细菌脱色酶TpmD对三苯基甲烷类染料脱色的酶学特性研究

从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行有效脱色的脱色酶，命名为TpmD。该酶的亚基分子量为29．4kDa，等电点为5．6。该酶催化上述4种三苯基甲烷类染料脱色反应的适合温度为40～60℃，适合pH范围为5．5～9．0。动力学参数测定结果显示TpmD对结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿的Km值分别为24．3、40．6、54．2、68．5μmol^-1·L^-1，Vmax值分别为19．6、74．1、82．8、115．6μmol^-1·L^-1。结晶紫为该酶的最适反应底物。TpmD催化的脱色反应依懒于NADH／NADPH及分子氧的存在，显示该酶属于NADH／NADPH依赖型的氧化酶类。这是国内外首次关于细菌中三苯基甲烷类染料脱色酶酶学性质的描述。

三苯基甲烷三异氰酸酯交联聚乙烯醇木材粘合剂的研究

采用正交实验法 ,探究在水基中三苯基甲烷 - 4 ,4′ ,4″-三异氰酸酯 (TTI)交联聚乙烯醇 (PVA)的反应。TTI是直接用列克纳胶 (JQ - 1)为原料 ,利用其与PVA交联反应产物的不溶性和体系的压缩剪切强度等性能判断该反应的进程。结果表明 ,TTI的加入较大幅度地提高PVA胶水的粘结性能和耐水性能 ,尤其突出的是颜色为稳定的乳白色。

三苯基甲烷三异氰酸酯和硼砂交联聚乙烯醇水性粘合剂

It was studied by the orthogonal matrix experimental method,to the curing reaction of polyvinyl alcohol(PVA)by triphenylmethane4?4′?4″triisocyanate(TTI)and borax in water basal body.The Leiknonat (JQ1)adhesive was a substitute material for TTI.The influences of add amount of PVA,TTI,borax and reaction temperature upon the compressive shearing strength of products were also discussed.It was found that adding of TTI and Borax improved greatly the cohesive capability of polyvinyl alcohol glue.In function of a surfactant OP10,a type of environmental protection,white latex of single group was formed.

由4′,4″-二羟基-2-甲酸-三苯基甲烷及其衍生物制备高碳超支化芳香聚酯

合成了一系列含羟基和乙酰氧基的超支化聚酯 .将 4′ ,4″ 二羟基 2 甲酸 -三苯基甲烷 (酚酞啉 )直接缩聚和将 4′ ,4″ 二乙酰氧基 2 甲酸 -三苯基甲烷进行酯交换反应都成功得到了超支化聚酯 .以PS作标准物 ,由GPC测得的重均分子量为 2 0 0 0 0到 80 0 0 0 .13 CNMR测试表明聚合物支化度略高于 5 0 % .聚酯的玻璃化转变温度依赖于末端和侧基官能团类型 .该超支化聚酯末端含有反应性官能团 ,具有类似线性高分子的高的热稳定性 .相比之下 ,由于其大分子的形状和官能团的影响 ,末端为乙酰氧基的超支化聚酯显示了优良的溶解性能 ,这与一般线性高分子大不相同 .由于氢键的存在 ,末端为羟基的超支化聚酯的溶解性能不佳 ,但是酸化可破坏氢键网络 。

三苯基甲烷三异氰酸酯的制备及污染防治

对三苯基甲烷三异氰酸酯合成的工艺路线及条件进行摸索,并对其污染治理措施价分析。

微生物对三苯基甲烷类染料脱色的研究进展

三苯基甲烷染料广泛应用于纺织印染、医药、生物染色、造纸、皮革、食品及化妆品等领域,常见的有作为抗菌剂的孔雀石绿和结晶紫等。由于其特殊的化学结构,在环境中较稳定且难以降解脱色,因此其生物脱色降解的研究可为印染废水处理和染料污染环境的生物修复提供理论依据。本文从细菌、放线菌、真菌及藻类等微生物对三苯基甲烷类染料降解脱色研究新进展做综述。通过分析不同微生物脱色三苯基甲烷类染料的中间产物来探讨其降解机理和降解途径,同时论及功能酶的分离纯化、酶学特性及其编码基因的克隆表达新进展,并分别从基础理论和应用两方面对微生物降解三苯基甲烷类染料未来的研究方向进行了展望。

DTT对三苯基甲烷染料脱色的研究

研究了二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)对三苯基甲烷染料的还原脱色作用.以孔雀石绿为代表,优化了反应体系中DTT的用量,目的是考察孔雀石绿和DTT之间的定量关系,并明确DTT对孔雀石绿的脱色能力.分析了反应体系pH值对DTT还原力的影响.结果表明,在pH值>5的反应体系中,平均每1 mol DTT可在1 min内脱色4 mol孔雀石绿,脱色率高达97%.脱色产物经HPLC分析表明,孔雀石绿被DTT还原脱色为隐色孔雀石绿.隐色孔雀石绿可继续与氧化态的DTT结合成为水不溶性的络合物,形成白色沉淀.DTT对结晶紫、灿烂绿及碱性品红的脱色作用均达到85%以上,以此确定DTT是一类广谱的三苯基甲烷类染料脱色剂.

