苗药三颗针不同制品有效成分不同提取方法比较研究

目的:优选三颗针有效成分最佳提取方法。方法:以盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀的总量为综合考察指标,分别采用超声法、回流法、酶解法提取法。采用高效液相法测定盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀含量,DIAMONSILC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液;检测波长265 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为30℃。结果:回流法所提取3种生物碱总量最高。结论:回流法为提取三颗针生物碱有效成分最佳方法。

三颗针炮制前后对小鼠抗疲劳抗氧化影响

目的:研究三颗针炮制前后提取物对小鼠抗疲劳和抗氧化的影响。方法:通过力竭游泳运动(ESE)评估三颗针炮制前后不同剂量(0.2、0.4、0.8 mg/g)提取物的抗疲劳作用;测定ESE后与疲劳相关的生化参数和活性提取物的体外抗氧化活性。结果:三颗针酒制品显著延长了小鼠游泳力竭的时间(P<0.05),表明酒制三颗针具有抗疲劳作用;酒制品组小鼠葡萄糖(Glu)、肌糖原水平显著升高,血尿素氮(BUN)、乳酸(Lac)水平显著降低。ESE增加了肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的水平,降低了超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的水平,而酒制品可抑制上述变化。且体外抗氧化试验表明酒制品以剂量依赖性方式清除·OH和DPPH自由基。结论:三颗针酒制品可通过增加能量来源和减少有效代谢物的积累来缓解疲劳,抗氧化活性可能是酒制三颗针抗疲劳作用的原因之一。

三颗针抗菌活性成分研究

目的系统地研究三颗针的抗菌活性成分,并比较不同来源三颗针提取物的高效液相色谱分析的稳定性和重现性。方法运用制备高效液相色谱法结合凝胶过滤和重结晶法分离纯化化学成分,利用现代波谱技术鉴定所分离化合物的结构,采用HPLC-PDA法分析不同来源的8个三棵针样品甲醇提取物,采用肉汤稀释法测试上述8个甲醇提取物和单体生物碱成分的抗菌活性。结果从湖北小檗甲醇提取物中分离得到7个单体化合物,鉴定为异紫堇定碱（1）、小檗胺（2）、药根碱（3）、巴马汀（4）、小檗碱（5）、4-羟基苯甲酸（6）、β-谷甾醇（7）,化合物1~7为首次从该植物中分得。8个甲醇提取物与化合物2~5对革兰阳性菌金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌显抗菌活性,MIC值范围为12.5~50.0μg/mL。结论三颗针中所含的异喹啉生物碱显示出良好的抗菌活性,不同来源的三颗针甲醇提取物高效液相色谱分析具有良好的稳定性和重现性,这些研究为三颗针进一步的开发奠定了基础。

三颗针提取物对仔猪生长及肠道菌群和挥发性脂肪酸的影响

【目的】探讨饲料中添加中草药三棵针提取物对断奶仔猪生长发育的影响。【方法】将64头三元杂交断奶仔猪(杜×长×大)随机分为2组,每组4个重复,每重复8头猪,分别饲喂含100 mg/kg土霉素和500 mg/kg三颗针提取物的饲粮,研究三颗针提取物对仔猪生长、肠道pH、肠道菌群和肠道挥发性脂肪酸的作用效果。【结果】与添加土霉素相比,三颗针提取物能显著提高仔猪日增重(P<0.05)、降低仔猪料重比(P<0.05)和腹泻率(P<0.05),显著增加空肠、回肠和结肠中的乳酸杆菌数量(P<0.05),降低空肠、回肠、盲肠中的大肠杆菌和回肠中的总需氧菌数量(P<0.05),显著增加仔猪空肠乙酸和总挥发性脂肪酸的含量,显著增加结肠乙酸、丙酸、丁酸、戊酸及总挥发性脂肪酸的含量(P<0.05),具有降低仔猪不同肠段pH的趋势(P>0.05)。【结论】断奶仔猪日粮中添加三颗针提取物,可以达到甚至超过添加土霉素的促生长效果,能够抑制肠道有害菌的生长,促进有益菌生长并提高仔猪肠道总挥发性脂肪酸的含量,改善仔猪肠道内环境。

甘肃产三颗针植物中生物碱的测定及分布状态的研究

建立梯度洗脱双波长HPLC法同时测定小檗属植物中小檗胺、药根碱、巴马汀、小檗碱含量的方法 ,并应用该法分析采集于甘肃不同产地、不同品种小檗属植物的茎木、根木、茎皮、根皮样品 ,研究小檗属植物中生物碱的分布状态 ,考察其药用价值。小檗胺、药根碱、巴马汀、小檗碱线性范围分别为 :0.015～2.56μg(r=0.9998) ;0.012～2.0μg(r=0.9996) ;0.010～0.52μg(r=0.9999) ;0.028～4.74μg(r=0.9998)。结果表明 ,甘肃不同产地、不同品种、不同部位三颗针植物中生物碱的含量分布有明显的差异。

