卵巢上皮癌细胞株OVCAR-3培养相关影响因素分析

目的探讨卵巢上皮癌细胞OVCAR-3培养的影响因素,提高培养的成功率。方法按培养条件分为:未滤菌加抗菌素组、滤菌加抗菌素组、滤菌不加抗菌素组及改良复苏组,取对数生长期的细胞裸鼠皮下种植,观察成瘤率并行组织学检查。结果未滤菌加抗菌素组,复苏培养5次,全部失败;滤菌加抗菌素组,复苏培养10次,全部成功;滤菌不加抗菌素组,复苏培养10次,失败4次,成功率60%;改良复苏组:复苏培养10次,全部成功。种植后2周出现瘤体,各组成瘤率100%,各组肿瘤组织学检查未见明显差异。结论无菌操作是OVCAR-3最重要的影响因素,滤菌及加用抗菌素是关键步骤。

幽门螺杆菌诱导人胃上皮癌细胞株BGC-823环加氧酶-2的合成

目的 :研究幽门螺杆菌对人胃上皮细胞环加氧酶 1和环加氧酶 2合成的影响。方法 :实验选用VacA(+)和CagA(+)的国际标准幽门螺杆菌菌株NCTC116 37和人胃上皮癌细胞株BGC 82 3。环加氧酶的合成用免疫蛋白印迹法 (WesternBlotting)测定。结果 :幽门螺杆菌菌体超声提取物对BGC 82 3细胞环加氧酶 2的合成有明显的诱导作用。BGC 82 3细胞环加氧酶 2的含量在幽门螺杆菌提取物作用 1h后明显增加 ,并持续至少 6h。幽门螺杆菌提取物对BGC 82 3细胞环加氧酶 1的合成没有影响。幽门螺杆菌脂多糖成分对BGC 82 3细胞环加氧酶 2的合成没有影响。结论 :幽门螺杆菌可直接诱导BGC 82 3细胞环加氧酶 2的合成 。

拓扑特肯对人口腔上皮癌细胞株（KB）的增殖抑制及其p-Erk1／2的表达

目的 测定拓扑特肯对体外培养口腔上皮癌细胞株（KB)的生长抑制作用及其Erk1／2磷酸化水平。从MAPKs信号通路探讨拓扑特肯对KB细胞杀伤作用机理。方法 MTT法测定拓扑特肯对KB细胞毒性作用。免疫印记法检测不同浓度拓扑特肯作用于KB细胞时Erk1／2的活化表达。结果 拓扑特肯对KB细胞有显著毒作用，IC50为00.046ug/ml；随着拓扑特肯作用浓度的升高，作用时间的增长KB细胞p-pErk1／2水平显著降低。结论 拓扑特肯对KB细胞的增殖抑制作用可能由于其下调了KB细胞p-pErk1／2的表达。

米非司酮对人卵巢上皮性癌细胞株的增殖抑制作用

目的 探讨米非司酮对人卵巢上皮性癌细胞株的生长抑制作用。方法 采用MTT测定 ,观察不同浓度米非司酮对HO8910 细胞的生长抑制作用 ,通过免疫组化染色 ,检测用药后细胞核增殖抗原Ki 67表达的变化。结果 3个浓度的米非司酮对上述细胞均有抑制作用 ,以 2 0 μmol/L浓度抑制最明显 ,抑制率达 50 .2 8% ;5μmol/L米非司酮可使HO8910 细胞Ki 67抗原表达显著减少 ,细胞增殖受到明显抑制。结论 米非司酮对人卵巢上皮性癌细胞株具有明显抑制作用 ,且通过降低核增殖抗原Ki

