液质联用技术鉴定至宝三鞭丸化学成分

目的建立HPLC-LTQ-Orbitrap MS和HPLC-QQQ MS/MS法分析至宝三鞭丸化学成分。方法采用分段供试品制备的前处理方式、高分辨质谱数据依赖的采集模式、HPLC-MS/MS靶向成分采集等综合研究策略鉴定成分。分析采用Waters BEH HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源(ESI);正负离子扫描。结果共鉴定出82个化合物,包括有机酸类18个、黄酮类17个、萜类及皂苷类11个、色原酮类8个、苯乙醇苷类4个、生物碱类3个、香豆素类3个、木脂素类2个、蒽醌类2个,其中30个通过与对照品保留时间及碎片离子信息比对而确认。结论本研究初步鉴定了至宝三鞭丸化学成分,为该制剂质量控制、作用机制研究提供了有力的支撑。

至宝三鞭丸基于Nrf2/HO-1通路的抗疲劳作用机制研究

目的通过观察至宝三鞭丸(Zhibao Sanbian Pills)对Nrf2/HO-1信号通路的影响,研究其对小鼠的抗疲劳作用及机制。方法将ICR小鼠随机分为正常对照组、至宝三鞭丸低剂量(0.958 g·kg^(-1))组、至宝三鞭丸中剂量(4.79 g·kg^(-1))组、至宝三鞭丸高剂量(9.58 g·kg^(-1))组,每组25只,连续给药35 d,记录体质量。采用负重游泳实验评价至宝三鞭丸的抗疲劳作用;比色法检测各组小鼠血清中的尿素氮(Urea nitrogen,UN)和乳酸(Lactic acid)水平;比色法检测各组小鼠肝组织中的糖原(Liver glycogen)含量;Western Blot检测各组小鼠肝组织中核因子红细胞2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、核孔糖蛋白62(Sequestosome 1,P62/SQSTM1)、血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶1(Quinone oxidoreductase 1,NQO1)的蛋白表达水平。结果与正常对照组比,至宝三鞭丸各剂量组可不同程度延长小鼠负重游泳时间,提高肝脏组织中糖原含量,下调血清中尿素氮水平,其中至宝三鞭丸高剂量(9.58 g·kg^(-1))组的差异具有统计学意义(均P<0.05);至宝三鞭丸虽具有降低乳酸堆积的作用趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);此外,至宝三鞭丸各剂量组均可提高肝组织中Nrf2、P62、HO-1和NQO1的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论至宝三鞭丸具有明显的抗疲劳作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路,从而提高机体的抗氧化能力有关。

至宝三鞭丸对腺嘌呤诱导的肾阳虚证大鼠模型的改善作用研究

目的:以腺嘌呤诱导大鼠肾阳虚证模型为研究对象,观察至宝三鞭丸对肾阳虚证大鼠的改善作用。方法:选取SD大鼠,在末次给药2 h后,测定各组大鼠体质量,检测大鼠睾丸系数、附睾系数、精囊腺系数等;显微观察大鼠精子数目,形态和活力;酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血清中雌二醇(E2)、睾酮(T)、促卵泡素(FSH)、黄体生成素(LH)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)水平;苏木精-伊红(HE)染色法观察肾脏、睾丸和附睾组织病理形态变化;Masson染色法观察肾脏组织的纤维化水平。结果:与正常组比较,至宝三鞭组大鼠肾阳虚症状改善,大鼠体质量、睾丸系数、附睾系数,精囊腺系数增加;大鼠精子数目增多;精子畸形率降低,精子活力增强;肾脏、睾丸、附睾等生殖器官的病理改变减少;肾脏的纤维化水平降低;并且至宝三鞭丸能够使E2、FSH、LH、DA、NE和5-HT等含量降低;同时还能够使T含量升高。结论:至宝三鞭丸可基于对下丘脑-垂体-性腺轴的调控改善腺嘌呤致肾阳虚证模型大鼠的肾阳虚症状,呈现出良好的补肾助阳功效。

