实验性消化道溃疡上皮淋巴细胞毒活性的变化

目的：了解消化道溃疡机体的免疫功能变化。方法：应用生物学测定法检测了水浸限制刺激诱发的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠消化道溃疡动物模型肠上皮淋巴细胞和脾淋巴细胞的细胞毒活性的变化。结果：发现给予水浸限制刺激后第２天，小鼠肠上皮淋巴细胞对靶细胞的杀伤活性增至最高，达５２．３％，１ｗ后基本恢复正常水平。脾淋巴细胞的杀伤活性在水浸限制刺激后第５天明显下降，第９天仍未完全恢复至正常水平。结论：肠上皮淋巴细胞活性在消化道溃疡发生后的一定期间内有升高。

肠上皮淋巴细胞与炎症性肠病相关性的研究进展

肠上皮淋巴细胞（iIEL）定位于消化道黏膜上皮细胞间，与肠上皮细胞紧密接触并相互作用，介导黏膜局部免疫防御和维持肠黏膜组织稳定性。iIEL通过其细胞毒活性及所分泌的细胞因子调节肠上皮细胞的凋亡及再生，在炎症性肠病的发生及发展中起一定作用。

小鼠肠上皮内淋巴细胞在粘膜免疫应答中的形态学研究

采用免疫组织化学和电镜方法，观察了ＢＡＬＢ／ｃ小鼠灌服伤寒杆菌后回肠及集合淋巴小结圆顶区肠上皮内淋巴细胞（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＩＥＬ）的形态和分布特征，以探讨ＩＥＬ在抗原诱导下的粘膜免疫应答中的作用。经免疫组织化学方法证实灌服伤寒杆菌后回肠及集合淋巴小结圆顶区肠上皮内含Ｂ和Ｔ两种淋巴细胞，以Ｂ淋巴细胞为主；电镜下可见上皮内淋巴细胞主要由小和中等淋巴细胞组成，且后者有两种形态。一种细胞器较少，与上皮微绒毛之间有紧密接触。另一种细胞器丰富，内质网呈扩张状态。同时观察到ＩＥＬ有的位于上皮细胞内，有的位于相邻的上皮细胞间隙内。本研究提示，小肠上皮不仅为粘膜免疫效应部位，而且也是免疫诱导部位。提示伤寒杆菌能诱导淋巴细胞向小肠上皮和圆顶区上皮迁移，且圆顶区上皮比小肠上皮更易接受抗原刺激。

大豆生物活性肽对肉鸡肠道黏膜上皮内淋巴细胞和IgA^+生成细胞的影响

500只1日龄爱维因肉鸡随机分为五组:分别饲喂添加了不同浓度的大豆生物活性肽(三组)、抗生素和不含大豆生物活性肽的日粮,在28、49日龄取材,采用HE染色方法和免疫组织化学方法检测肉鸡十二指肠、空肠、盲肠扁桃体的上皮内淋巴细胞(IntraepithelialLymphocyte,IEL)和IgA+生成细胞数量,观察大豆生物活性肽对肉鸡肠道黏膜免疫细胞的影响。结果表明:日粮中添加80g/kg～120g/kg大豆生物活性肽能够调解肉鸡的肠道黏膜免疫。

新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及上皮内淋巴细胞和杯状细胞的数量变化

应用组织学和组织化学方法研究了1日龄和20日龄新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及部分黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化规律。结果显示，从1日龄到20日龄，小肠绒毛变短，尤其十二指肠的绒毛长度约缩短了61．58％（P〈0．05），绒毛长度与隐窝深度比值（V／C比值）减小了59．04％～91．32％（P〈0．05）；而黏膜和肌层厚度分别增加了8．66％～41．28％和36．22％～299．10％。小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量随年龄增长而逐渐增多（P〈0．05），20日龄比1日龄分别增加了78．80％～163．05％和28．23％～101．46％；但比较同一年龄的小肠不同肠段，从十二指肠至回肠，上皮内淋巴细胞的数量逐渐减少，而杯状细胞的数量则呈增多趋势。

