下调METTL5通过Wnt/β-catenin信号通路抑制三阴乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭

目的探讨甲基转移酶5(methyltransferase-like 5,METTL5)在三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中的作用和潜在机制。方法采用免疫组织化学方法和Western blot检测TNBC肿瘤组织和细胞系中METTL5的表达情况。用靶向METTL5的shRNA(shRNA-METTL5)转染TNBC细胞后,用CCK-8、集落形成、伤口愈合以及Transwell实验分别检测细胞增殖活性、迁移与侵袭,Western blot检测Wnt/β-catenin信号关键蛋白的表达。构建异种移植瘤模型,验证敲降METTL5对TNBC细胞在体内生长以及Wnt/β-catenin信号活性的影响。结果METTL5在TNBC肿瘤组织和细胞系中表达上调(P<0.01)。敲降METTL5可抑制TNBC细胞的增殖、迁移和侵袭并降低了Wnt/β-catenin信号分子β-catenin、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-7的表达(均P<0.01)。体内实验显示,敲降METTL5减缓了移植瘤生长和Wnt/β-catenin信号活性。结论敲降METTL5能抑制TNBC细胞的增殖、迁移与侵袭,其作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴调控铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移

目的探索circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴对铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移的影响机制。方法检测circ0000799在乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中的表达。沉默亲代三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231和子代脑转移细胞MDA-MB-231-BM中circ0000799的表达。比较各组细胞生长、侵袭能力、脑转移结节数目。使用双荧光素酶报告基因实验验证circ0000799、miR-1287-5p、GPX4调控关系。检测circ0000799对铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)表达和总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比的影响。结果与人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)或癌旁组织比较,circ0000799在三阴乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中上调,且在子代三阴乳腺癌细胞系及脑转移灶中上调最为显著(P<0.05)。与sh-circCTR组比较,sh-circ0000799组细胞生长、侵袭能力降低(P<0.05)。sh-circCTR组、sh-circ0000799组、sh-circ0000799+RSL3组脑转移结节数量依次降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,circ0000799可与miR-1287-5p相互作用,miR-1287-5p可与GPX4相互作用。与sh-circCTR组比较,sh-circ0000799组miR-1287-5表达增加,总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比和GPX4表达降低(P<0.05)。与miR-CTR组比较,miR-1287-5p组GPX4 mRNA表达降低(P<0.05)。结论circ0000799在三阴乳腺癌中高表达且可能通过miR-1287-5p/GPX4轴促进三阴乳腺癌脑转移。

STARD7蛋白新型小分子抑制剂Lasiodin激活NRF2/EGR1通路诱导三阴乳腺癌铁死亡

目的探讨StAR相关脂质转移结构域包含7(STARD7)在三阴乳腺癌(TNBC)中的表达情况及其与预后的相关性。高通量筛选STARD7的小分子抑制剂,研究其小分子抑制剂对TNBC的影响及潜在分子机制。方法生物信息学分析STARD7在各亚型乳腺癌中的表达情况以及与预后的相关性。Westernblot和免疫组化检测细胞系以及临床TNBC样本中STARD7的表达情况。以STARD7为靶点,通过分子对接、体外蛋白纯化和体外分子互作实验,筛选并鉴定STARD7的小分子抑制剂。CCK8测定对照组(DMSO组)及1、2、5、10、20μmol/L浓度Lasiodin处理24 h后的TNBC细胞的存活率,确定最佳药物作用浓度。台盼蓝和YO-PRO-1染色测定各组细胞死亡率,Westernblot测定各组凋亡、铁死亡相关蛋白表达;RT-qPCR及Western blot分别测定NRF2、HO-1、KEAP1、EGR1的mRNA和蛋白表达。构建TNBC移植瘤模型并随机分为对照组、紫杉醇组(10 mg/kg)和Lasiodin组(10 mg/kg),分别处理后测定肿瘤体积、裸鼠体重,HE染色评价生物安全性。结果生物信息学分析及体外实验表明STARD7在TNBC组织及细胞中高表达,且与患者预后负相关(P<0.05);高通量筛选并鉴定出Lasiodin是STARD7的小分子抑制剂;Lasiodin对STARD7的抑制可能通过调控下游NRF2/EGR1通路相关蛋白的表达促使TNBC细胞发生铁死亡,同时伴有凋亡和坏死。体内实验证明Lasiodin能够抑制肿瘤生长(P<0.05),且未观察到明显的不良反应。结论STARD7可能在TNBC的进展中发挥重要的调控作用,Lasiodin为其小分子抑制剂,提示STARD7和Lasiodin分别可能成为治疗TNBC的潜在靶点和新型药物。

