结合三螺旋分子探针和催化发夹组装反应对甲胎蛋白的快速无酶比色分析

目的构建一种基于三螺旋分子探针(THMP)和催化发夹组装(CHA)反应的新型无酶比色生物传感器(T-CHA),用于低丰度甲胎蛋白(AFP)的可视化检测和精准定量分析。方法通过凝胶电泳以及紫外-可见分光光度计记录AFP诱导T-CHA体系产生的吸光度,以评估T-CHA策略的可行性。分别对THMP和CHA的摩尔比、CHA的反应时间、温度及缓冲液pH值等参数进行了优化。用不同浓度AFP诱导T-CHA发生显色反应,以探究T-CHA的检测效能。结果在最佳实验条件下,不同浓度AFP的对数值在5 pg/mL至10 ng/mL呈现线性关系,检测限为2.29 pg/mL。T-CHA体系在105 min内即可完成对低丰度AFP的精准定量分析及无标记的可视化检测,且T-CHA的灵敏度优于ELISA。结论利用THMP的低背景泄漏和CHA的高催化效率,T-CHA体系可以实现肝细胞癌的早期精准诊断,且在即时检验中具有一定的应用前景。