建期上皮剩余的形态学和细胞活性研究

目的追踪观察上皮剩余在牙齿萌出和建!过程中的形态分布和细胞活性改变。方法细胞角蛋白14(CK14)标记小鼠上皮剩余细胞,光镜观察其分布和细胞形态,透射电镜观察上皮剩余细胞的超微结构。PV免疫组化两步法检测CK14和增殖细胞核抗原(PCNA)在上皮剩余细胞中的表达。结果自牙齿萌出前到建后期上皮剩余的外形和分布改变明显,建后期上皮细胞簇更为规则,分布由牙根表面的较广泛分布向根分叉和牙颈等部位局限,与成熟期上皮剩余相似。建阶段,上皮剩余沿牙根表面呈现类网格样布局,细胞数量较萌出前期明显增加,细胞增殖活性检测显示此时上皮剩余特别是根分叉水平细胞增殖活跃。建后期上皮剩余细胞数量开始减少,透射电镜结果显示簇内出现细胞凋亡征象。结论上皮剩余不是仅仅作为无功能的剩余物,其可能是上皮根鞘功能的延伸或持续,在建过程中发挥积极作用,从而完成牙周组织的发育和维持牙周内环境的稳定。

牙周组织发育期上皮剩余的组织学观察

目的:观察牙周组织形成过程中上皮剩余细胞的组织形态、细胞增殖凋亡。方法:TUNEL(TdT-mediated-dUTPnickendlabeling,TUNEL)法原位细胞凋亡检测牙周组织发育中上皮剩余细胞凋亡的情况。SP免疫组化法检测增殖核抗原(PCNA)和凋亡抑制基因Bcl-2、骨桥素(OPN)和骨涎蛋白(BSP)的表达。结果:牙周膜牙骨质侧可见上皮剩余(theepithelialrestofmalassez)沿牙骨质表面成簇分布,根分叉和牙颈部较多,细胞数量不等,可见不规则核,簇内细胞相互重叠、排列无规则,TUNEL结果示上皮剩余中可找到凋亡阳性表达细胞。免疫组化可见上皮剩余细胞阳性表达OPN,但PCNA和BSP在此期上皮剩余细胞中为阴性表达。结论:在牙周发育过程中,伴随牙槽骨的改建和牙周膜纤维束走向的调整,上皮剩余经历塑形过程,细胞凋亡在这一过程中发挥重要作用。上皮剩余细胞的OPN阳性表达提示其在此过程中可能参与牙骨质的发育。

上皮剩余在咬合力改变后的形态分布研究

目的:观察上皮剩余在咬合力改变后的不同时期形态分布的变化规律,从而探讨其在牙周改建中的作用机制。方法:用健康雄性BALB/c小鼠,做口外切口,拔除左下颌第一、二、三磨牙,建立小鼠咬合力增强和减弱的模型,分别于术后0、1、3、7、14、21、28d处死。设术后0d小鼠作为对照组。细胞角蛋白14(cy-tokeratin14)特异标记上皮剩余细胞,光镜观察其分布和细胞形态。结果:成功建立咬合力改变雄性BALB/c小鼠模型。CK14标记显示拔牙后7d咬合力增强组上皮剩余的数量达到峰值,明显高于对照组,其后开始下降,至28d基本恢复正常。而咬合力减弱组拔牙后21d开始上皮剩余数量逐渐下降。结论:上皮剩余与咬合力改变后的牙周改建过程尤其是牙周膜宽度具有密切关系。

两种方法原代培养人Malassez上皮剩余细胞

目的探索较容易的、成功率较高的人Malassez上皮剩余细胞体外培养方法。方法取104例正常恒牙牙周膜组织,随机分为2组,分别采用组织块结合无血清培养法、酶消化结合无血清培养法进行原代培养并传代。在倒置显微镜下观察细胞生长情况以及细胞形态,采用免疫组织化学鉴定波形蛋白与角蛋白。结果采用组织块结合无血清培养法、酶消化结合无血清法都可以成功进行Malassez上皮剩余细胞(ERM)的体外培养,其中采用组织块法,在发现上皮岛后机械刮除牙周膜成纤维细胞,再换用无血清培养基较易获得该细胞。结论本研究成功进行了人ERM的原代培养、分离和鉴定,为进一步探索更好的体外培养人ERM方法提供依据。