乳岩宁对三阴乳腺癌荷瘤裸鼠Notch1信号通路的作用机制

目的 观察乳岩宁方与卡培他滨联用对MDA-MB-231乳腺癌荷瘤裸鼠的瘤组织中Notch1信号通路的作用。方法 用对数生长期的MDA-MB-231细胞悬液,于裸鼠左侧胸壁接种,成功长出瘤组织后将其移植到未接种裸鼠的胸壁,建立三阴乳腺癌模型,共40只荷瘤裸鼠,分5组,每组8只,日1次灌胃,连续21 d灌药。观察裸鼠状态并计算肿瘤组织的抑制率;免疫印迹法测定Notch 1、Notch1受体的细胞内结构(Notch1 intracellular domain, NICD1)、与YRPW基序相关的发状分裂增强子1(Hairy and enhancer of split related with YRPW motif 1,Hey1)、发状分裂相关增强子1(Hairy and enhancer of split Homolog 1,Hes1)、髓细胞增生原癌基因(Cellular myelocytomatosis oncogene, C-myc)的蛋白表达量;实时荧光定量PCR测定Notch 1、Hey1、Hes1、C-myc的基因表达量。结果 与模型组对比,中药、西药和中药+西药组的肿瘤质量均有明显减轻,差异有统计学意义(P<0.01),3组的抑瘤率分别为33.11%、59.60%、65.93%。免疫印迹法结果表明,与模型组相比,中药组、西药组、中药+西药组的Notch 1、NICD1、Hey1、Hes1、C-myc蛋白水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);而Notch 1和Hes1的蛋白表达水平在中药组和西药组中水平相当,差异无统计学意义(P>0.05);中药+西药组较西药组中Hes1蛋白表达水平明显减低,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量结果表明,与模型组相比,中药组、西药组、中药+西药组Notch 1、Hey1、Hes1、C-myc的mRNA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与西药组相比,中药组与西药组Notch 1、Hes1、C-myc的mRNA水平相当,差异无统计学意义(P>0.05);中药+西药组较西药组中Notch 1及Hey1的mRNA水平明显减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 疏肝理气中药复方乳岩宁能够抑制三阴乳腺癌荷瘤裸鼠的肿瘤生长,其作用机制与三阴乳腺癌中的Notch1信号通路受到抑制相关。为疏肝理气中药治疗三阴乳腺癌,尤其是影响乳腺癌Notch1信号通路方面提供了实验依据。

基于三阴理论探析运动神经元病

运动神经元病在临床上属于难治性疾病,起病隐匿,病情迁延不愈,预后不良,临床上多从脏腑辨证入手。区别于采用传统的单一辨证体系,文章从《伤寒论》三阴三阳辨证体系之三阴角度出发,蕴含脏腑、经络、八纲、三焦辨证以及运气学说的内容来探析运动神经元病的整体病机及治疗方法,认为疾病早期病在太阴,以气虚湿蕴为主,随着病程进展传至少阴、厥阴而引发的相应病变是其主要发病过程,亦有病邪直中少阴、厥阴而引发疾病危象的情况。治疗上以补益三阴为主,同时兼顾祛邪解毒,并联合经络理论来施治。从三阴病的角度来探讨疾病的整个发病过程及治疗思路,旨在对疾病的发生发展作出更为全面的理解和精准的辨证,以期不断完善对运动神经元病的临床治疗。

