ,在 7.5～ 15 min时明显下降 ;OGD后再灌 30 min TTC染色平均灰度可暂时增高 ,然后又下降。NMDA10～ 10 0 μmol/ L显著降低 TTC染色平均灰度。氯胺酮 (10 μmol/ L)能减轻 OGD或 NMDA对脑片的损伤。结论 :小鼠离体脑片 TTC染色平均灰度和面积可定量评价急性脑损伤 。

通心络对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨通心络对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法将31只雄性Wistar大鼠,根据不同给药方案随机分为24h对照组(7只)、24h通心络组(7只)、5d对照组(7只)、5d通心络组(7只)以及假手术组(3只)。各组在造模前用等渗盐水或通心络灌胃预处理7d。依据线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞90min脑缺血再灌注模型。观察不同时间点的神经功能缺失评分,计算2,3,5氯化三苯基四氮唑染色下的梗死体积。结果脑缺血再灌注24h后的梗死体积对照组为(94.4±19.9)mm3,通心络组为(72.1±13.4)mm3;神经功能缺失评分对照组为(3.3±0.6)分,通心络组为(2.6±0.6)分。再灌注5d后的梗死体积对照组为(123.9±18.6)mm3,通心络组为(100.2±12.8)mm3;神经功能缺失评分,对照组为(2.1±0.4)分,通心络组为(1.2±0.4)分,两组比较,差异均有显著意义(P<0.01～0.05)。结论通心络对大鼠大脑中动脉阻塞后的脑缺血再灌注损伤可能具有保护作用。