血清纤维胶凝蛋白3、胶原三股螺旋重复蛋白1对非小细胞肺癌的诊断价值及与临床病理特征的关系

目的 探讨血清纤维胶凝蛋白3(FCN3)、胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值及与临床病理特征的关系。方法 我院2021年7月~2022年8月收治的73例NSCLC病人为研究组;同期来本院体检的健康者55例为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清FCN3、CTHRC1水平;Pearson法分析NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平的相关性;Logistic回归分析NSCLC发生的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清FCN3、CTHRC1水平对NSCLC发生的诊断价值。结果 研究组血清FCN3、CTHRC1水平高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清FCN3、CTHRC1水平与NSCLC病人癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Pearson分析显示,NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平呈正相关关系(r=0.258,P=0.028);Logistic回归分析显示,血清FCN3、CTHRC1表达增高是NSCLC发生的影响因素(P<0.05);血清FCN3、CTHRC1水平诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积分别为0.869、0.810,二者联合诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.881,优于血清FCN3、CTHRC1各自单独诊断。结论 NSCLC病人血清FCN3和CTHRC1水平升高,且与癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,是NSCLC发生的危险因素,二者联合检测对NSCLC发生更具诊断价值。

组织桥接整合因子1、Ⅰ型胶原蛋白基因、核转运蛋白基因2与三阴性乳腺癌术后复发关系

目的探究组织桥接整合因子1(BIN1)、Ⅰ型胶原蛋白基因(COL1A1)、核转运蛋白基因2(KPNA2)表达与三阴性乳腺癌(TNBC)术后复发关系及联合检测意义。方法选取2019年5月至2020年5月上海市第八人民医院行手术治疗的TNBC病人80例,根据术后2年是否复发分为复发组、未复发组,比较两组临床资料、组织BIN1、COL1A1、KPNA2基因表达,复发的相关影响因素采用单因素与多因素logistic回归分析,组织BIN1、COL1A1、KPNA2基因表达预测术后复发的价值采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析,组织BIN1、COL1A1、KPNA2基因表达与复发时间关系采用Pearson分析,比较不同组织BIN1、COL1A1、KPNA2基因表达病人无复发生存期(RFS)。结果复发组T分期、N分期与未复发组比较,差异有统计学意义(P<0.05);复发组组织BIN1mRNA表达为0.24±0.07,低于未复发组的0.35±0.10(P<0.05),复发组组织COL1A1mRNA、KPNA2mRNA表达分别为2.07±0.62、2.91±0.84,高于未复发组的1.48±0.43、1.85±0.60(P<0.05);T分期、N分期、COL1A1 mRNA、KPNA2 mRNA均是复发相关独立危险因素,BIN1 mRNA是复发相关独立保护因素(P<0.05);BIN1 mRNA、COL1A1 mRNA、KPNA2 mRNA的AUC分别为0.76、0.80、0.78,三者联合的AUC为0.94;BIN1mRNA与复发时间呈负相关(r=-0.79,P<0.001),COL1A1mRNA、KPNA2mRNA与复发时间呈正相关(r=0.77、0.78,均P<0.001);BIN1mRNA高水平病人RFS长于低水平病人,COL1A1mRNA、KPNA2mRNA高水平病人RFS短于低水平病人(P<0.05)。结论BIN1mRNA、COL1A1mRNA、KPNA2mRNA与TNBC术后复发风险、复发时间有关,联合检测可作为早期预测术后复发的一个可靠方案,为临床治疗提供重要的参考信息。

胶原三螺旋重复蛋白-1与类风湿关节炎疾病活动度的相关性分析

目的:探究类风湿关节炎(RA)患者血清胶原三螺旋重复蛋白-1(CTHRC1)水平与疾病活动度的关系。方法:ELISA检测122例RA患者和61例健康体检者的血清CTHRC1水平。应用DAS28-ESR将RA患者分为非活动性RA组和活动性RA组,Spearman相关系数和二元Logistic回归分析CTHRC1浓度与RA疾病活动度的相关性。结果:①活动性RA组CTHRC1浓度明显高于非活动性RA组(P<0.001),且与复合疾病活动度评分及大多数指标呈正相关;②血清CTHRC1水平诊断活动性RA组和非活动性RA组的曲线下面积(AUC)为0.843;③二元Logistic回归分析显示CTHRC1是与RA病情严重程度相关的独立危险因素,OR(95%CI)为1.010(1.001~1.012)。结论:RA患者CTHRC1水平显著升高并与疾病活动度相关。因此,CTHRC1可能成为评估RA疾病活动性的一种新型生物标志物。