半胱胺对鸡小肠粘膜中分泌型IgA细胞和上皮内淋巴细胞的影响

实验组肉鸡在灌喂半胱胺 2 0mg·kg-1(CY Ⅰ )和 80mg·kg-1(CY Ⅱ )后 ,应用鸡新城疫弱毒苗 (NDV) (Ⅳ系苗 )以口腔注入法进行免疫 ,检查小肠粘膜中分泌型免疫球蛋白A (sIgA)阳性细胞和上皮内淋巴细胞 (iIEL)数量的变化。结果表明 ,CY Ⅰ在NDV首免后第 4周 ,十二指肠中sIgA阳性细胞数量极显著增加 (P <0 0 1) ;CY Ⅰ和CY Ⅱ组在NDV首免后第 4周iIEL数量显著增加 (P <0 0 5 ) ;首免后第 5周CY Ⅰ组十二指肠中iIEL数量显著增加 (P <0 0 5 ) ;而盲肠扁桃体中这两种细胞数量的变化不大。提示生长抑素 (SS)可抑制小肠粘膜中sIgA阳性细胞和iIEL的分化和增殖 ,半胱胺通过耗竭鸡小肠中SS的含量可提高鸡的粘膜免疫力。

兔圆小囊免疫功能及其与肠道粘膜局部免疫关系的研究 Ⅳ.实验性感染肠球虫兔的圆小囊上皮间淋巴细胞及杯状细胞定量观察

本研究对半月龄、５周龄和２月龄兔口服感染４种兔肠球虫后，圆小囊绒毛粘膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞以及圆顶两侧粘膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞的数量变化情况进行了观察分析。结果表明：感染后，５周龄组第４天、第５天圆顶两侧粘膜上皮间淋巴细胞、２月龄组绒毛粘膜上皮间淋巴细胞显著增加，其余组上皮间淋巴细胞同对照组相比，差异不显著。杯状细胞数量的变化呈现相对的不规律性：半月龄组和５周龄组圆顶两侧粘膜上皮间杯状细胞数量呈增加趋势，而在２月龄组和５周龄组绒毛粘膜上皮间杯状细胞数量则呈减少趋势。这些结果表明，圆小囊的局部细胞免疫机制可能在机体抗球虫免疫中起着非常重要的作用。

四君子汤复方总多糖对小鼠肠上皮间淋巴细胞的免疫调节作用

目的初步探讨四君子汤复方总多糖对小鼠肠上皮间淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocyte,iIEL)免疫功能的影响。方法取NIH小鼠,按体重随机分为正常组、模型组、四君子汤复方总多糖(Polysaccharides of Si-Jun-Zi Decoction,SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(Free protein of SJZPS,SJZFP)组,非连续密度梯度离心法提取iIEL,流式细胞(Flow Cytometry,FCM)技术检测iIEL中CD3+和CD69+细胞比例,ELISA法检测iIEL上清液的IFN-γ和IL-2浓度。结果iIEL中CD3+细胞比例为88.46%;环磷酰胺可使iIEL中CD69+细胞比例下降,iIEL上清液中IFN-γ和IL-2浓度降低,与正常组比较,具有非常显著性差异(P<0.01);SJZPS和SJZFP组中iIEL的CD69+细胞比例以及IFN-γ和IL-2分泌水平明显升高,与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论SJZPS和SJZFP均可提高环磷酰胺抑制的小鼠肠上皮间淋巴细胞的免疫功能,具有肠道黏膜免疫调节作用。

肠道菌群失调增加小鼠肠上皮内T淋巴细胞活化和促炎细胞因子分泌

目的探讨肠道菌群失调对小鼠小肠上皮间淋巴细胞(i IEL)功能的影响。方法口服给予广谱抗生素头孢曲松钠造成菌群失调小鼠模型,用乙二胺四乙酸(EDTA)和二硫苏糖醇(DTT)消化上皮细胞,流式细胞术鉴定i IEL表型和T细胞亚群的比例,ELISA检测肠腔冲洗液中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)水平,采用选择性培养基以及PCR检测肠道细菌的类别。结果与正常组相比,给予头孢曲松钠后小鼠肠道内细菌明显减少,真菌和酵母菌增多;i IEL中T淋巴细胞亚群的比例发生变化,其中γδT细胞比例明显升高;CD3+T细胞、CD8+T细胞以及T细胞受体(TCR)γδ+T细胞活化增加,肠腔内IL-2、IL-6、IFN-γ水平显著升高。结论肠道菌群失调导致定植抗力下降,真菌增多,微生物屏障功能被破坏,引起i IEL中T细胞活化增加,促炎细胞因子分泌增加,可能是菌群紊乱引起炎症性肠病的原因之一。

