ANKRD1通过介导上皮细胞间充质转化促进肝细胞肝癌增殖与转移

目的:探究ANKRD1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,研究ANKRD1促进HCC细胞增殖和转移的功能及其机制。方法:通过实时定量RT⁃PCR(real⁃time quantitative PCR,RT⁃qPCR)与Western blot检测ANKRD1在肝细胞肝癌及癌旁组织中的相对表达量,临床病理学分析ANKRD1表达与HCC患者临床特征的相关性。利用慢病毒感染将肝癌细胞系中的ANKRD1敲低或过表达,通过CCK⁃8、划痕、Transwell、EdU以及裸鼠皮下成瘤实验在体内体外检测ANKRD1对肝癌细胞增殖与迁移功能的影响。Western blot技术检测ANKRD1对HCC细胞上皮细胞⁃间充质转化(epithelial⁃mesenchymal transition,EMT)的调控作用。结果:ANKRD1在肝癌细胞中表达明显上调,过表达ANKRD1可以促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,而ANKRD1敲低则会抑制肝癌细胞的增殖与迁移,Western blot与皮下瘤免疫组化实验表明ANKRD1可以促进HCC细胞EMT通路激活。结论:ANKRD1在肝癌细胞中表达上调并通过调控EMT通路促进HCC细胞增殖与迁移,有望成为肝癌治疗的新靶点。

转化生长因子⁃β2与眼病关系的研究进展

转化生长因子⁃β2(TGF⁃β2)在角膜、巩膜和视网膜等多种眼组织中均有表达,在眼组织细胞的增殖、分化和转移中发挥重要作用。近年来研究发现,TGF⁃β2可通过参与上皮⁃间充质转化和细胞外基质重塑等生物学进程参与疾病的发病进程,与青光眼、纤维化白内障、角膜损伤、增生性玻璃体视网膜病变和近视等多种眼科疾病的发病密切相关。本文就TGF⁃β2在眼部疾病中的作用和机制进行综述。

子宫癌肉瘤的分子机制及临床研究进展

子宫癌肉瘤(uterine carcinosarcoma,UCS)是一种具有双相侵袭性的高级别子宫内膜癌,其中肉瘤成分是由癌成分去分化形成的。肉瘤优势(sarcoma dominance)成为UCS中新的概念,子宫肿瘤中肉瘤成分>50%与生存率降低有关。通过二代测序方法对UCS基因图谱的分析,研究者们对UCS基因突变的认识进一步加深。UCS主要采取多模式治疗,美国国立综合癌症网络(National ComprehensiveCancerNetwork,NCCN)指南将卡铂/紫杉醇化疗方案作为UCS的1类推荐。UCS的靶向治疗也取得了较大的进展,如针对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphoinositide 3⁃kinase/proteinkinaseB/mammaliantargetof rapamycin,PI3K/AKT/mTOR)通路及人表皮生长因子2(human epidermalgrowthfactor 2,HER2)通路的靶向治疗。免疫检查点抑制剂为UCS的治疗提供了新的方向。上皮⁃间充质转化(epithelial⁃mesenchymaltransition,EMT)在UCS中癌细胞衍生至肉瘤细胞的过程中起着关键作用,针对EMT的治疗可能成为改善UCS患者预后的有效方法。