胶原蛋白三螺旋重复序列1调控表皮生长因子受体信号通路促进高血压心肌重构形成及其机制

目的 探讨胶原蛋白三螺旋重复序列1(CTHRC1)调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在高血压心肌重构形成中的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为以下3组:野生型对照(WTC)组、AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组,每组10只。AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组大鼠分别以1×10^(11)v.g.的剂量通过尾静脉注射Stuffer或CTHRC1进行预处理;注射4周后,大鼠接受渗透微型泵给药AngⅡ[1.5 mg/(kg·d)]持续4周以发展高血压,通过经胸超声心动图无创测量心脏功能,并采用Masson三色染相比,AngⅡ+stuffer组高血压大鼠心脏组织纤维化显著增加(P <0.05)。CTHRC1给药进一步加剧了高血压大鼠这些病理变化(P <0.05)。心脏超声显示,AngⅡ+CTHRC1组大鼠左心室射血分数降低和分数缩短程度较AngⅡ+stuffer组更大(P <0.05)。与对照组相比,AngⅡ色评估心脏纤维化。从2至3日龄SD大鼠的心脏中分离出心脏成纤维细胞(CF),分为:Con组、AngⅡ组、AngⅡ+sh-NC组、AngⅡ+shCTHRC1组和AngⅡ+sh-CTHRC1+Colivelin TFA组。通过CCK8试验、伤口愈合试验评估细胞增殖、迁移,二氢乙锭荧光染色检测活性氧(ROS)水平,蛋白质印迹分析CTHRC1蛋白和EGFR/Stat3信号通路表达。结果 与WTC组比较,AngⅡ组CF的增殖,EGFR、Stat3蛋白表达显著增加(P <0.05),sh-CTHRC1预处理显著逆转了AngⅡ诱导的CF增殖和EGFR、Stat3蛋白表达增加(P <0.05)。AngⅡ组中CF迁移、ROS水平和纤维化相关信号(COL1A1、COL3A1、TGF-β)基因表达较对照组均显著增加(P <0.05);sh-CTHRC1预处理显著逆转了AngⅡ诱导的这些变化(P <0.05)。此外,Colivelin TFA加入很大程度降低了sh-CTHRC1预处理对AngⅡ诱导的有益作用(P <0.05)。结论 CTHRC1过表达导致高血压大鼠心脏纤维化、结构损伤和功能障碍的增加,其作用机制与激活EGFR/Stat3信号通路介导的氧化应激有关。

胶原三螺旋重复蛋白-1参与疾病作用研究进展

胶原三螺旋重复蛋白-1(collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1)是一种具有血管损伤修复作用的分泌型蛋白,参与血管重构、成骨细胞形成以及创伤修复。CTHRC1通过促进细胞迁移、血管形成参与肿瘤病理进程,通过促进成纤维样滑膜细胞迁移和血管形成而参与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)血管翳形成。CTHRC1主要通过Wnt信号通路发挥其作用。Wnt信号通路在RA滑膜细胞活化、骨吸收和关节破坏中起重要作用。该文就CTHRC1近年来研究进展进行综述。

胶原三股螺旋重复蛋白1在HBV肝病中的临床意义研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)表达的影响及其临床意义。方法分别采用实时逆转录聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测人肝癌细胞系Hep G2和Hep G2.2.15中CTHRC1 mRNA和蛋白水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CTHRC1血清学水平,分析非HBV感染的健康人(正常对照组)、无症状HBV携带者、慢性乙型肝炎患者、HBV感染致肝纤维化患者和HBV相关肝细胞癌(HCC)患者中CTHRC1血清学水平的差异。结果 Hep G2.2.15细胞中CTHRC1 mRNA的表达水平明显高于Hep G2细胞;无症状HBV携带者CTHRC1血清学水平明显高于正常对照组(P<0.05);HBV相关HCC患者CTHRC1血清学水平明显高于HBV感染致肝纤维化患者和慢性乙型肝炎患者(P<0.05)。结论 HBV能够上调CTHRC1的表达,其血清学水平与HBV疾病进程相关。