环状RNA在三阴乳腺癌中的研究进展

三阴乳腺癌(TNBC)是乳腺癌中恶性程度最高的亚型,其特征为不表达雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2。TNBC具有易侵袭和转移、预后不良、对常规化疗或靶向治疗效果不佳的临床特点。研究表明,环状RNA(circRNA)在TNBC组织表达异常,并与TNBC患者的临床病理特征和预后相关。circRNA可通过调控转录和剪接、作为微小RNA海绵、与蛋白质结合以及作为翻译模板,参与TNBC肿瘤细胞增殖、转移和耐药过程。因此,circRNA在TNBC的早期诊断、临床治疗和预后监测方面有广泛的应用前景。本文阐述了circRNA的形成和作用机制,并总结了circRNA在TNBC中的生物学功能和临床意义。

成都老官山汉墓髹漆人像足三阴脉循行考证

成都老官山汉墓出土的经穴髹漆人像是迄今为止我国发现的最早、最完整的经穴人体医学模型。结合早期经脉相关文物文献及同墓穴出土的《天回医简·脉书·下经》,对老官山汉墓经穴髹漆人像足太阴脉、足厥阴脉、足少阴脉进行考证,研究其循行方向及路径特点,对于研究早期经络理论的形成、发展与演变有着重要的学术价值。

基于足三阴经筋理论的小针刀松解疗法联合桃红四物汤治疗早中期股骨头坏死研究

目的 研究在足三阴经筋理论指导下的闭合性小针刀松解疗法联合桃红四物汤治疗早中期股骨头坏死的临床效果。方法 选取2020年6月至2023年6月在该院就诊的72例早中期股骨头坏死患者作为研究对象,对其临床资料进行回顾性分析。根据治疗方案不同将患者分为2组,其中38例接受足三阴经筋理论指导下的闭合性小针刀松解疗法联合桃红四物汤治疗(观察组),另34例接受常规闭合性松解术治疗(对照组)。比较2组治疗效果,以及治疗前后髋关节功能、疼痛程度及生活质量评分。结果 观察组患者整体疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后3、6个月时,观察组患者Harris髋关节功能评分高于对照组,视觉模拟评分法评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后6个月时,观察组患者生理功能、躯体疼痛、活力、情感职能、社会功能、生理职能、精神健康及总体健康等简明健康状况调查问卷评分显著高于对照组,全血黏度高切、低切及血浆黏度水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 基于足三阴经筋理论指导下的小针刀松解术联合桃红四物汤治疗早中期股骨头坏死患者效果显著,有助于改善患者血液流变学,减轻躯体疼痛,提高患者生活质量。

《黄帝内经》五脏辨证与《伤寒论》六经辨证中三阴病关系研究

脏腑理论体系是《黄帝内经》中的核心理论体系,五脏辨证是《黄帝内经》中重要的辨证方法,也是目前较为普遍的辨证方法。《伤寒论》的六经辨证体系是经过临床实践的行之有效辨证方法。现将五脏辨证与六经辨证中的三阴病进行了结合,总结出太阴与脾相通应,少阴与肾、心相通应,厥阴与肝相通应的观点,并将三阴病进行了分型,使五脏辨证与六经辨证得以转化,能够丰富对《伤寒论》辨证思路的理解,从而为学习和应用《伤寒论》提供新路径。

