高脂饮食通过小肠上皮组织外泌体促进心脏纤维化

目的:研究高脂饮食通过小肠上皮组织外泌体对小鼠心脏成纤维细胞增殖、分化、胶原蛋白合成的影响。方法:分别提取正常饮食/高脂饮食小鼠小肠上皮组织外泌体,与小鼠原代心脏成纤维细胞共培养,PKH26标记外泌体,示踪观察心脏成纤维细胞对外泌体的摄取情况;对心脏成纤维细胞进行荧光定量PCR,观察增殖、分化、纤维化、炎症等基因表达;利用免疫荧光染色观察心脏成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscleactin,α-SMA)、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达。结果:正常/高脂饮食小鼠小肠上皮组织外泌体均可被心脏成纤维细胞摄取,且两者摄取效率无差异。相比正常饮食组,高脂饮食小鼠小肠上皮组织外泌体可显著增加心脏成纤维细胞增殖分化、细胞外基质积聚、炎症等基因表达,合成α-SMA蛋白、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白能力增强。结论:高脂饮食可以通过小肠上皮组织外泌体促进心脏成纤维细胞增殖、分化及胶原产生。

宫颈癌细胞株和宫颈上皮组织中Pin1和Cyclin D1的表达及临床意义

背景与目的:肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在人类多种肿瘤中过表达,Pin1过表达可增强CyclinD1表达,在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究拟探讨宫颈癌细胞株及宫颈上皮组织中Pin1、CyclinD1的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR、Westernblot法检测HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞中Pin1和CyclinD1基因蛋白表达,免疫组化法检测10例正常宫颈、21例宫颈上皮内瘤样病变、57例浸润癌组织中Pin1和CyclinD1的表达状况,评价其临床意义。结果:HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞存在不同程度Pin1mRNA及蛋白过表达(P<0.05)。正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变、浸润癌组织中Pin1蛋白表达逐渐增强,分别为0%、47.62%、64.91%(P<0.05)。Pin1蛋白过表达与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴结转移无关(P>0.05);但宫颈腺癌组织中Pin1表达明显高于鳞癌(P<0.05)。Pin1过表达与CyclinD1表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:Pin1在宫颈癌细胞株及宫颈癌组织中存在mRNA及蛋白水平上的过表达,Pin1过表达与CyclinD1表达密切相关,Pin1和CyclinD1异常表达可能参与宫颈癌的发生发展。

自体血清与胎牛血清培养口腔黏膜角质细胞及上皮组织的实验研究

目的探讨自体血清培养人口腔黏膜角质细胞的可行性,为组织工程口腔黏膜用于临床提供理论和技术依据。方法应用自行制备的含10%、20%和30%自体血清的培养液及10%胎牛血清培养液,对人口腔黏膜角质细胞进行培养。对比观察不同浓度自体血清和胎牛血清培养的口腔黏膜角质细胞及上皮组织生长情况,绘制10%自体血清组及10%胎牛血清组细胞生长曲线及计算其倍增时间。并行抗-HLA免疫荧光检测培养上皮。结果各浓度自体血清组和10%胎牛血清组细胞生长及形态无明显差别,10%自体血清组细胞倍增时间为24.02±1.80h,与10%胎牛血清组20.90±0.79h比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞24h克隆形成率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);随自体血清浓度升高获得黏膜上皮面积增大,厚度增加,以20%自体血清组最为明显,与10%胎牛血清组培养黏膜上皮比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各组培养上皮经抗-HLA免疫荧光检测为阳性。结论制备的自体血清能完全替代胎牛血清对口腔黏膜角质细胞进行培养,且培养的口腔黏膜上皮组织分化优于胎牛血清。

神经上皮组织起源的脑肿瘤中连接蛋白的表达

目的 探讨连接蛋白 (Cx) 43、3 2在神经上皮组织起源的脑肿瘤中表达及其与肿瘤的病理类型、恶性程度的关系。方法 利用Cx43、Cx3 2和Ki 67单抗或多抗对 8例正常脑组织、5 0例神经上皮组织起源的脑肿瘤和 4个恶性脑瘤体外细胞系进行免疫组化检测。结果 神经上皮组织起源的脑肿瘤中Cx表达阳性率为 5 4% ,Cx3 2仅在低恶度少枝胶质细胞瘤中表达 ,Cx43表达随WHO分级升高而下降 ;与Ki 67标记指数 (LI)呈负相关。表达缺失多见于高Ki 67LI者。结论 神经上皮组织起源的脑肿瘤中CX 表达可下降或缺失 。