三颗针不同炮制、提取方法对糖尿病小鼠血糖、血脂的影响研究

为探究三颗针不同炮制(醋制、酒制)、提取方法(煎煮、回流、超声、回流超声)对糖尿病小鼠降血糖、降血脂的影响。实验建立四氧嘧啶、链脲佐菌素、肾上腺素、高浓度葡萄糖致小鼠糖尿病模型,测定各模型组及正常小鼠给药前后血糖值,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)值。结果发现三种制品的四种提取方法对正常小鼠空腹血糖无明显影响,但能显著降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖,各制品的回流超声组与生品水煎液组中剂量组比较存在显著差异(P<0.05);醋制品水煎液组、酒制品回流组高剂量组,醋制品回流组,各制品超声组、回流超声组对链脲佐菌素致糖尿病小鼠高血糖有显著降糖作用(P<0.05或P<0.01);醋制品、酒制品回流超声组高剂量组在给予高浓度葡萄糖后0.5、1、2h均能显著降低小鼠血糖(P<0.05或P<0.01);酒制品、醋制品回流组、醋制品超声组、生品、酒制品、醋制品回流超声组高剂量组均能使盐酸肾上腺素致小鼠血糖显著降低(P<0.05或P<0.01);醋制品回流组,酒制品、醋制品回流超声组均能显著降低TG、TC、LDLC,升高HDLC含量。实验表明三颗针酒制品、醋制品采用回流超声法降低血糖和血脂疗效较佳。

三颗针植物中生物碱分布状态的研究

目的 :建立梯度洗脱双波长检测的HPLC法 ,同时测定小檗碱、药根碱、小檗胺、巴马汀含量的方法 ,并应用该法考察小檗属植物中生物碱的分布状态。方法 :采集甘肃不同产地小檗属植物的茎木、根木、茎皮、根皮样品 ,用本文建立的HPLC法分析。结果 :小檗碱、药根碱、小檗胺、巴马汀线性范围分别为 :0 0 2 8μg～ 4 74 μg(r =0 9998) ;0 0 12 μg～ 2 0 μg(r=0 9996 ) ;0 0 2 6 μg～ 0 5 2 μg(r =0 9999) ;0 0 15 μg～ 2 5 6 μg (r =0 9998)。结论 :不同产地、不同部位三颗针植物中生物碱的含量分布有明显的差异。

正交实验优选三颗针中小檗碱的提取工艺

目的:优选三颗针中小檗碱的提取工艺。方法:采用正交试验设计法考察硫酸浓度、溶剂量、pH值及温度4个因素对盐酸小檗碱得率的影响。结果:优选出最佳提取工艺为A1B3C1D3即稀硫酸浓度0．2％,溶剂的量为16倍,石灰乳调pH9, 精制时调酸的温度为60℃。结论:以该工艺从三颗针中提取的小檗碱含量高,工艺较简单、适用。

三颗针提取液复合涂膜对“纽荷尔”脐橙贮藏保鲜的影响

为开发新型天然保鲜剂,以赣南脐橙"纽荷尔"为试材,研究三颗针提取液复合壳聚糖涂膜处理对脐橙贮藏期间果实品质和生理生化的影响。试验结果表明,与对照组相比,单一壳聚糖涂膜和三颗针提取液复合壳聚糖涂膜处理都能有效地减少贮藏过程中果实的失重率和腐烂率,维持较高的总糖、可溶性固形物(TSS)、可滴定酸(TA)和维生素C(Vc)含量,减少整个期间丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量的积累,并能更好地维持贮藏后期较高的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)等抗性酶活性,但三颗针复合涂膜的效果更优,说明三颗针复合涂膜处理能更有效地延缓果实品质的下降,提高脐橙果实的抗病能力,这也将为三颗针提取液在果蔬保鲜上的应用奠定理论依据。

三颗针中盐酸小檗碱、盐酸药根碱及盐酸巴马汀的含量测定

目的建立同时测定三颗针中盐酸小檗碱、盐酸药根碱及盐酸巴马汀含量的高效液相分析方法。方法采用C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液(24∶76)为流动相,检测波长为265 nm;流速1.0 ml/min;柱温(25±1)℃。结果三颗针样品中盐酸小檗碱、盐酸药根碱及盐酸巴马汀平均加样回收率分别为98.83%(RSD=3.35%),98.41%(RSD=3.09%)和99.29%(RSD=3.72%)。结论该方法可靠、简便、快速,可用于三颗针药材含量测定,为合理开发利用三颗针药用资源及其质量评价提供实验依据。