CTC、RON及c-Met在早期三阴性乳腺癌预后预测中的作用

目的 分析循环肿瘤细胞(CTC)、受体酪氨酸激酶(RON)及间质表皮转化因子(c-Met在早期三阴性乳腺癌(TNBC)预后预测中的作用。方法 分析2018年1月至2021年1月于郑州大学第一附属医院进行诊治的1 225例乳腺癌患者资料,根据纳入标准最终选取168例TNBC患者设为研究组,选取患者癌旁3 cm的组织为对照组,另选取同时期在本院进行健康体检者168名为健康组。根据患者治疗后的预后情况将研究组分为预后良好组(n=142)以及预后不良组(n=26)。比较研究组与健康组CTC的表达情况,比较研究组与对照组c-Met与RON的表达情况,采用多元Logistic回归分析影响TNBC预后的独立危险因素;并通过受试者工作特征曲线(ROC)分析c-Met、RON、CTC对TNBC患者预后的预测价值。结果 研究组CTC水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组c-Met与RON阳性表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);预后良好组、预后不良组年龄、肿瘤直径比较差异无统计学意义(P>0.05),预后良好组、预后不良组腋窝淋巴结、体重指数、糖尿病、RON、c-Met、CTC比较,差异有统计学意义(P<0.05),经非条件多因素logistic回归模型分析显示,腋窝淋巴结转移、CTC阳性、RON阳性、c-Met阳性为TNBC患者预后的危险因素(P<0.05)。CTC、RON及c-Met单独检测以及三者联合检测AUC分别为0.764、0.778、0.776、0.857,其中三者联合检测AUC值最大。结论 联合检测RON、c-MET、CTC水平对TNBC患者预后具有一定的预测价值。

基于“三阴三阳开阖枢”理论浅谈肺肾气虚型肺胀

传统中医学认为,肺胀往往与机体脏腑运行失常联系紧密,其中肺肾气虚是肺胀重要的发病机理之一。历代医家认为肺胀的论治通常要归于脏腑辨证,肺为气之主,肾为气之根,平衡肺肾气机为常规的诊疗思路。三阴三阳开阖枢理论重点阐述阴阳离合运动的六种象态,是对机体的生理功能、病理状态及其相互关系的概括,也是中医基础理论重要的组成部分。文章一改传统的脏腑辨证思路,运用三阴三阳开阖枢理论解读肺肾气虚型肺胀的起病原理和病势动态的发展,具有一定创新性,可为临床治疗肺肾气虚型肺胀提供新的诊疗思路,具有一定的指导价值和推广意义。

敲低核糖体发生蛋白BRIX1能够抑制三阴乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨核糖体生物发生蛋白BRX1同源物(BRIX1)在三阴乳腺癌(TNBC)中的功能。方法通过GEPIA2数据库分析BRIX1在正常组织和三阴乳腺癌的表达差异;设计两条siRNA并分别转入三阴乳腺癌细胞系HS578T和MDA⁃MB⁃231细胞内沉默BRIX1的表达,利用Western Blot验证BRIX1的敲低效率;使用CCK⁃8和集落克隆形成实验检测敲低BRIX1后细胞的增殖情况,使用Transwell实验检测敲低BRIX1后细胞的侵袭迁移能力;使用MDA⁃MB⁃231细胞,分为三组分别转入siNC、siBRIX1#1、siBRIX1#2后提取细胞的total RNA进行RNA⁃seq检测,进行基因表达差异分析。结果GEPIA2数据库结果显示三阴乳腺癌中高表达BRIX1(P<0.05),在HS578T和MDA⁃MB⁃231细胞内敲低,克隆形成数目减少(P<0.05);cck⁃8检测OD值减弱,证明敲低BRIX1后细胞增殖活性下降;TranswellTM实验显示敲低BRIX1后,乳腺癌侵袭迁移能力减弱;RNA⁃Seq数据进行GO功能富集分析生物学过程(BP),分子功能(MF),细胞组成(CC),最终展示了top10相关性较高的信号通路,结果显示敲低BRIX1后,ERBB⁃ERK信号通路和WNT信号通路被激活,P53信号通路被抑制。结论BRIX1基因敲低后明显抑制三阴乳腺癌细胞的增殖能力和迁移侵袭,提示BRIX1基因具有成为三阴乳腺癌治疗的潜在分子靶点。