营养限制对断奶羔羊血浆和胃肠道上皮组织抗氧化能力的影响

本研究旨在探讨能量、蛋白质或能量与蛋白质同时限制饲养对断奶羔羊血浆和胃肠道上皮组织抗氧化能力的影响。选取48头28日龄断奶羔羊,按随机区组原则分配到以下4组中:对照组、40%能量限制组、40%蛋白质限制组以及40%能量与40%蛋白质同时限制组。每组4个重复,每个重复3只羊。试验分为营养限制期(7周)和营养恢复期(9周),共16周。结果表明:能量或蛋白质限制显著降低第21天血浆谷胱甘肽还原酶(GR)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),同时显著提高第21天丙二醛(MDA)含量(P<0.05),此外,蛋白质限制显著提高第41天MDA含量(P<0.05);能量与蛋白质同时限制显著降低第21天血浆过氧化氢酶(CAT)、GR活性,第41天血浆CAT、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及第21天、第41天和第111天血浆T-AOC(P<0.05),同时显著提高第21天和第41天血浆MDA含量(P<0.05)。试验第42天,能量限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜谷胱甘肽(GSH)含量、空肠黏膜CAT和GR活性(P<0.05);蛋白质限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜GSH含量、空肠黏膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和T-AOC(P<0.05);能量和蛋白质同时限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜GSH含量和CAT活性,空肠黏膜SOD、GSH-Px和GR活性以及T-AOC(P<0.05)。试验第112天,能量限制显著降低空肠黏膜SOD活性和T-AOC(P<0.05);蛋白质限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜T-AOC以及空肠黏膜SOD活性(P<0.05);能量和蛋白质同时限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜T-AOC以及空肠黏膜GSH含量和SOD、GR活性(P<0.05)。由此得出,对断奶羔羊进行能量、蛋白质或能量与蛋白质同时限制饲养会降低羔羊血浆和胃肠道上皮组织的抗氧化能力,并且该影响在试验观测期内不随营养水平的恢复而彻底解除。

人支气管上皮组织癌变各阶段2-DE图谱及差异分析

背景与目的:支气管上皮细胞的癌变是一个多基因参与、多阶段的复杂过程,但癌变机理仍不清楚,应用蛋白质组学技术研究此过程有可能识别癌变相关蛋白质,对揭示肺鳞癌癌变机制具有重要的意义。本研究的目的是优化支气管上皮组织的蛋白质样品制备方法,建立人支气管上皮癌变各阶段组织的2-DE图谱并进行差异分析,为鉴定肺鳞癌癌变相关蛋白质奠定基础。方法:收集、筛选人支气管正常上皮、鳞状上皮化生、不典型增生和上皮浸润癌组织标本。改良的脱氧胆酸-三氯醋酸(deoxycholate-trichloroaeticacid,DOC-TCA)法提纯支气管上皮总蛋白质,应用固相pH梯度双向凝胶电泳分离各阶段组织的总蛋白质,凝胶经银染显色后,用ImageMaster2D软件分析图谱,比较差异表达蛋白质。应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图谱(peptidemassfingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质。结果:应用改良的DOC-TCA法提纯总蛋白质进行双向电泳,获得了分辨率高、重复性好的人支气管上皮组织的双向电泳图谱,支气管正常上皮、鳞状上皮化生、不典型增生和上皮浸润癌组织凝胶的平均蛋白质点数依次为1189.50±39.89、1227.

蓝非鲫肠道上皮组织的扫描电镜观察

The intestine epithelial tissue of the Oreochromis aureus (Steindachner) was observed with scanning electron microscope. The intestine of O. aureus (Steindachner) was divided into three parts: the front, the middle and hind. The folds of the front intestine and the middle intestine arranged in sawtooth and small wave along the direction of the intestine. The folds of the latter intestine have many strong microvillis and the shape of its goblet cell looks like a hollow. The columnar cell of the middle intestine arranged closely. The columnar cell of the latter intestine is scattered unevenly. The goblet like cell of the middle and latter intestine looks like a pit. The function of digestion and assimilation in the front is stronger than that in the middle and the hind.