Malassez上皮剩余细胞培养方法学研究

Malassez上皮剩余来自牙根发育中的Hertwig's上皮根鞘,是存在于牙周膜中唯一的牙源性上皮细胞。近期研究发现上皮剩余不只是存在于牙周膜中的"剩余",而是具有多种功能,如:预防牙根的吸收,炎症刺激下形成根尖囊肿,维持牙周膜宽度,并且参与成牙骨质细胞的分化。体外细胞培养体系能排除体内的一些影响因素而很好的分析细胞的功能,因此本文就体外培养上皮剩余细胞的方法作一综述。

大鼠正畸牙移动过程中转化生长因子-β/Smad信号通路相关蛋白质在Malassez上皮剩余细胞的表达变化

目的通过检测大鼠正畸牙移动过程中转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路相关蛋白质在Malassez上皮剩余细胞(ERM)中的表达情况以及ERM的功能变化,探讨TGF-β/Smad信号通路调控ERM参与正畸牙移动的作用机制。方法 30只雄性8周龄健康Sprague-Dawley(SD)大鼠,在上颌右侧第一磨牙与切牙间安装镍钛拉簧,加载50 g力,作为实验组,上颌左侧作为对照组。于加力前以及加力后1、4、7、10、14 d处死大鼠,取下双侧包括上颌第一磨牙及周围牙槽骨在内的组织块,采用免疫组织化学染色方法,通过Image-Pro plus图像分析系统软件对实验组和对照组切片进行分析,在同一光强度下测量染色阳性信号的积分光密度(IOD),观察ERM表达的TGF-β1、Smad2、Smad3、增殖细胞核抗原(PCNA)的IOD值表达变化,并且比较实验组和对照组第一磨牙牙颈部和根分叉区ERM数量以及ERM集群表面积变化。所有数据使用SPSS 17.0软件进行t检验和秩和检验统计分析。结果加力1 d后,TGF-β1、Smad2、Smad3免疫组织化学染色阳性增强,7 d后达到高峰,随后呈下降趋势;加力1、4、7、10、14 d组,TGF-β1、Smad2、Smad3的IOD值与对照组比较差异有统计学意义。加力4 d后,PCNA免疫组织化学染色阳性增强,加力7 d后明显增强,在第10 d达到高峰,随后呈下降趋势;加力4、7、10、14 d组,PCNA的IOD值与对照组比较差异有统计学意义。加力4、7、10、14 d组,ERM数量和ERM集群表面积与对照组比较差异有统计学意义。结论在力学刺激的作用下,ERM的数量增多,ERM集群表面积也增大,TGF-β/Smad信号通路相关分子TGF-β1、Smad2、Smad3在ERM内表达,并且随加力时间的增加而呈现趋势性变化,表明ERM在机械力作用下通过TGF-β/Smad信号通路来调控其在正畸牙移动过程中的作用。

牙周上皮剩余的研究进展

牙周上皮剩余作为牙周膜中的正常结构已成为目前研究的热点。早先认为牙周上皮剩余为非功能性细胞,但近来的研究发现牙周上皮剩余与牙周膜宽度的维持和牙骨质的形成等有关。本文就牙周上皮剩余的来源、组织结构特点、蛋白表达特征及其可能的功能作一综述。

Malassez上皮剩余对炎症牙周膜干细胞成骨能力的影响

目的:研究人体组织Malassez上皮剩余对炎症组织来源的牙周膜干细胞成骨能力的影响。方法:分别从牙周炎患者及健康者的牙周组织中获得牙周膜细胞,并分别采用低密度法筛选纯化出炎症牙周膜干细胞;差速消化法获得Malassez上皮剩余。用流式细胞术对炎症牙周膜干细胞进行表型鉴定,相差显微镜观察Malassez上皮剩余形态,用transwell小室构建Malassez上皮剩余与炎症牙周膜干细胞的共培养体系。然后取小室的下层炎症牙周膜干细胞,用RT-PCR技术检测ALP和Runx-2 mRNA表达水平;ALP染色及茜素红染色观察其成骨分化能力的变化。结果:成功获得了炎症牙周膜干细胞和Malassez上皮剩余,并顺利构建共培养体系;经成骨诱导后,与Malassez上皮剩余共培养的炎症牙周膜干细胞与单独培养组相比,成骨相关基因ALP、Runx-2 mRNA水平均明显上调(P<0.05),ALP染色加深,形成的矿化结节也明显增多。结论:将炎症牙周膜干细胞与Malassez上皮剩余共培养后可使其成骨分化能力增强。