林雁从三阴寒毒分层辨治慢性骨髓炎经验

林雁认为慢性骨髓炎的病因病机是正虚蕴蓄寒毒,提出将以脉证为核心的慢性骨髓炎“五大证候”(脉、骨、脓、肿、全身症状)与三阴层次、脏腑气血联系起来进行辨证的观点,并运用中西医结合分层法将本病分为少阳太阴合病证(溃脓期)、少阴沉寒证(炎症静止期)、厥阴复阳证(急性发作期)、厥阴寒瘀证(骨痂瘢痕期)。治疗方面强调以“透彻寒毒”为基本治法,热风药、凉风药的运用贯穿始终,并根据各层次证候特点匹配针对性的治法,以提高临床疗效。附验案1则。

机器学习在三阴乳腺癌诊断、分型及预后中的应用价值

乳腺恶性肿瘤对女性健康存在严重威胁,其中以三阴乳腺癌的恶性程度最高、预后最差,且诊断尤其困难。传统诊断方法的诊断结果准确性受操作者专业能力等影响,导致一定的假阴性率或假阳性率。随着计算机技术的不断发展,机器学习在肿瘤预测中的应用越发广泛,为辅助临床带来了显著成效。本文对国内外既有的关于机器学习在三阴乳腺癌多方面应用的文献进行综述,以期为未来机器学习在三阴乳腺癌中的应用发展提供参考。

从“六经辨证,治从三阴”论治白癜风

《伤寒论》六经辨证体系是张仲景从《内经》五脏辨证基础上发展而来,对于现代疑难疾病的治疗具有重要意义。白癜风属皮肤科易诊难治性皮肤病,一般治疗方法仍具有局限性,因白斑常出现在暴露部位,给患者带来沉重的心理负担,运用经方治疗白癜风,方证相符,效如桴鼓。白癜风在临床中常常表现为太阴、少阴、厥阴三阴合病的病理状态。笔者运用当归芍药散、干姜黄芩黄连汤、四逆汤等方剂以疏肝、健脾、温肾,再配以毫火针借火助阳、扶助正气,可达破冰之效,药针同用,三阴同治,收效良多,形成了诊治白癜风“六经辨证,治从三阴”的创新诊疗思路和特色诊疗方案。

PI3K/AKT/mTOR信号通路在三阴乳腺癌靶向治疗中的研究进展

三阴乳腺癌(TNBC)为乳腺癌重要亚型,因其三阴性特点导致分子靶向治疗效果较差,临床多采用新辅助化疗治疗TNBC,但疗效一般,预后差。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶点(PI3K/AKT/mTOR)信号通路及解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)在多种肿瘤中都出现异常激活状态,是抗肿瘤的重要靶点。本文结合近年来相关文献,对PI3K/AKT/mTOR信号通路及ADAM17在肿瘤发生中的作用机制、相关靶点及TNBC靶向治疗中的研究进行汇总与分析,以期为多靶点联合治疗TNBC提供新思路。

足三阴经循经灸法治疗踝部骨折术后血瘀气滞型患者夜间肿痛临床观察

目的探讨足三阴经循经灸法治疗踝部骨折术后血瘀气滞型患者夜间肿痛的疗效和机制。方法选取2020年12月—2022年5月在深圳平乐骨伤科医院康复科住院收治的踝部骨折术后血瘀气滞型患者80例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组给予骨折术后常规康复治疗,观察组在对照组基础上给予足三阴经循经灸法治疗。2组患者均治疗1周。比较2组患者治疗前后VAS、关节肿胀评价量表、PSQI、SAS、SDS评分。结果2组患者治疗前VAS、关节肿胀评价量表、PSQI、SAS、SDS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组VAS、关节肿胀评价量表、PSQI、SAS、SDS低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论足三阴经循经灸法可缓解踝部骨折术后血瘀气滞型患者肿痛,尤其是缓解了夜间疼痛不适的症状,改善了睡眠,提高了康复效率和质量。