丙型肝炎病毒上调胶原三股螺旋重复蛋白1的表达

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)对胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)表达的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测JFH-1株HCV病毒感染的Huh7.5.1细胞及其对照细胞中CTHRC1 mRNA和蛋白的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CTHRC1血清学含量。结果 HCV感染的Huh7.5.1细胞CTHRC1 mRNA和蛋白的表达水平较对照细胞高,与健康对照组相比,丙肝患者CHTRC1血清学水平显著升高(P<0.05)。结论 HCV能够在体内外上调CTHRC1的表达。

胶原三螺旋重复蛋白1(Cthrc1)及CD34在瘢痕疙瘩中的表达及其意义

目的探讨胶原三螺旋重复蛋白1(Cthrc1)在瘢痕疙瘩中的表达及其与血管增生的相关性。方法采用免疫组化方法检测了34例瘢痕疙瘩组织及10例正常前胸皮肤组织中Cthrc1、CD34的表达。结果瘢痕疙瘩皮损中Cthrc1表达较其在正常人成纤维细胞中的表达显著增强(P<0.05),正常人成纤维细胞弱阳性表达或者不表达;瘢痕疙瘩皮损真皮乳头微血管数较正常人真皮乳头显著增多(P<0.05);瘢痕疙瘩皮损中Cthrc1的表达水平与血管密度计数(mi-crovessel density,MVD)均呈显著相关性(r=-0.4889,P<0.05)。结论 Cthrc1在瘢痕疙瘩皮损中表达异常,高水平的Cthrc1表达可能与瘢痕疙瘩侵袭性有关,并促进真皮乳头血管形成。

流感病毒对胶原三股螺旋重复蛋白1表达的影响

目的:探讨流感病毒对胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)表达的影响。方法:将流感病毒H3N2感染A549细胞,采用反转录PCR(RT-PCR)和Western印迹法检测细胞内CTHRC1 m RNA和蛋白表达的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清和流感患者血清中CTHRC1的水平,统计学分析其差异。结果:与对照细胞相比,感染H3N2的A549细胞m RNA和蛋白表达水平升高,且流感患者血清中CTHRC1的含量显著高于健康对照(P<0.05)。结论:流感病毒能够促进CTHRC1的合成和分泌。

水产胶原蛋白热稳定性与环境温度相关性研究进展

水产胶原蛋白是一种优良的生物材料,被广泛应用于医药、化妆品、食品加工等领域。但水产胶原蛋白热稳定性较差,且目前对其热稳定性与环境温度相关性的研究较少。本文详细论述水产胶原蛋白的三螺旋结构,对其热稳定性的来源作出详细分析,并以环境温度为主导因素,综述生存环境温度差异带来的水产胶原蛋白氨基酸组成变化、结构变化(亚基组成,翻译后修饰)与热稳定性差异。生存在较高温度下的生物,其胶原的变性温度(denaturation temperature, Td)也相对较高,且含有较高比例的α1亚基与较少的α2、α3亚基,反之亦然。这种亚基比例改变的实质可能涉及Ⅰ型胶原α1(Ⅰ)α2(Ⅰ)α3(Ⅰ)与α1(Ⅰ)2α2(Ⅰ)分子构型的互相转变。除上述变化,变温动物可以调节胶原翻译后修饰数量,辅助亚基比例的变化,增强或降低胶原的热稳定性,这是变温动物特有的一种能力。水产胶原蛋白的热稳定性随环境温度的变化而改变,是生物对环境适应能力的一部分。本文对现阶段关于胶原蛋白结构、热稳定性与环境温度相关性的研究进行总结,以期为胶原蛋白材料的研究与应用提供参考。