Malassez上皮剩余对衰老牙周膜干细胞成骨能力的影响

目的:研究牙周组织中Malassez上皮剩余(ERM)对衰老组织来源的牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨能力的影响。方法:从健康青年及老年志愿者的牙周组织中分别获得健康牙周膜干细胞(H-PDLSCs)和衰老牙周膜干细胞(Aged-PDLSCs)。低密度培养法对其进行分离纯化,流式细胞术鉴定其表型。差速消化法获取健康牙周组织中的ERM;倒置相差显微镜下观察其形态,免疫荧光鉴定其表型。用transwwell小室构建ERM与Aged-PDLSCs的共培养体系,取小室下层Aged-PDLSCs,RT-PCR技术检测其ALP和Runx-2 mRNA表达水平,ALP及茜素红染色观察其成骨分化能力。结果:Aged-PDLSCs与ERM共培养组经成骨诱导后,与单独培养组相比,其成骨相关基因ALP、Runx-2 mRNA表达水平均明显上调(P<0.05);ALP染色变深,矿化结节的形成也显著增加。结论:Malassez上皮剩余能增强衰老PDLSCs的成骨分化能力。

乳磨牙固连的研究进展

乳磨牙固连是牙齿萌出异常的一种,固连部位牙周膜消失,表现为根骨黏连;发病率为1.3%~8.9%,乳牙列中最易受累牙位为下颌第一乳磨牙,混合牙列中为第二乳磨牙。乳磨牙固连病因可能与遗传因素、局部牙槽骨或牙骨质矿化代谢的相关信号通路、Malassez上皮剩余细胞分泌的细胞因子、牙根生理性吸收过程中的炎症反应等有关。乳磨牙固连可通过临床表现及影像学检查诊断,根据低位咬合程度分为轻、中、重度。因其可引起咬合紊乱、脱落延迟及牙槽骨发育不足等并发症,故需儿童口腔科、正畸科、牙周科、修复科等多学科联合治疗,综合考虑患者年龄、低位咬合严重程度及是否存在继承恒牙等因素制定长期治疗方案。本文就乳磨牙固连的病因、发病机制、诊断、并发症、治疗等方面进行综述,以期为乳磨牙固连的临床诊治提供参考。

牙源性上颌骨囊肿1例报告

牙源性上颌骨囊肿是由成牙组织或牙的上皮或上皮剩余而发生的一组囊肿,牙源性角化囊肿、含牙囊肿及根端囊肿是最为常见的类型[1]。它可发生于颌骨任何部位,多发生于青壮年。因其生长缓慢,初期无自觉症状,但其病情若迁延不愈可诱发牙齿移位脱落、颌骨骨折、复视等合并症[2]。现对首都医科大学附属北京同仁院收治的1例牙源性上颌骨囊肿患者资料报告如下。

根尖周肉芽肿的病理学再认识

牙髓的细菌感染通常导致根尖周肉芽肿和囊肿的发生,并常伴有骨质的吸收,即所谓根尖周病变。现在认为,根尖周病变在临床病程上常表现为一系列的活跃扩展期和慢性静止期。此与牙周病的组织损害过程很相似。

提高人牙周膜成纤维细胞体外培养成功率的方法总结

牙周膜是牙骨质与牙槽骨之间的致密纤维结缔组织。人牙周膜细胞是一类具有异质性及分化潜能的细胞,主要存在四种类型的细胞：结缔组织细胞、malassez上皮剩余细胞、防御细胞以及与神经、血管相关的细胞[1]。人牙周膜成纤维细胞是牙周膜中的主要细胞,具有更新和修复的能力,在牙周膜的生理与病理过程中具有重要的意义[2]。近年来,许多学者就牙周膜体外培养进行了大量的研究,

牙源性角化囊性瘤恶变的诊断治疗

原发于骨内的牙源性癌（PIOC）是一种发生在骨内的鳞状细胞癌,病理来源为牙源性上皮细胞或上皮剩余等。WHO于1972年提出PIOC,并把它归于牙源性癌内。Waldron等将PIOC分为4型,牙源性角化囊性瘤（KCOT）恶变属于Ⅰ型。我科收治了1例KCOT恶变患者,结合文献复习报道如下。

手术治疗牙源性颌骨囊肿的临床体会

牙源性颌骨囊肿是由成牙组织或牙的上皮或上皮剩余演变而来,临床上需手术切除治疗,但其手术较为复杂、难度较大,如果治疗不彻底,较易复发,因此,首次治疗的方法尤其重要。本文就近年来笔者手术治疗牙源性颌骨囊肿的方法及防止复发的体会介绍如下。