三颗针提取物对肉仔鸡抗氧化水平和脂类代谢的影响

将300只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分为5组,每组6个重复,每重复10只鸡,公母各半,分别饲喂基础日粮+5 m g/kg阿维拉霉素及基础日粮+0.5,2.0,3.5或5.0 g/kg三颗针提取物,饲养试验进行7周后屠宰,研究日粮中添加不同剂量三颗针提取物对肉仔鸡生长、脂类代谢和抗氧化水平的影响。结果表明,与日粮中添加阿维拉霉素相比,添加不同量三颗针提取物的肉仔鸡7周平均死淘率、7周末体重、日增重、料重比均无显著差异(P>0.05),添加三颗针提取物3.5和5.0 g/kg试验组显著降低了肉仔鸡的采食量(P<0.05);添加三颗针提取物的各组肉仔鸡肝脏和胸肌、腿肌中SOD活性极显著提高(P<0.01),肝脏中G SH-PX活性显著(P<0.05)或极显著提高(P<0.01),添加三棵针提取物2.0,3.5和5.0 g/kg组肝脏中M DA含量极显著降低(P<0.01);添加三棵针提取物的各组血清TC含量极显著降低(P<0.01),添加量为3.5和5.0 g/kg组的血清HDL-C含量极显著提高(P<0.01),添加量为3.5和5.0 g/kg(P<0.01)、0.5和2.0 g/kg(P<0.05)血清TG含量极显著或显著降低。综上所述,肉仔鸡日粮中添加三颗针提取物可以达到添加阿维拉霉素的促生长效果;三颗针提取物可以显著增强肉仔鸡机体的抗氧化水平,降低血液甘油三酯和总胆固醇含量,促进机体的脂类代谢。

青海产三颗针中盐酸小檗碱的最佳提取工艺研究

从青海产的三颗针中,通过正交实验设计,采用酸提法从中提取盐酸小檗碱,找出了最佳的实验条件,该条件用于指导生产,大大地提高了生产效率。

三颗针不同炮制方法抗炎镇痛作用的比较及炮制工艺的优选

目的:探讨不同炮制方法对三颗针抗炎镇痛作用的影响,优选最佳炮制工艺。方法:建立棉球致慢性肉芽肿、二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,评价其抗炎作用;采用醋酸扭体法观察其镇痛作用。以盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱为指标进行正交试验,对加醋量、酒量、闷润时间、烘制温度、烘制时间进行优选。结果:与空白对照组比较,三颗针各给药组均能显著减轻小鼠棉球肉芽肿的重量(P<0.05);三颗针酒制品组、醋制品组均能显著抑制小鼠耳廓肿胀及增加小鼠扭体潜伏期(P<0.05)。优选的最佳醋制工艺为加米醋30%,闷润1.5 h,160℃烘制20 min;优选的最佳酒制工艺为加黄酒量30%,闷润1.0 h,160℃烘制20 min。结论:三颗针酒制、醋制后抗炎镇痛作用增强,优选的酒制、醋制工艺稳定可行、重复性好,可为三颗针的炮制工艺研究提供指导。

三颗针提取物和γ-氨基丁酸对肉仔鸡生长性能及免疫性能的影响

本文旨在研究饲粮中添加三颗针提取物和γ-氨基丁酸对肉仔鸡生长性能、养分表观消化率和免疫性能的影响。试验选用1日龄健康爱拔益加(AA)肉仔鸡240只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽。采用单因子试验设计,4组分别为在玉米-豆粕型饲粮中添加0.20%三颗针提取物、0.01%γ-氨基丁酸、0.20%三颗针提取物+0.01%γ-氨基丁酸的3个试验组及添加5mg/kg阿维拉霉素的对照组,试验期7周。试验鸡在7日龄采用饮水法首免新城疫,在21日龄二免。每次免疫后第7天和第14天测定血清中新城疫-血凝抑制(NDV-HI)抗体效价,试验第14、28、42天测定刀豆蛋白A(ConA)刺激指数(SI)。结果表明:1)各组肉仔鸡7周末体重、平均日增重和平均日采食量均无显著差异(P>0.05)。三颗针提取物组肉仔鸡料重比显著高于对照组(P<0.05),γ-氨基丁酸组与对照组差异不显著(P>0.05),联合组显著低于其他各组(P<0.05)。2)三颗针提取物组粗蛋白质、粗脂肪、钙、磷的表观消化率极显著低于对照组(P<0.01);γ-氨基丁酸组和联合组与对照组均差异不显著(P>0.05)。3)首免后第7天,各组肉仔鸡血清NDV-HI抗体效价无显著差异(P>0.05),第14天,γ-氨基丁酸组和联合组均显著高于三颗针提取物组和对照组(P<0.05);二免后第7天和第14天,联合组与γ-氨基丁酸组肉仔鸡血清NDV-HI的抗体效价极显著高于三颗针提取物组和对照组(P<0.01)。关于ConA刺激指数,试验第14天和第42天各组间均无显著差异(P>0.05),试验第28天时,联合组和γ-氨基丁酸组均显著高于三颗针提取物组和对照组(P<0.05)。由此可知,γ-氨基丁酸在不影响肉仔鸡生产性能和免疫性能的基础上可替代抗生素使用,且同时添加三颗针提取物和γ-氨基丁酸效果更好。

