PDGF-B链基因三链形成寡核苷酸对C_6胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察PDGF B链基因三链形成寡核苷酸 (triplex formingoligonucleotide ,TFO)对C6胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响。方法 应用免疫荧光流式细胞技术观察PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF B、PCNA表达的影响。应用流式细胞技术观察PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细胞细胞周期的影响。结果 PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF B链基因、PCNA的表达有明显抑制作用 ,而且抑制作用存在浓度依赖性。PDGF B链基因TFO能使C6胶质瘤细胞S期的百分率明显降低 ,阻止细胞由静止期 (G0 G1期 )进入 (S期 )。结论 PDGF B链基因TFO能够抑制C6胶质瘤细胞PDGF B链基因的表达 ,阻碍细胞进入S期 。

载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸PEG-PLGA纳米粒子的制备与应用

【目的】以生物可降解材料聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PEG-PLGA)制备载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸的纳米粒子(TFO-NPs),并初步探讨其对前列腺癌LNCaP细胞的生长抑制作用。【方法】采用改良自乳化溶剂挥发法(modified-SESD)制备TFO-NPs,对其形态、包封率、载药量及体外释放特点进行鉴定。倒置荧光显微镜观察LNCaP细胞对TFO-NPs的摄取情况,四唑盐(MTT)法测定体外细胞毒作用。【结果】制备的TFO-NPs呈球形、大小均匀,平均粒径128nm,平均包封率和载药量分别为72.28%和1.02%,在体外具有缓释作用。LNCaP细胞对TFO-NPs的摄取率显著高于裸TFO。TFO-NPs对LNCaP细胞的抑制作用明显强于裸TFO(P<0.05),抑制率分别为61.2%±6.5%和20.7%±3.1%。【结论】本法制备的TFO-NPs理化性质优良,在体外能够有效抑制LNCaP细胞的增殖。

三链DNA

三链ＤＮＡ吴永文，黄熙泰（南开大学，生命科学学院）一．双螺旋ＤＮＡ与三链ＤＮＡ１９５３年华森（Ｗａｔｓｏｎ）和克里克（Ｃｒｉｃｋ）发现了ＤＮＡ的双螺旋结构，被公认为生物界最广泛的遗传信息载体的普遍存在形式。为此，二人获得了诺贝尔奖金。事隔４年之后，福...

寡聚核苷酸多种不同结构的圆二色谱研究

寡聚核苷酸在一定条件下可形成双链、三链、四链等多种不同结构 ,这些结构的CD谱存在明显的不同 .其共同的谱图特征是在 2 40nm处有一负峰 ,而在 2 6 0～ 30 0nm处则表现出各自的特异性 ,许多因素诸如 :各条链的极性 ,糖环的折叠 ,核苷键的取向以及碱基的堆积和序列等均不同程度地影响其结构而使其谱图展示出多样性和复杂性 .通过对这些谱图的比较和研究 ,将有助于我们对其结构的了解和新结构的预测 ,从而为进一步探索其潜在的生物学功能提供了依据 .

PEG-PLGA纳米粒子介导反基因寡核苷酸体外抗前列腺癌作用研究

目的验证包载反雄激素受体基因三螺旋形成寡核苷酸(TFO)的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PEG-PLGA)纳米粒子(TFO-NPs)对前列腺癌细胞的生长抑制作用。方法采用改良自乳化溶剂挥发法制备TFO-NPs并进行体外物化表征。将TFO-NPs、脂质体包载的TFO(TFO-Lip)和裸TFO分别转染体外培养的LNCaP细胞,倒置荧光显微镜观察转染效率,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR和Westernblot方法检测AR基因表达。结果TFO-NPs平均粒径128nm,载药量为1.02%,包封率为72.28%,在体外具有缓释作用。LNCaP细胞对TFO-NPs和TFO-Lip的摄取率显著高于裸TFO。TFO-NPs和TFO-Lip对LNCaP细胞的抑制率分别为(54.5%±6.2%)和(50.6%±6.1%)显著高于裸TFO,(7.8%±0.8%)(均P<0.05)。TFO-NPs和TFO-Lip处理组LNCaP细胞的雄激素受体表达水平显著低于裸TFO处理组。TFO-NPs和TFO-Lip处理组的转染效率、细胞抑制率和雄激素受体表达水平差异均无显著性。结论成功制备了TFO-NPs,为反基因治疗前列腺癌的研究提供了有效基因载体。

CpG ODN在免疫佐剂中的研究新进展

在含胞嘧啶(Cytosine)、鸟嘌呤(Guanine)的二核苷酸序列(CpG)的基础上,通过非甲基化修饰后的寡聚脱氧核苷酸链(CpG ODN)是一种具有广阔前景的新型佐剂,这是一类包含1个或多个CpG基本结构、可人工合成的单链DNA。不同结构类型的CpG ODN会刺激机体产生不同的免疫应答效果。其免疫刺激作用与激活TLR9相关,在此基础上通过直接活化树突状细胞、巨噬细胞和B细胞,增强抗原提呈能力,促进抗体的分泌;间接活化T细胞和NK细胞等免疫效应细胞,增强其功能及细胞因子的分泌,诱导Th1型免疫应答,产生细胞及体液免疫。现有资料显示一定安全剂量范围内的CpG ODN可增强针对预防性的感染性疾病疫苗和预防性或治疗性的肿瘤疫苗的免疫效应。对CpG ODN与其他免疫佐剂联用的研究和改进是提高其临床应用有效性的重要手段。文章简述CpG ODN作为佐剂的研发进程,追踪其作为高效低毒的免疫佐剂的研究进展,展望其在免疫佐剂方面的广阔应用前景。文章从CpG ODN作为佐剂的研究历程、分类、免疫活性及动物疫苗应用等方面介绍其研究进展。