血清14-3-3η蛋白和胶原三螺旋重复蛋白-1及类风湿因子在类风湿关节炎诊断中的价值

目的血清14-3-3η蛋白和胶原三螺旋重复蛋白-1(CTHRC1)参与类风湿关节炎(RA)的发展过程,类风湿因子(RF)是首个应用于诊断RA的血清学指标,对评估RA病情的活动性和监测预后有重要参考价值。文中旨在分析血清14-3-3η蛋白、CTHRC1和RF在RA患者诊断中的临床应用价值。方法选取2020年2月至2021年2月于南昌大学第二附属医院风湿免疫科确诊的RA患者为RA组(n=153);选取同期本院诊治的非RA患者作为non-RA组(n=116),其中多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者41例、骨关节炎(OA)患者43例和强直性脊柱炎(AS)患者32例;选取本院同期健康体检者作为健康对照组(n=64)。采用ELISA法检测血清14-3-3η蛋白和CTHRC1水平,采用速率散射比浊法检测血清RF和CRP水平,分析比较3组研究对象各指标水平并绘制受试者工作曲线(ROC),评估各指标单独或两两联合检测在RA诊断中的价值。结果RA组血清14-3-3η蛋白、CTHRC1和RF水平显著高于non-RA组和健康对照组(P<0.01),且non-RA组中PM/DM、OA和AS患者的14-3-3η蛋白水平高于健康对照组(P<0.01)。当14-3-3η蛋白和CTHRC1的截断值分别为2.54(ng/mL)和244.45(ng/mL)时,其ROC曲线下面积分别为0.844和0.836,对RA有较高的诊断价值。诊断RA灵敏度最高的是CTHRC1(82.35%),特异度最高的是14-3-3η蛋白(89.44%)。阳性预测值、阳性似然比和约登指数也表明14-3-3η蛋白诊断RA的价值较高。串联检测时14-3-3η蛋白与CTHRC1特异度最高(97.36%),并联检测时CTHRC1与RF灵敏度最高(96.66%)。其中14-3-3η蛋白与CTHRC1的约登指数在并联时最高(0.61)。结论14-3-3η蛋白是诊断RA的高特异度指标,CTHRC1及RF可作为RA诊断的灵敏度指标,联合检测可明显提高RA的诊断效能。

胶原三螺旋重复蛋白1与转化生长因子-β在恶性黑色素瘤增殖及侵袭中的作用研究进展

近年来,胶原三螺旋重复蛋白1(Cthrc1)被证明有促进肿瘤细胞迁移和侵袭的作用,可抑制转化生长因子-β(TGF-β1)诱导的Ⅰ型胶原的表达,而两者在恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)中的单独或相互作用尚未明确。本文就Cthrc1在MM增殖及侵袭中的作用,及其与TGF-β的相互作用的研究进展进行综述,为MM发病机制及治疗提供一定思路。

胶原三股螺旋重复蛋白1基因真核表达载体的构建及其与microRNA-30b关系初探

目的 构建pCTHRC1-IRES2-EGFP真核表达载体,初步探讨胶原三股螺旋重复蛋白1基因(CTHRC1)与microRNA(简写为miR)-30b的关系。方法 设计特异性引物,通过PCR扩增合成含有CTHRC1 CDS+3′UTR区的序列,并克隆至pIRES2-EGFP真核表达载体,得到pCTHRC1-IRES2-EGFP真核表达载体。采用NheⅠ/XhoⅠ双酶切电泳和测序法进行鉴定;通过脂质体转染法转染Huh7及HepG2细胞评价转染效率;将miR-30b mimic、control、pCTHRC1-IRES2-EGFP质粒和pIRES2-EGFP质粒转染至293T细胞中,分别采用Western Blot和实时荧光定量PCR法检测转染48 h后CTHRC1蛋白的表达水平及miR-30b的表达水平,初步探讨CTHRC1基因与miR-30b的关系。两组间比较采用独立样本t检验。结果 采用NheⅠ/XhoⅠ双酶切pCTHRC1-IRES2-EGFP真核表达载体,得到5300 bp和1100 bp两条片段,与预期结果一致,测序结果也显示序列与GeneBank公布序列完全一致,表明pCTHRC1-IRES2-EGFP真核表达载体构建成功。2 μg和4 μg的pCTHRC1-IRES2-EGFP质粒转染Huh7及HepG2细胞,转染效率分别可达90%、89%和85%、83%。在293T细胞中,miR-30b组CTHRC1表达下降(P<0.05)。而过表达CTHRC1组中miR-30b的表达下降(P<0.05)。结论 成功构建了pCTHRC1-IRES2-EGFP真核表达载体;在293T细胞中,CTHRC1基因表达与miR-30b的表达水平相反。