三苯基甲烷类染料氧化酶基因(tpmD)在大肠杆菌中的无诱导表达

为了解决嗜水气单胞菌DN322对鱼类的潜在致病性问题,有必要克隆表达该菌的三苯基甲烷染料脱色酶基因tpmD.通过PCR方法获得该基因,并与脱色希瓦氏菌S12的NAD(P)H脱氢酶基因启动子和用于荧光标记的编码CCPGCC的碱基序列融合,将有启动子和无启动子的融合基因片段分别连接到质粒pMD18-T中,转化大肠杆菌E.coliDH5α和E.coliBL21.结果发现,有启动子的融合基因能被E.coli在不加诱导物IPTG的条件下高效正确表达,脱色酶活性甚至超过基因供体菌DN322.将上述两株大肠杆菌工程菌株在自然水体中进行孔雀石绿污染小试处理,60d内在每个350mL反应体系中累积共投加大于10000mg的孔雀石绿,脱色率一直保持在92%以上;细菌数量最后增加了5～10倍.研究结果证明,基因工程菌在不加营养物的条件下也有很强的脱色活性和长期的存活能力;在tpmD基因3’端加入的用于螯合双砷荧光染料的18bp编码氨基酸碱基序列不影响此基因的表达和酶的脱色活性,这将赋予此工程菌可示踪性.

三苯基氯甲烷的研究进展

三苯基氯甲烷是一种重要的化工原料和医药中间体,本文综述了现有三苯基氯甲烷的工业化合成方法、国内外研究进展和用途,指出了现有生产技术中存在的问题,并对三苯基氯甲烷的发展方向及产业前景进行了展望。

三苯基氯甲烷的制备

以无水乙醚为溶剂,溴苯与镁反应制备格氏试剂苯基溴化镁。苯基溴化镁与二苯甲酮反应后,酸性条件下水解,蒸除乙醚,水蒸气蒸馏、抽滤、重结晶,得到三苯甲醇,产率53.7%。三苯甲醇与浓盐酸反应制备三苯基氯甲烷,产率49.4%。

三苯基乙腈的合成

以三苯基氯甲烷和氰化亚铜为原料合成了三苯基乙腈。并通过对原料配比、反应温度和反应时间的研究 ,得到了较佳的合成工艺条件 :三苯基氯甲烷与氰化亚铜的最佳摩尔比为 1 :1 .3 ,反应温度为 1 3 0℃ ,反应时间为 2 .5小时。产物经分离提纯后 ,产率可达 79.3 0 % ,并对其进行TLC分析、红外光谱分析 。

4,4'-二氨基-4”-羟基三苯甲烷型聚酰亚胺薄膜的制备及其表面性能研究

以盐酸苯胺为催化剂,对羟基苯甲醛与苯胺通过缩合反应,合成4,4'-二氨基-4"-羟基三苯基甲烷(DAHTM)单体。DAHTM单体与均苯四甲酸二酐(PMDA)聚合反应,得到含羟基的聚酰胺酸(DAHTM/PM-DA-PAA)溶液,经涂膜,热亚胺化后,制成相应的聚酰亚胺薄膜,并对其表面性能进行了研究。

封闭型异氰酸酯固化剂的合成及应用

采用甲乙酮肟(MEKO)为封闭剂,与三苯基甲烷三异氰酸酯(TTI)反应,制备了封闭型三苯基甲烷三异氰酸酯(B-TTI)。探究了不同温度和不同时间下MEKO和TTI的反应程度。研究结果表明:50℃下MEKO与TTI的反应速率较快,封闭完成后体系内游离异氰酸根的含量降至0.05%以下,反应时间为4 h及以上时,产物储存性能较好;确定了解封温度为120℃左右,解封后会伴随着自聚反应的发生,解封后的产物可以与TTI进行快速固化反应;制备的B-TTI作为固化剂加入到TTI中,当m(B-TTI)∶m(TTI)=2∶10时,粘接效果较好,粘接强度可达4.76 MPa。