拓扑特肯诱导人口腔上皮癌细胞凋亡的机制

目的 :研究拓扑特肯 (Topotecan ,TPT)诱导体外培养的人口腔上皮癌细胞 (KB)凋亡的作用及其可能机制 .方法 :体外培养KB细胞 ,加 30mg/L的TPT孵育 1 2 ,2 4和4 8h ,用MTT法检测TPT对KB细胞增殖的作用 ;DNA凝胶电泳和流式细胞仪技术检测TPT诱导KB细胞凋亡 ,West ern blot检测 p p38MAPK的表达 .结果 :TPT处理细胞 1 2 ,2 4和 4 8h后 ,KB细胞的抑制率分别为 (2 4± 9) % ,(34±7) %和 (4 5± 1 0 ) % ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;流式细胞仪检测其凋亡率 ,1 2h时 (1 1 .5± 2 .8) % ,2 4h(31 .2± 4 .1 ) % ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ;DNA凝胶电泳可见TPT作用 1 2h组DNA碎片化 ,是典型的细胞凋亡生化指标 ;TPT处理细胞 1 2 ,2 4和 4 8h后 ,KB细胞的 p p38MAPK表达逐渐升高 (n =3,P <0 .0 5 ) .结论 :TPT可通过p p38MAPK开放表达信号通路诱导体外培养的TPT处理KB细胞凋亡 .

紫杉醇联合LY294002对卵巢癌3AO细胞CyclinD1表达的影响

目的通过对人上皮性卵巢癌细胞株3AO在紫杉醇及紫杉醇联合2-(4-吗琳基)-8-苯基-4氢-1-苯并毗喃-4-酮(LY294002)作用后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达及细胞周期变化和细胞凋亡的分析,为卵巢癌化疗寻求一种新的高效辅助治疗手段及一种高效的生物学标志物。方法采用RT-PCR技术,检测3AO在空白组、单纯紫杉醇组、和LY294002预处理24h后紫杉醇(紫杉醇+LY294002)作用组的CyclinD1的表达。并采用流式细胞术分析3组CyclinD1的表达水平及细胞凋亡及细胞周期的变化。结果 3AO在空白组、紫杉醇组和紫杉醇联合LY294002组CyclinD1mRNA表达水平不同,呈逐渐减弱趋势。空白组、紫杉醇组和紫杉醇联合LY294002组细胞周期各时相、细胞凋亡率及细胞增殖指数PI(S+G2/M)值不同,细胞凋亡率逐渐增加,细胞增殖指数PI值逐渐下降,细胞生长受到抑制,CyclinD1表达水平逐渐下降。结论卵巢癌3AO中存在CyclinD1基因的异常扩增及过表达,CyclinD1的表达水平与细胞增殖呈正相关。紫杉醇联合LY294002能促进3AO凋亡,LY294002对紫杉醇诱导3AO凋亡具有协同效果。

miR-218在上皮性卵巢癌细胞株SKOV3中的生物学功能

目的探讨微小RNA-218(miR-218)在上皮性卵巢癌细胞株SKOV3中发挥的生物学功能。方法采用实时定量PCR方法检测上皮性卵巢癌细胞株中miR-218的表达。通过转染miR-218模拟体、miR-218抑制剂外源性地增高或者降低miR-218在SKOV3中的表达,利用MTT、流式细胞术、癌细胞侵袭迁移实验观察miR-218对SKOV3增殖、凋亡和侵袭转移的作用。结果 miR-218能增强SKOV3增殖能力(P<0.05),而与细胞凋亡、侵袭转移无相关性(P>0.05)。结论 miR-218在上皮性卵巢癌细胞株SKOV3中发挥调节细胞增殖的作用。

九种中药活性成分抗耐药肿瘤细胞体外研究

目的 分别从温阳、益气、化痰、活血类中药里选择九种单味中药活性成分 ,拟通过体外细胞培养证实其是否存在抗肿瘤耐药效应。方法 采用MTT比色法 ,选择耐长春新碱的人口腔鳞状上皮癌细胞株 (KBv2 0 0 )为靶细胞 ,观察上述单味中药活性成分细胞毒与增敏效应。结果 桂皮醛、大豆甙元、金雀黄素、薯蓣皂苷对KBv2 0 0 细胞具有明显的抑制效应。结论 桂皮醛、大豆甙元、金雀黄素。