至宝三鞭丸的抗疲劳和抗衰老作用

用小鼠游泳法测定抗疲劳作用,用组织内色素颗粒的数量为抗衰老的指标,以研究至宝三鞭丸的抗疲劳和抗衰老作用。结果指出,至宝三鞭丸对青壮小鼠无抗疲劳作用,对衰老小鼠有明显的抗疲劳和抗衰老作用,可使脾脏内色素颗粒明显减少。

基于高效液相色谱指纹图谱和化学模式识别的至宝三鞭丸质量一致性评价

目的 建立至宝三鞭丸的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并结合化学模式识别技术对不同批次制剂进行质量一致性评价。方法 采用HPLC法建立指纹图谱,以0.1%甲酸水和甲醇为流动相进行梯度洗脱,色谱柱为BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流速为0.2 mL·min^(-1);检测波长为203 nm;使用相似度评价、聚类分析和主成分分析等化学模式识别技术评价15批次至宝三鞭丸制剂的质量一致性。结果 在指纹图谱中,共标定了32个共有峰,其中5个色谱峰被指认为芍药苷、远志[口山]酮Ⅲ、丹皮酚、淫羊藿苷和蛇床子素。15批次至宝三鞭丸制剂相似度为0.841~0.979,15批次至宝三鞭丸制剂基本聚为一类,表明至宝三鞭丸的质量一致性尚可。结论 本研究建立的HPLC指纹图谱分析方法操作简单、准确、重复性好,结合化学模式识别分析可用于至宝三鞭丸整体质量的一致性评价。

至宝三鞭丸治疗神经衰弱150例临床观察与疗效分析

本文用至宝三鞭丸治疗神经衰弱１５０例，对２７例病人测试了记忆力、听力、视力及握力，用药４周后综合评分的平均值较用药前有明显增高，Ｐ＜０．０５。７８例男性病人性功能低下奏效率高达８０％以上，无副作用，是一种较理想的改善机体功能的强力补肾健脑药。

至宝三鞭丸中马钱苷的含量测定

目的建立RP-HPLC法测定至宝三鞭丸中马钱苷的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱：C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.5 g·L^-1磷酸溶液（1∶8∶4∶48）;检测波长：236 nm;流速：1.0 mL.min-1;柱温：40℃。结果马钱苷在0.018 5-0.738μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.998 4）,该制剂中马钱苷的平均回收率为99.7%,RSD为0.52%（n=5）。结论该方法简便,结果准确、可靠。

参茸三鞭丸质量标准研究

目的提高完善参茸三鞭丸的质量标准。方法采用TLC法对制剂中的淫羊藿、续断、木香进行定性鉴别;HPLC法测定处方中补骨脂的有效成分补骨脂素和异补骨脂素的含量,以甲醇-水(45∶55)为流动相,检测波长为246 nm。结果 TLC法可鉴别淫羊藿、续断、木香的特征斑点且空白无干扰;补骨脂素、异补骨脂素分别在0.0202～0.1212μg(r=0.9999,n=6)、0.0406～0.2436μg(r=0.9999,n=6)范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为101.20%、101.39%,RSD分别为0.41%、0.48%。结论提高后的质量标准具有专属性强、准确、重复性好的特点,可用于参茸三鞭丸的质量控制。

至宝三鞭丸对不育男性睾酮、黄体生成素、卵泡刺激素水平的影响

为探讨中药至宝三鞭丸治疗因男性精子因素致不育的疗效,对627例患者进行治疗,治疗前后行精液分析和检测血液生殖内分泌激素睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平,结果至宝三鞭丸可明显地增加血液睾酮水平和提高精子质量。