小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取与抗原表型测定和功能的初步研究

目的 :建立一种提取小肠上皮内淋巴细胞的方法 ,并对其功能进行初步研究。方法 :采用机械分离法和Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞 ,经间接荧光染色后用流式细胞仪检测表型。应用乳酸脱氢酶法检测其自然杀伤功能。结果 :应用该法可获得小鼠小肠上皮内淋巴细胞 2× 10 6 ～ 4× 10 6 只鼠 ,活力测定 >95 %。抗原表型中73 8%以上表达CD8分子 ,TCRγδ为 43 8%。而且自然杀伤活性明显高于小鼠脾淋巴细胞。结论 :表明采用该法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞有效。

雌激素对大鼠肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量、分布的影响

为了研究雌激素对肠黏膜屏障结构的影响,将18只健康Wistar雌性大鼠进行同期发情处理,于发情间情期随机分为3组:对照组,进行假手术;OVX组,双侧卵巢摘除;OVX+E2组,双侧卵巢摘除,苯甲酸雌二醇100μg/kg.d连续用药7 d,然后观察小肠黏膜上皮细胞、上皮内淋巴细胞(IEL)、杯状细胞形态结构和数量的变化。结果表明:和对照组相比,OVX组大鼠的小肠黏膜结构有明显的损伤,绒毛萎缩,绒毛高度和隐窝深度的比值(V/C)明显降低,IEL数量和杯状细胞的数量减少(P<0.05);OVX+E2组的各项指标明显高于OVX组,但是部分指标低于对照组。结论:卵巢摘除对大鼠小肠黏膜屏障结构有严重影响,补充适量雌激素可以在一定程度上改善这一影响。

枸杞多糖对小鼠肠道上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量、分布及对IL-2水平影响

为了研究枸杞多糖(LBP)对肠黏膜屏障结构的影响,给10只C57BL/J健康小鼠连续灌服枸杞多糖7d后,显微镜观察小肠上皮内淋巴细胞(IEL)、杯状细胞(GC)数量和分布变化及测定肠黏膜白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平。结果表明,应用枸杞多糖小鼠的肠黏膜IEL数量和GC的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜IL-2水平升高。证实枸杞多糖在一定程度上可促进小鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。

大豆异黄酮对大鼠肠道上皮内淋巴细胞、杯状细胞及瘦素长型受体的影响

大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;然后将筛选出的肥胖大鼠分别灌胃剂量为对照(I:0mg/kg)、低(Ⅱ:50mg/kg)、中(Ⅲ:150mg/kg)、高剂量(Ⅳ:450mg/kg)的大豆异黄酮,并设置基础对照组(Ⅴ:溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),连续4周用HE、PAS染色观察小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量和分布变化;用免疫组织化学SABC法测定瘦素受体(长型)水平。结果表明:大鼠上皮内淋巴细胞以小型淋巴细胞为主,主要分布于上皮的基底膜附近;大鼠杯状细胞分布在肠黏膜上皮层;瘦素受体(长型)阳性细胞分布于黏膜层。应用大豆异黄酮高剂量组较对照组大鼠的肠黏膜上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜瘦素受体(长型)水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明大豆异黄酮在一定程度上可促进大鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。

不同剂量乳猪壮对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量变化的试验

利用组织化学法和图像分析法研究庆大霉素和不同剂量的"乳猪壮"在防治仔猪大肠杆菌病时对仔猪小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量变化。试验选用60头刚出生的0日龄的杜×大×长三元杂交健康仔猪,随机分6个处理组,每个处理组设10只(雌雄均有),分别饲喂生理盐水、庆大霉素和4种不同剂量的"乳猪壮",试验期为7d。结果显示,各试验组仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加。4mL乳猪壮组对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量明显高于其他组且差异极显著(P<0.01)。结果显示,4mL乳猪壮组对改善仔猪小肠黏膜的防御功能,提高肠道的防御能力有一定作用,可以防治仔猪大肠杆菌病。