整形保乳手术治疗早期三阴乳腺癌的效果评价

目的分析整形保乳手术治疗早期三阴乳腺癌的效果。方法回顾性分析2019年1月至2022年1月本院收治的89例早期三阴乳腺癌患者的临床资料,将其分为采用常规保乳手术治疗的对照组(45例)和采用整形保乳手术治疗的研究组(44例),分组方法为手术方法不同。两组均术后随访2年。比较两组手术相关参数,血清YKL-40、TGF-β、CA153水平(术前及术后6个月),并发症发生情况(住院期间),以及生存、复发、转移情况及乳房美观度(术后2年)。结果研究组切除标本体积较大,手术时间及切除标本手术切缘(最小、最大)较长,住院时间较短(组间比较),差异有统计学意义(P<0.05);对照组、研究组比较,两组血清YKL-40、TGF-β、CA153水平均降低(术后6个月相较于术前),有差异(P<0.05);术后2年,对照组、研究组比较,后者乳房美观总优良率高于前者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论相较于常规保乳手术,早期三阴乳腺癌患者应用整形保乳手术不仅能够保障肿瘤控制效果,还可提升乳房美观度。

三陰乳腺癌PD-L1(SP142)與CTLA-4、PTEN表達的關係研究

目的探討三陰乳腺癌PD-L1(SP142)與CTLA-4、PTEN表達的關係和意義。方法收集鏡湖醫院2008年1月~2018年6月間病理科136例乳腺癌標本,按乳腺癌分子分型分為三陰乳腺癌(TNBC)、管腔A型、管腔B型及HER2型乳腺癌,採用免疫組化檢測各型乳腺癌PD-L1(SP142)、CTLA-4和PTEN表達情況,並分析它們之間的關係。結果136例乳腺癌中,32.4%的病例PD-L1(SP142)陽性,其中48%(24/50)TNBC、11.9%(5/42)管腔A型、20%(3/15)管腔B型和41.4%(12/29)HER2型PD-L1(SP142)陽性;43.4%的病例CTLA-4陽性,其中52.0%(26/50)TNBC、31.0%(13/42)管腔A型、33.3%(5/15)管腔B型和50.9%(15/29)HER2型CTLA-4陽性;28.0%的病例PTEN陽性,其中52.0%(26/50)TNBC、31.0%(13/42)管腔A型、33.3%(5/15)管腔B型和50.9%(15/29)HER2型PTEN陽性。TNBC的PD-L1(SP142)表達與CTLA-4表達呈正相關(Spearman=0.409,P<0.05),與PTEN表達呈負相關(Spearman=-0.318,P<0.05)。結論TNBCPD-L1(SP142)與CTLA-4表達的正相關關係,提示聯合免疫治療可能使TNBC患者獲益,而TNBCPD-L1(SP142)與PTEN表達的負相關關係,提示TNBC同時遭受免疫逃逸和基因突變的雙重打擊,因此適合免疫治療和靶向PTEN聯合治療。

多西他赛与吉西他滨联合顺铂在晚期三阴乳腺癌化疗中的效果

评估多西他赛与吉西他滨联合使用顺铂在晚期三阴乳腺癌化疗中的疗效。方法 纳入我院2020年1月~2022年5月期间的64例晚期三阴乳腺癌患者,依照治疗方案不同分为两组:多西他赛组(多西他赛联合顺铂治疗)和吉西他滨组(吉西他滨联合顺铂治疗),每组32例患者。对比两组患者的治疗效果。结果 观察到多西他赛组患者的治疗效果优于吉西他滨组(P<0.05)。结论 多西他赛联合顺铂治疗的应用可以显著提高晚期三阴乳腺癌患者的治疗效果。