三鞭丸治疗血管性痴呆对事件相关电位影响的研究

目的：通过至宝三鞭丸（TSP）治疗血管性痴呆（VD）病人观察其对事件相关电位（ERP）的影响。方法：双盲安慰剂对照实验，选择59例符合DSM-Ⅲ-R标准的VD病人，随机分成2组，分别给予TSP6.25g，每日2次及安慰剂，共8周。比较治疗前后的长谷川痴呆量表（HDS）积分和ERPP309潜伏期及波幅。结果：TSP治疗8周后VD病人HDS积分显著改善（t=6.35,P<0.01)，而对波幅影响不大（t=0.47,P>0.05)。结论：TSP能改善VD病人的临床症状，显著缩短ERPP300潜伏期，改善认知功能。

墙内开花墙外香——四大出口名药之一“至宝三鞭丸”

专家眼中的三鞭前景 2003年8月9日,来自山东中医药大学及其附属医院、青岛大学附属医院、烟台山医院等医学科研机构和医疗单位的专家教授,以及全国各地药品流通领域的代表汇聚烟台养马岛,参加由中亚药业举办的"中亚至宝三鞭丸科技与市场研讨会".据与会专家多年的临床实践及他们对三鞭丸药理、制剂等各专项的研究,中亚至宝三鞭丸再次被证明是疗效确切的理想补肾药.其品质历经了70多年的考验而蜚声中外.随着国内人民生活水平的逐步提高和"非典"之后全社会健康意识的显著增强,倍受消费者推崇的中亚至宝三鞭丸势必会得到更广阔的市场发展空间和更光明的营销前景.

HPLC法测定海狗三鞭丸中淫羊藿苷含量

目的建立海狗三鞭丸中淫羊藿苷含量测定方法。方法采用HPLC法进行测定研究,色谱条件:采用Agilent Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以乙睛-水液(25:75)为流动相,检测波长270 nm,流速1.0 ml/min。结果HPLC法测定结果显示,色谱峰形好,分离度好,杂质无干扰,淫羊藿苷在0.200～2.00μg内呈现良好的线性关系,平均加样回收率为98.16%(RSD=1.12%),回归方程为y=2083.1x+12.775,r=0.9998。结论该方法分离度高、专属性强、重现好,可有效用于海狗三鞭丸中淫羊藿苷的含量测定。

至宝三鞭丸的定量“制剂质量标志物”研究

在至宝三鞭丸的定性“制剂质量标志物”的基础上,筛选出其定量“制剂质量标志物”,并评价至宝三鞭丸多个批次制剂间的含量一致性。建立同时测定至宝三鞭丸中34种化学成分的HPLC-MS/MS方法,分析16批次制剂中各成分含量的一致性,并采用一法通用策略分析各成分在中药制剂-血浆-脑组织-脑脊液的移行情况。方法经线性范围、加样回收率、精密度、稳定性和重复性等考察确证适合至宝三鞭丸中以上成分的测定。加样回收率为85.10%~105.07%,精密度RSD为1.37%~4.58%,重复性RSD为3.00%~12.45%。至宝三鞭丸中各成分含量均低于1 mg·g^(-1),含量和日用剂量耐斯糖最高,其次为松果菊苷、芍药苷、蛇床子素和丹皮酚;系统聚类分析结果显示至宝三鞭丸普通制剂之间的含量一致性较好;松果菊苷、毛蕊花糖苷、远志山酮Ⅲ、β-蜕皮甾酮、蛇床子素、23-乙酰泽泻醇B、甘草苷和甘草酸等的含量在批次间的差异较小。主成分分析结果显示,小檗碱、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、松脂醇二葡萄糖苷、细叶远志皂苷等的含量是影响批次间分组的主要因素。动物实验结果显示,蛇床子素、丹皮酚、甘草苷可被吸收入血,并通过血脑屏障进入脑组织。本研究的动物实验得到中国中医科学院中药研究所伦理委员会的批准(编号:2020B071)。研究确定以上31种成分是至宝三鞭丸中定量“制剂质量标志物”的基本组成。本研究建立的HPLC-MS/MS分析方法灵敏、准确和快速,可用于至宝三鞭丸的34种化学成分同时定量和多批次制剂的含量一致性评价,为至宝三鞭丸定量“制剂质量标志物”的筛选及质量控制研究提供了方法基础。