组蛋白甲基化转移酶2在糖尿病肾病小鼠肾组织中的表达变化及其意义

目的检测组蛋白甲基化转移酶2(SET and MYND domain containing 2,SMYD2)在糖尿病小鼠肾组织中的表达变化,分析其与上皮细胞⁃间充质细胞转化(epithelial⁃mesenchymal transformation,EMT)的相关性,为临床上治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)提供新的方向。方法24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照(NC)组、DM12周组、DM24周组和DM28周组,每组6只。采用腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)复制DM小鼠模型,处死小鼠后收集血清和肾组织,全自动生化分析仪测血糖(BG)、血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN);利用HE和Masson染色进行肾脏病理分析;应用Western blot方法检测α⁃平滑肌肌动蛋白(α⁃SMA)、波形蛋白(Vimentin)、SMYD2、转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)和E⁃钙黏素(E⁃cadherin)的表达。结果与NC组相比,DM组小鼠BG、Scr和BUN水平均明显增加(P<0.05),24周组和28周组肾组织出现明显的病理改变和纤维增生,α⁃SMA、Vimentin、SMYD2和TGF⁃β1蛋白表达增加(P<0.05),E⁃cadherin蛋白表达减少(P<0.05),其中SMYD2与E⁃cadherin的表达呈负相关,与α⁃SMA,Vimentin和TGF⁃β1的表达呈正相关。结论SMYD2在DM小鼠肾组织中表达上调,推测其可能和TGF⁃β1表达上调共同参与EMT的发生,进而参与调控DN的发生发展。

CDK8 Promotes Cell Proliferation, Migration and Invasion in Esophageal Squamous Cell Carcinoma Through JAK/ STAT3/EMT Pathway

Objective To investigate the expression of cyclin-dependent kinase 8(CDK8)in esophageal squamous cell carcinoma(ESCC)and its effect on ESCC cells,and to explore its potential molecular mechanism.Methods The expression level of CDK8 mRNA was analyzed using UALCAN database,and then the expression level of CDK8 protein in tumor tissues of ESCC patients was detected by immunohistochemistry(IHC).Esophageal cancer cell lines Kyse-30 and Kyse-150 were stably transfected with lentivirus to achieve knockdown and overexpression of CDK8.EdU proliferation assay,cell colony formation assay,cell cycle assay,cell scratch assay and invasion assay were used to explore the effect of CDK8 protein expression level on the phenotype of ESCC cells.Subsequently,the effect of CDK8 on the growth of esophageal cancer xenografts in vitro was observed by subcutaneous tumor formation assay in mice.Finally,the expression of proliferation and metastasis related proteins was detected by Western blot.Results CDK8 showed high transcription and protein expression levels in ESCC tissues compared with normal esophageal tissues.Knockdown of CDK8 expression significantly inhibited the proliferation,migration and invasion of ESCC cells.In addition,inhibition of CDK8 expression significantly affected the JAK2/STAT3 pathway and the expression of E-cadherin/N-cadherin,while overexpression of CDK8 reversed these effects.Inhibition of STAT3 pathway reversed the promoting effect of CDK8 overexpression on ESCC cell phenotype.Conclusion CDK8 is a cancer-promoting factor of ESCC,which mediates the phosphorylation of JAK2/STAT3 and epithelial-mesenchymal transition(EMT).

二甲双胍对口腔鳞癌细胞迁移的体外作用研究

目的:从体外细胞水平研究二甲双胍对口腔鳞癌细胞迁移能力的影响,并初步探讨可能的机制和潜在价值。方法:复苏培养口腔鳞癌细胞系SCC4和CAL27,选用含不同浓度(0、2、5、10、20 mmol/L)二甲双胍培养基处理培养SCC4和CAL27细胞,CCK⁃8法测定细胞活性。选定二甲双胍低细胞毒性浓度后采用细胞平板克隆、细胞划痕实验测定细胞增殖和迁移能力,明胶酶谱法测定口腔鳞癌细胞的细胞基质金属蛋白酶⁃2/9(matrix metalloprotein⁃ase⁃2/9,MMP⁃2/9)的外分泌能力,免疫印迹法对口腔鳞癌细胞内与上皮⁃间充质转化(epithelial mesenchymal transi⁃tion,EMT)相关的蛋白表达情况进行测定。结果:低细胞毒性浓度的二甲双胍对口腔鳞癌细胞体外增殖和迁移有显著抑制作用(P<0.05)。二甲双胍能够显著抑制口腔鳞癌细胞的外分泌MMP⁃2/9的能力(P<0.05)。二甲双胍能显著调控口腔癌细胞中EMT相关通路标志蛋白的表达(P<0.05),抑制其信号转导。结论:二甲双胍可通过下调MMP⁃2/9外分泌和调控EMT相关信号转导抑制口腔癌细胞迁移。