大蒜溶液对小鼠小肠黏膜结构、上皮内淋巴细胞和杯状细胞的影响

用组织学和组织化学方法研究不同浓度的大蒜素溶液对小鼠小肠黏膜结构及部分黏膜免疫相关细胞分布与数量的影响。试验选用8周龄BALB/C雄鼠50只,分为5组,每组10只,每组分别饲喂5种不同浓度的大蒜素溶液,每天80m l,实验期为10天。结果显示,1%大蒜素溶液对小鼠小肠肠绒毛长度、V/C比值、黏膜厚度,黏膜免疫相关细胞数量影响最大,对改善和增强小鼠小肠的消化吸收功能,提高肠道的防御能力效果最佳。

中草药抗热应激蛋鸡小肠上皮内淋巴细胞的组织学观察

本试验旨在研究蛋鸡热应激情况下中草药对其小肠上皮内淋巴细胞的影响。选取120只88日龄蛋鸡,随机平均分为6个组。任取其中3个组为中草药试验组,分别加入高、中、低浓度的中草药;另3个组为对照组,一组加入维生素C,一组置于高温环境中,一组于室温条件下饲养。分别在试验的第1天、第4天、第8天和第10天随机选取5只鸡致死,取小肠部分做石蜡切片,H.E染色后在显微镜下观察小肠上皮内淋巴细胞的变化。试验表明,添加中草药的试验组小肠上皮内淋巴细胞数显著多于对照组,且浓度高的效果好。由此显示了中草药可有效对抗热应激,提高蛋鸡生理机能。

日粮锌、硒添加量对肉鸡肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

为了探讨微量元素锌和硒互作对肉鸡肠道黏膜屏障结构的影响,将24只1d龄AA肉鸡随机分3组,分别饲喂添加有高锌高晒(锌1000 mg/kg、硒5 g/kg)、低锌低晒(锌34mg/kg、晒0.08m/kg)和常锌常硒(锌50 mg/kg、硒0.15mg/kg)的日粮45 d后,观察小肠黏膜上皮细胞、上皮内淋巴细胞、杯状细胞的形态结构变化,结果表明:高锌高硒或低锌低硒组肉鸡的肠黏膜结构有明显的损伤,表现为肠黏膜上皮细胞萎缩,上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞数量减少;尤其是高锌高硒组的损伤最为严重。而常锌常硒组肉鸡肠黏膜结构和上皮内淋巴细胞数和杯状细胞数正常。结论:日粮中按锌50 mg/kg、硒0.15 mg/kg的比例添加,对于维持肠道黏膜的正常屏障结构是合适的。 过高或过低的锌和硒对肠黏膜有毒性作用,破坏其屏障功能;而且高锌和高硒可相互促进以增强其毒性作用。

芪黄煎剂对胃切除大鼠小肠黏膜上皮内和固有层T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨芪黄煎剂对大鼠胃切除后小肠黏膜上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IELs)和固有层淋巴细胞(lamina propria lymphocytes,LPLs)的影响。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄煎剂组,每组20只。假手术组大鼠仅给予腹部正中切开后缝合,不行胃切除,不给予肠内营养和芪黄煎剂;模型组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素;芪黄煎剂组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素和芪黄煎剂,疗程1周。疗程结束后,分离出大鼠小肠黏膜IELs和LPLs,采用流式细胞仪分别检测IELs和LPLs的αβT细胞抗原受体-白细胞分化抗原3阳性(αβT cell antigen receptor-cluster ofdifferentiation 3positive,αβTCR-CD3+)T细胞、白细胞分化抗原4阳性(cluster of differentiation 4positive,CD4+)、白细胞分化抗原8阳性(cluster of differentiation 8positive,CD8+)T淋巴细胞。结果①与假手术组比较,模型组IELs中αβTCR-CD3+、CD8+T细胞比例显著降低(P<0.05,或P<0.01);与模型组比较,芪黄煎剂组IEL CD3+、CD8+T细胞比例显著上升(P<0.05,或P<0.01)。②与假手术组比较,模型组LPLs中αβTCR-CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例显著降低(P<0.01);与模型组比较,芪黄煎剂组αβTCR-CD3+、CD4+T细胞比例显著上升(P<0.05)。结论芪黄煎剂能促进大鼠胃切除术后上皮内和固有层中T淋巴细胞的分化、成熟和增殖,有利于胃切除手术应激后肠道免疫屏障功能的调节和恢复。