基于行为学实验和网络药理学的至宝三鞭丸改善小鼠学习记忆能力作用研究

目的研究至宝三鞭丸对学习记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的改善作用,探讨其作用机制。方法采用东莨菪碱诱导小鼠学习记忆障碍模型,采用Morris水迷宫实验、跳台实验和避暗实验评价小鼠学习记忆能力。采用TCMSP、TCMID数据库及文献检索至宝三鞭丸组方药物的化学成分,通过ADMETlab 2.0筛选潜在活性成分,利用Swiss Target Prediction数据库进行靶点预测,通过Metascape数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析,并构建PPI网络,进行MCODE模块分析。结果与模型组比较,至宝三鞭丸高剂量组小鼠水迷宫实验逃避潜伏期缩短(P<0.05),第四象限停留时间和穿越平台次数增多(P<0.05)。获得至宝三鞭丸组方药物863个活性成分,401个潜在靶点,至宝三鞭丸改善认知障碍的作用通路涉及神经活性配体-受体通路、钙离子信号通路、Ras相关蛋白-A(Rap1)信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号传导通路、5-羟色胺受体通路等。结论高剂量的至宝三鞭丸可改善学习记忆障碍模型小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与调节MAPK信号通路等多条神经功能相关的信号通路有关。

出自中华老字号的“神奇小红盒”——国宝名药中亚至宝三鞭丸

在上海的一些老字号中药店，如南京东路的蔡同德堂药号、城隍庙的童涵春堂，每逢旅游旺季，总有来自日本、韩国、东南亚等地的游客，寻购一种“红色的中国小药盒”，即传统的滋补名药——至宝三鞭丸。因为包装盒是一个红色的小盒。所以被一些海外华人和外国朋友称为“神奇的小红盒”。

三鞭参茸固本丸中人参皂甙Re的含量测定

三鞭参茸固本丸系由鹿、驴、狗鞭、人参、鹿茸等13味中药组成,具有益肾生精、补气之功效,用于体质虚弱、气血双亏、阳痿不举等症。本方药味多,成分复杂,人参为补益中药,人参皂甙Re又为方中主要可测成分之一,故选其为定量指标。1 仪器与试药1.1 仪器 岛津CS—930双波长薄层色谱扫描仪、岛津薄层喷雾显色仪。1.2 试剂

三鞭丸演绎老而不衰的神话

常言道:树枯根先竭,人老脚先衰.人老始于脚,腿脚不便是人衰老的先兆.因此,港人用"壮脚力"泛指中亚至宝三鞭丸在抗衰老、延年益寿、增强体力方面的神奇疗效是有一定道理的.

壮阳强身三鞭酒

三鞭酒源自三鞭丸。 相传南宋高宗皇帝赵构，罹患肾虚阳衰之症，俗称“见花败”。其皇宫虽然嫔妃如云，无奈宋高宗阳痿不举，心有余而力不足，致使膝下无一子女，可叹一朝天子在众美女面前一败涂地。每念及此事，宋高宗总是闷闷不乐，一时间，

温肾助阳药免疫调控作用的研究进展

随着免疫学理论研究的进展,中医学在免疫疗法的认识上有了很大提高,不少学者从免疫的角度来探讨中医药的治疗方法。 祖国医学认为疾病的发生是由于人体阴阳相对平衡遭到了破坏。所以,治疗上应该“谨察阴阳所在而调之,以平为期”,把调节‘阴阳作为基本治则。这一点与免疫学的理论极为相似。调节机体的抗病能力,维持机体内环境的稳态平衡,这正是中医理论“扶正”的特色之一和整体调整的精华所在。