新型生物医用材料A型重组Ⅲ型人源化胶原蛋白

胶原蛋白是人体重要的细胞外基质成分,具有着特殊的“三螺旋”结构,既是结构蛋白又是功能蛋白,也是 重要的生物医用材料。目前市场主流的胶原蛋白主要是通过动物组织提取获得,无法避免种属差异带来的免疫原 性及动物病原体风险,同时,低丰度胶原蛋白无法通过动物组织提取获得。利用合成生物制备重组胶原蛋白是胶 原蛋白产业发展趋势,尤其是通过功能区策略制备的重组人源化胶原蛋白,不仅能够避免免疫原性,还可保障胶原 良好的生物相容性与活性。本文重点介绍山西锦波生物医药股份有限公司 A 型重组Ⅲ型人源化胶原蛋白新材料 的研发历程,同时分析其可能的创新应用场景。首先,通过高通量筛选获得具有 164. 88°特殊三螺旋结构的人Ⅲ型 胶原蛋白核心功能区。随后对该功能区进行 16 次线性重复,获得 A 型重组Ⅲ型人源化胶原蛋白,其氨基酸序列中 无任何外源非人胶原蛋白序列。经多种方法检测,其具有三螺旋结构,与细胞互作时不进入细胞,通过改善细胞外 基质,有效发挥修复再生功效,有望在皮肤损伤修复、妇科、心血管科、骨科、口腔科等领域发挥重要作用。目前,其 在重组胶原注射领域占据主要市场地位,突破 40 年仅有动物胶原注射的时代。

微波辐照对胶原蛋白三股螺旋结构的影响

胶原蛋白的三股螺旋结构是其不同于其他蛋白质的特殊结构,也是其具有特殊功能的基础,然而,胶原的三股螺旋结构易在外界条件的影响下被破坏。目前微波已被越来越多的应用于胶原蛋白的提取和改性过程,但是关于微波辐照对胶原蛋白结构影响的研究还相对较少。首先从牛跟腱中提取胶原蛋白,然后采用0.5mg·mL^(-1)的胶原蛋白溶液在30℃下以微波辐照保温为实验样,水浴加热和未经加热处理为对比样,最后采用紫外-可见光谱、傅里叶变换红外光谱、圆二色谱以及荧光发射光谱等方法,对不同加热方法中胶原蛋白的三股螺旋结构和超分子结构进行表征,研究了微波辐照对胶原蛋白结构的影响。实验结果表明,在低于胶原变性温度的条件下,无论是微波辐照还是水浴加热都不会破坏胶原蛋白的三股螺旋结构,也不会使胶原蛋白变性。但是,与水浴加热相比,微波辐照会对胶原蛋白的聚集行为产生抑制作用。微波辐照对胶原蛋白的作用既有与常规加热相同的热效应,又有常规加热过程中不存在的非热效应,非热效应表现为抑制胶原蛋白的聚集行为。研究结果可为微波场中胶原蛋白结构和性质的变化提供科学依据。

