miRNA调控恶性黑色素瘤细胞上皮-间充质转化的分子网络及机制

黑色素瘤是一种极易发生转移的恶性皮肤肿瘤,具有高度的致死性。上皮–间充质细胞转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)在胚胎发育过程中起到非常重要的作用,同时在肿瘤的发生和恶化过程中也扮演着重要的角色。mi RNA具有广谱的调节能力,对于肿瘤发生和EMT形成都能产生不同程度的影响。本文整合黑色素瘤细胞系转录组和mi RNA组测序数据,在转录组数据中筛选得到参与肿瘤EMT过程的基因,通过Mirsystem软件预测并从mi RNA组数据中筛选出与之负相关的11个mi RNA,包括mi R-130a-3p、mi R-130b-3p、mi R-125a-5p、mi R-30a-3p、mi R-195-5p、mi R-345-5p、mi R-509-3-5p、mi R-374a-5p、mi R-509-5p、mi R-148a-3p和mi R-330-3p。经过生物信息学分析mi RNA靶基因富集的分子网络和信号途径,发现了两个与细胞发育和细胞间相互作用密切相关的网络,以及多个参与调控EMT过程的信号通路。对11个mi RNA进行分子生物学验证,发现mi R-195-5p、mi R-130a-3p、mi R-509-5p和mi R-509-3-5p共4个可以调节重要肿瘤基因的mi RNA。本研究运用m RNA和mi RNA两种转录组的测序数据筛选EMT相关mi RNA的方法,为肿瘤多组学数据整合分析提供了新的研究思路,并以期能为肿瘤精准基因组学的发展发挥重要的推进作用。

LGR4通过调控上皮–间充质转化促进宫颈癌转移

LGR4(leucine-rich repeat-containing G-protein-coupled receptor 4)在多种肿瘤发生中具有重要作用,但在宫颈癌(cervical cancer)中的作用及机制尚不清楚。该研究使用免疫组织化学技术检测宫颈癌组织中LGR4的表达情况,发现LGR4在癌组织中的蛋白水平高于癌旁组织。Kaplan-Meier生存分析发现,LGR4高表达患者的总生存时间明显短于LGR4低表达患者。体外研究表明,LGR4可以调控HeLa细胞的迁移和侵袭能力,但不影响其增殖。为了阐明LGR4影响细胞迁移和侵袭的机制,该研究检测了迁移和侵袭相关的EMT信号通路。Western blot实验及免疫荧光实验证实LGR4通过EMT信号通路调控HeLa细胞的迁移和侵袭。最后,动物实验证明LGR4可以在小鼠体内促进宫颈癌的转移。这些结果说明LGR4调控宫颈癌的EMT过程,进而促进宫颈癌的转移。

氰酸盐诱导氧化应激促进肾小管上皮细胞上皮–间充质转化

该研究探讨氰酸盐(cyanate)诱导肾小管上皮细胞氧化应激损伤和促进肾纤维化的作用。氰酸盐作用HK-2肾小管上皮细胞后, CCK8法检测其对细胞活力的影响;倒置显微镜观察细胞形态的改变; DCFH-DA法检测细胞ROS水平;细胞免疫荧光和Western blot分别检测E-cadherin、Fibronectin、α-SMA的表达; Western blot检测TGF-β的表达水平。结果显示, 2 mmol/L氰酸盐明显下调HK-2细胞的活力(P<0.05),细胞形态变为长梭形。氰酸盐作用24 h后, HK-2细胞内ROS水平呈浓度依赖性升高。免疫荧光和Western blot结果均显示,氰酸盐作用24 h后, HK-2的Fibronectin、α-SMA表达升高, E-cadherin表达下降; TGF-β的表达水平随氰酸盐浓度升高而上调(P<0.05)。以上结果表明,氰酸盐诱导肾小管上皮细胞产生过量ROS,上调TGF-β水平促进细胞上皮–间充质细胞转化(epithelia-mesenchymal transition, EMT)。

PI3K/AKT/mTOR信号通路在EMT发生发展过程中的研究进展

上皮细胞–间充质转化(EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程。癌细胞中的部分EMT被认为可以增强其侵袭特性,并促进对抗癌药物的耐药性。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号转导通路在恶性肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、转移和血管新生方面起着重要作用。在肿瘤的发生发展过程中PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活是导致肿瘤细胞生长、发展、增殖、转移特别是EMT失调的重要原因。本文主要针对细胞EMT与PI3K/AKT/mTOR信号转导通路之间的关系进行综述。

E-cadherin表达下调激活Notch信号通路增强前列腺癌化疗耐药的机制研究

背景与目的前列腺癌(prostate cancer,PCa)化疗耐药与其侵袭性和转移性密切相关。最新研究显示上皮细胞–间充质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)可能在前列腺癌化疗耐药和转移中发挥重要作用。因此,作为EMT的标志物,E-cadherin被认为有可能与肿瘤化疗耐药有重要关系。然而,PCa化疗耐药的分子机制尚不清楚。本研究旨在探讨EMT与PCa化疗耐药的关系,以及E-cadherin表达变化是否影响PCa化疗耐药。方法以亲代PC3和DU145细胞及其化疗耐药PC3-TxR和DU145-TxR细胞作为研究对象。用E-cadherin过表达的慢病毒感染PC3-TxR和DU145-TxR细胞,使E-cadherin过表达;同时,用小干扰RNA转染PC3和DU145细胞,使E-cadherin表达沉默。采用蛋白免疫印迹和实时定量聚合酶链反应分析EMT相关标志物及信号通路的变化。分别通过划痕、transwell和克隆形成实验检测肿瘤细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力。采用MTS法检测细胞对紫杉醇的药物敏感性。结果与亲代PC3和DU145细胞相比,化疗耐药PC3-TxR和DU145-TxR细胞表现出EMT相关的标志物表达改变,包括E-cadherin表达下调和Vimentin、Snail与N-cadherin表达上调。当E-cadherin在PC3-TxR和DU-145-TxR细胞中过表达时,Vimentin和Caldun-1表达下调,肿瘤细胞的迁移和侵袭受到抑制。特别是E-cadherin过表达以后,PC3-TxR和DU145-TxR细胞对紫杉醇的敏感性被重新激活。并且,在亲代PC3和DU145细胞中沉默E-cadherin表达后,Vimentin和Snail表达上调,对紫杉醇的敏感性降低。有趣的是,与亲代PC3和DU145细胞相比,PC3-TxR和DU145-TxR细胞中Notch-1表达上调,而E-cadherin在这些细胞中的表达下调。我们的研究还显示,Notch信号通路抑制剂γ-分泌酶抑制剂可显著增加化疗耐药细胞对紫杉醇的敏感性。结论 E-cadherin下调可以激活Notch信号通路,从而增强PCa化疗耐药,抑制Notch信号通路可能逆转PCa化疗耐药。

姜黄素防治前列腺良性病变的作用机制研究进展

良性前列腺增生是影响男性泌尿系统健康的常见病变。姜黄素是从姜黄中提取的二酮类化合物,具有多种功效,临床广泛用于多种疾病的治疗。姜黄素可通过抑制核因子-κB信号通路激活和炎症因子的分泌,促进前列腺间质细胞凋亡,抑制前列腺细胞上皮–间充质转化进程,抑制前列腺组织中生长因子的表达等多种途径抑制前列腺增生和减轻前列腺炎的炎症反应。对姜黄素防治前列腺良性病变的作用机制进行综述,为姜黄素的临床运用提供参考。