基于网络药理学和分子对接技术探讨三草保肝汤抗肝癌作用机制

利用网络药理学和分子对接技术,研究三草保肝汤(SancaoBaogan decoction,SBD)治疗肝癌的物质基础及其可能的作用机制.利用TCMSP数据库获取SBD的药材成分信息;利用TCMSP、Swiss target prediction、GeneCards、OMIM数据库得到药物和肝癌靶点;R语言统计得到SBD和肝癌靶点的交集,交集导入STRING平台绘制PPI网络,筛选核心靶点;利用Cytoscape构建“三草保肝汤⁃活性成分⁃潜在靶点”和“关键靶点⁃活性成分”互作网络,筛选主要成分;利用Metascape数据库对共有靶点进行基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;分子对接验证活性成分与靶点.Wersternblot实验验证三草保肝汤作用肝癌细胞的核心靶点.结果发现,SBD 4种主要活性成分为木犀草素、鞣花酸、山奈酚和槲皮素;SBD可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗肝癌作用,其中,AKT1、MAPK3是抑制肝癌的重要靶点.

基于UPLC-ESI-HRMS^n技术的三草保肝汤化学成分分析

目的:利用UPLC-ESI-HRMSn技术对三草保肝汤中化学成分进行分析。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~2 min,5%A;2~20 min,5%~12%A;20~35 min,12%~40%A;35~38 min,40%A;38~48 min,40%~80%A;48~50 min,80%A),流速0.3 m L·min-1,柱温30℃,进样量10μL;采用电喷雾离子源,在正、负离子模式下采集数据。运用Xcalibur 3.0软件,根据化合物的相对保留时间、准分子离子峰和碎片离子峰等信息,结合人类代谢组数据库(HMDB),参考相关文献以及对照品比对,鉴定三草保肝汤的主要化学成分。结果:从三草保肝汤中鉴定出了40个化学成分,包括酚酸类16个、黄酮类19个、蒽醌类2个、三萜类1个、甾醇类1个、单萜类1个,其中有6个化学成分(α-蒎烯、丹参素、表没食子儿茶素、龙胆酸、柚皮素、大黄素)首次从该复方中分离得到。结论:UPLC-ESI-HRMSn技术能建立快速、准确分析三草保肝汤中化学成分的方法,对三草保肝汤化学成分进行了较为全面的定性分析,为该复方的药效物质基础研究及质量控制奠定了基础。