胶原三股螺旋重复蛋白1在宫颈癌中的表达及其意义

目的检测宫颈癌组织中胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)的表达情况,探讨其与HR-HPV病毒定量、宫颈癌的临床病理因素及预后的关系,评价其在宫颈癌发生发展及预后中的价值。方法选取2009年1月至2013年5月于南方医科大学珠江医院治疗的112例具有完整临床病理及随访资料的宫颈癌患者作为宫颈癌组,另选取同期因存在宫颈病变至本院进行手术治疗的28例患者宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织作为CIN组,选取同期因子宫脱垂或子宫肌瘤至本院进行全子宫切除手术的30例患者作为正常组,采用免疫组织化学方法检测3组中CTHRC1的表达情况,采用HC-2法检测不同宫颈组织中HR-HPV定量,探讨CTHRC1表达与HR-HPV病毒定量、宫颈癌的临床病理因素及预后的关系。结果宫颈癌组、CIN组CTHRC1阳性率高于正常组,且宫颈癌组高于CIN组,差异有统计学意义(P<0.05);复发宫颈癌组织中CTHRC1阳性表达率明显高于未复发宫颈癌组织,复发后宫颈癌组织中CTHRC1阳性表达率明显高于复发前(P<0.05);CTHRC1的阳性表达与宫颈癌组织分化情况、淋巴结转移与否以及TMN分期相关,差异有统计学意义(P<0.05);CTHRC1阳性表达与宫颈癌患者HR-HPV定量密切相关;Kaplan-Meier生存分析显示,CTHRC1阳性组的宫颈癌患者无病生存和总生存时间明显短于CTHRC1阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);COX回归分析表明,CTHRC1的高表达是宫颈癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论CTHRC1的阳性表达率在宫颈癌的发生、发展及复发的过程中逐渐升高,且与HR-HPV病毒定量、宫颈癌TMN分期、淋巴结转移和组织分化情况等临床病理特征密切相关。此外,高表达的CTHRC1是宫颈癌患者的总生存的独立预后因子,提示CTHRC1可能作为评价宫颈癌发生、发展的有效指标,在预测宫颈癌病情转归方面具有一定价值。

联合质谱法与光谱法探讨辐照前后医用胶原蛋白海绵的三螺旋结构及变化

目的探讨辐照灭菌前后医用胶原蛋白海绵的三螺旋结构及变化。方法使用热裂解气质联用仪(Py-GCMS)对γ-射线辐照前后的胶原蛋白海绵进行测试,通过分析裂解组分探讨其三螺旋结构及变化。使用拉曼光谱技术佐证辐照前后胶原蛋白海绵三螺旋结构的变化,进一步通过对样品的圆二色光谱数据进行计算来分析判断辐照前后三螺旋结构的完整性是否改变。结果辐照后胶原蛋白海绵的局部肽链断裂导致交联度降低,但是其完整的三螺旋结构得以保持。结论该工作可为胶原蛋白相关研究提供实验参考,为胶原蛋白海绵的生产企业提供技术支撑。

胰蛋白酶消化法测定牛胶原蛋白三股螺旋结构的含量

本研究建立了一种测定胶原蛋白的三股螺旋结构含量的方法。该方法通过使用柱前衍生高效液相色谱(HPLC)法表征经胰蛋白酶酶解后胶原蛋白羟脯氨酸(Hyp)质量浓度的变化,进而对胶原蛋白的三股螺旋结构进行定量。探讨了不同的酶解时间(0~48h)、酶与底物的比例(1∶100、1∶50和1∶20)和温度(20、25、30、37℃)对明胶降解率的影响。获得了酶解的最佳条件——当胰蛋白酶与底物的比例为1∶50时,25℃酶解3h。使用该方法对明胶胶原蛋白混合液检测,结果表明,该方法能灵敏(RSD<10%)的测定胶原蛋白三股螺旋结构的含量。该方法不仅可用于生物组织研究领域,也可用于胶原蛋白食品、保健品和组织工程产品质量的评价。

冷冻研磨对胶原蛋白分子结构及性能的调控

采用冷冻研磨技术将商品化天然牛跟腱胶原蛋白(海绵状)处理成粉末,采用凝胶电泳、FTIR、圆二色谱、AFM、SEM、DSC考察了冷冻时间对胶原蛋白分子结构和理化性能的影响,并评价了其对小鼠成纤维细胞的促细胞增殖性能。结果显示,冷冻时间会影响胶原蛋白的三螺旋结构及分子间相互作用力。短时间的冷冻研磨(12 h以内)会对胶原蛋白分子的肽链结构产生一定影响,冷冻24 h后(样品COL24h)该影响可降至最低。COL24h的三螺旋结构最完整,且其体外组装成纤维的能力未受影响。研磨样品的水溶性(4℃)随预冻时间的增加而增加,与对照组(COL)相比,COL24h在水中的溶解度提高了近3倍。冷冻研磨对胶原蛋白分子的热变性温度影响不大,对其热变焓值影响较大,但随着冷冻时间的延长,产生的影响也逐渐降低。研磨后胶原蛋白溶液整体黏度降低,流动性更好。COL24h具有更强的促细胞增殖能力。