一种双胺型苯并噁嗪树脂的合成及在覆铜板中应用

以4,4-二氨基三苯基甲烷、苯酚和多聚甲醛为原料合成了4,4-二氨基三苯基甲烷苯酚型苯并噁嗪树脂(MEPBZ),采用红外光谱对其结构特征进行确认。利用热重分析法(TGA)和示差扫描量热法(DSC)分析了树脂的热稳定性,热失重5%为300℃;产物有明显固化反应峰,峰值温度265℃。考察了产物固化片的介电性能,结果显示其具有较低的介电损耗和介电常数。

聚碳酸亚丙酯扩链研究

分别以ADR-4380、二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)、三苯基甲烷四异氰酸酯(DTTI)、三苯基甲烷三异氰酸酯(TTI)和硫代磷酸三苯基异氰酸酯(TPTI)为扩链剂,利用HAAKE混合器研究了它们对聚碳酸亚丙酯的扩链效果。结果表明,ADR-4380对聚碳酸亚丙酯树脂没有明显的扩链作用,而MDI、DTTI、TTI和TPTI都对聚碳酸亚丙酯树脂有明显的扩链作用,且扩链效果顺序是:DTTI>TPTI>TTI>MDI。扩链温度也是影响聚碳酸亚丙酯扩链效果的重要因素,不同扩链剂的最佳扩链温度不同,TPTI和TTI的最佳扩链温度为160℃,而DTTI和MDI的最佳扩链温度为170℃。

2,3-二甲基纤维素的制备与表征

以溶解的纤维素为原料,三苯氯甲烷作为定向取代试剂取代纤维素的6位羟基,制备6-三苯甲基纤维素。采用^(13)C-NMR、FT-IR对其进行了表征,结果表明三苯基氯甲烷实现了纤维素6位羟基完全取代。以6-三苯甲基纤维素作为原料,通过甲基化,脱除三苯甲基保护基团,制备了2,3-二甲基纤维素,采用13C-NMR、GC-MS、FT-IR等表征方法对样品进行了表征,并考察了反应温度与时间、甲基化试剂与糖结构单元摩尔比对2,3-二甲基-纤维素取代度的影响。结果表明,^(13)C-NMR、GC-MS两种表征方法表征2,3-二甲基-纤维素的取代分布具有较好的一致性,2,3-二甲基-纤维素取代度随着反应温度的升高、反应时间的延长、甲基化试剂与糖结构单元的摩尔比提升呈一定的递增关系。

细菌脱色酶TpmD的酶学特性研究

从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行高效脱色的脱色酶,命名为TpmD。在测定TpmD分子量、等电点及对不同三苯基甲烷染料脱色的动力学参数、脱色过程对分子氧及NADH/NADPH具有依赖性的基础上,又进一步从黄素FAD/FMN对酶活力的影响、酶抑制剂、酶蛋白N-末端测序及酶溶液的特征吸收光谱等方面对TpmD的酶学本质进行了分析。结果表明,TpmD不含核黄素,其脱色活性也不因加入FAD或FMN而提高。TpmD的N-末端氨基酸序列与多种氧化还原酶具有同源性。甲吡酮及维生素C(Vc)对TpmD的脱色活性具有明显的抑制作用。TpmD酶蛋白的溶液在408nm处有一特征吸收峰,但在连二亚硫酸钠的还原条件下通入CO气体后,该酶却不具有P450酶在450nm处的特征吸收峰。上述结果显示脱色酶TpmD是一种新的氧化酶。

列克纳胶(JQ-1)交联聚乙烯醇乳胶的合成工艺研究

以OP-10(辛基酚聚氧乙烯醚)为非离子型表面活性剂、聚乙烯醇(PVA)为基体树脂和列克纳胶(JQ-1)为交联剂,制备了新型单组分交联反应型白色PVA乳胶,并采用正交试验法探讨了乳胶的各组分掺量、反应温度和时间等对剪切强度、产品外观的影响。研究结果表明:当PVA为10 g/100 m L、φ(OP-10)=0.03%、φ(JQ-1)=2.5%(均相对于乳胶总体积而言)、反应时间为105 min和反应温度为40℃时,该PVA乳胶的粘接性能和耐水性优良;该PVA乳胶生产工艺简单、原料成本低,可广泛应用于建筑装饰、木材加工、纸品和纺织等行业中。

TTI交联聚乙烯醇木材胶黏剂的研究

研究在水基中三苯基甲烷-4,4',4"-三异氰酸酯(TTI)交联聚乙烯醇(PVA)所形成的白色乳胶。采用正交试验法探讨聚乙烯醇、催化剂-x、TTI的加入量、反应时间及反应温度对该乳胶性能的影响。合成的单组份环保乳胶适用于木材、纸品等加工业,以及建筑业。