三颗针有效成分盐酸小檗碱精制工艺的优化

目的研究三颗针有效成分盐酸小檗碱的最佳精制工艺。方法采用厶（3。）正交试验设计，以提取率为考察指标筛选精制工艺。结果优选得到最佳精制工艺条件为50倍样品纯化水用量、回流时间30min、溶液pH为1～2、乙醇浓度70％。三颗针有效成分盐酸小檗碱的精制提取率平均为值75．7％，RSD为2．65％（n=5）。结论由，L9（3^4）试验设计筛选得到三颗针有效成分盐酸小檗碱的精制工艺条件可靠，为该原料药的生产提供参考。

三颗针提取物对断奶仔猪生长、养分消化率和血清指标的影响

研究了日粮中添加抗生素或不同剂量三颗针提取物对断奶仔猪生长、养分表观消化率和血清指标的影响。选用128头体质量相近的三元杂交断奶仔猪(杜×长×大),随机分为4组,每组4个重复,每个重复8头猪,公母各半。对照组饲喂添加100mg/kg土霉素的日粮,3个试验组日粮中分别添加三颗针提取物200、500和1000mg/kg。试验结果表明:与添加土霉素相比,添加200mg/kg和500mg/kg三颗针提取物组仔猪日增重显著提高,500mg/kg三颗针提取物组仔猪料重比和腹泻率显著降低;添加三颗针提取物各组粗蛋白质、粗脂肪和有机物表观消化率与添加土霉素组间均没有显著差异,但以500mg/kg组较高,500mg/kg和1000mg/kg三颗针提取物组总磷表观消化率显著高于200mg/kg组和土霉素组,500mg/kg三颗针提取物组仔猪钙表观消化率显著高于土霉素组;200mg/kg和500mg/kg三颗针提取物组仔猪血清ALT、AST活性和TP含量显著高于土霉素组,土霉素组显著高于1000mg/kg组,土霉素组血清GLU含量显著高于添加三颗针提取物组。结果表明,断奶仔猪日粮中添加三颗针提取物能够减少仔猪腹泻、提高仔猪生长性能,达到或超过添加土霉素的促生长效果。日粮中添加500mg/kg的三颗针提取物有利于提高仔猪对日粮的养分表观消化率,提高机体代谢和抗应激能力。

贵州中草药三颗针化学成分研究

研究黔产三颗针(Berberis sargentiana Schneid)地上茎干部分的化学成分。采用硅胶等色谱方法进行分离、纯化,通过理化性质及波谱方法鉴定其化学结构。从三颗针95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分分离得到10个化合物,分别为:β-谷甾醇(1),小檗碱(2),stigmast-9(11)-en-3-ol(3),胡萝卜苷(4),表木栓醇(5),蔗糖(6),槲皮素(7),药根碱(8),巴马汀(9),蒲公英萜醇(10).化合物3-7,10是首次从该植物中分离得到。

从三颗针与黄连中提取盐酸小檗碱的实验研究

目的探讨三颗针替代黄连作为实验室提取盐酸小檗碱原料药材的可行性。方法应用酸水渗漉法对三颗针及黄连进行提取实验,对两种药材加工前后性状、渗漉效果及盐酸小檗碱产量进行比较,并对其产品进行化学检识。结果三颗针粗粉中所含纤维多于黄连,渗漉效果较好,其盐酸小檗碱的产量为1.2 g,黄连中盐酸小檗碱的产量为2.3 g,两者化学检识反应相同。结论三颗针提取盐酸小檗碱的产量虽低于黄连,但实验成本低,且完全可满足实验教学需要。

Box-Behnken响应面法优化西藏三颗针中盐酸小檗碱的提取工艺

优化西藏三颗针中盐酸小檗碱的提取工艺。采用比色法测定盐酸小檗碱的含量,以盐酸小檗碱含量为指标,分别考察pH值、稀酸浓度、溶剂温度、料液比四因素对提取分离盐酸小檗碱的影响,并结合Box-Behnken响应面分析法,优化西藏三颗针中盐酸小檗碱的提取工艺。结果表明,最佳提取工艺稀酸浓度为0.2%,pH值为10,提取温度50℃,料液比为1∶8时,该工艺下盐酸小檗碱的得率最高。说明优化后的提取工艺简便可行,收率高,具有工业化生产推广价值。