增生性疤痕组织与正常上皮组织FTIR光谱研究

通过对40例疤痕组织和正常皮肤组织的ETIR光谱比较分析发现,由于个体差异,其光谱均可分为三种不同类型。此外,疤痕组织中的胶原、蛋白质、核酸和脂类等生物大分子的吸收峰强度均在不同程度上高于正常皮肤组织,但两者的A_(1083)/A_(1548)并无明显差异。提示疤痕组织中的细胞仍属正常生长,治疗中不应损伤。

宫颈特殊染色法上皮组织特殊染色液在宫颈病变检查中的临床意义

目的探讨采用叶酸受体介导的宫颈特殊染色法(FRD)上皮组织特殊染色液对宫颈病变检查的临床价值,为早期及时发现宫颈病变提供参考依据。方法 2014年1月至2014年4月联合全国14家医院随机对妇科门诊检查的2000例妇女进行筛查,行液基薄层细胞检测(TCT)、人乳头瘤病毒(HPV)、FRD染色检查,以病理组织学检查作为金标准,比较上述检测方法的诊断学评价标准。结果 FRD检出130例阳性患者,检出率为6.5%,灵敏度为83.06%,特异度为98.56%,漏诊率为16.94%,误诊率为1.44%,Kappa=0.821,P=0.000。TCT检出125例阳性患者,检出率为6.255%,灵敏度为86.29%,特异度为99.04%,漏诊率为13.71%,误诊率为0.96%,Kappa=0.850,P=0.000。HPV检出120例阳性患者,检出率为6.00%,灵敏度为79.84%,特异度为98.88%,漏诊率为20.16%,误诊率为1.12%,Kappa=0.806,P=0.000。三种检查方法检出率由高到低分别为FDR、TCT、HPV,但检出率比较差异无显著性(χ2=0.427,P=0.808)。结论三种检查方法的一致性比较TCT>FRD>HPV,但检出率比较差异无显著性,FRD与传统TCT、HPV检查具有相同的检出效能,但其具有更加方便、快速、经济的特点,值得作为一种快速筛检方法应用并推广。

皱纹盘鲍肠上皮组织立克次体超微结构与细胞病理学研究

利用电镜技术对患病濒死皱纹盘鲍 (H aliotis Discus hanna Ino)进行病原体检测和病理观察 ,在肠上皮组织中发现大量立克次体。研究表明 ,皱纹盘鲍肠上皮细胞中的立克次体分为增殖型立克次体和静止型立克次体 2种类型。立克次体以皱纹盘鲍肠上皮细胞为感染的靶细胞 ,造成细胞微绒毛全部或部分破坏 ,细胞功能丧失 ,是造成养殖皱纹盘鲍病害发生和死亡的主要病原体。

体外重建角膜上皮组织的实验研究

目的利用体外培养重建同基因角膜上皮组织的新方法，为角膜化学伤后重建角膜表面提供理想的角膜上皮移植片。方法以同种或异种脱水保存的浅层角膜基质片作为载体，通过体外培养自体角膜缘上皮细胞，并使其在体外形成复层角膜上皮组织。结果经组织学、细胞超微结构的观察，以及细胞分化蛋白表达的检测，证实体外培养的角膜上皮组织与生理状态下的角膜上皮组织相近。结论体外培养的角膜上皮组织片可作为较理想的角膜上皮移植材料。

上皮组织增生时肥大细胞变化的电镜下观察

目的 :观察上皮组织增生时肥大细胞超微结构的变化 ,为了解上皮组织增生与肥大细胞的关系提供形态学依据。方法 :C- 1号小鼠 2 0只 ,用食醋涂抹右耳皮肤 ,每日一次 ,以左耳作对照。在实验后 140天处死小鼠 ,取耳廓组织 ,常规电镜制片透射电镜观察。结果 :在醋致皮肤上皮组织增生时 ,真皮结缔组织肥大细胞呈显著的脱颗粒现象 ,结缔组织肥大细胞并可迁移至上皮组织中 ,真皮肥大细胞与血管内皮细胞 ,神经纤维等密切接触。结论 :肥大细胞可能参与上皮组织的增殖 ,肥大细胞与上皮细胞间有相互促进作用 ,并且肥大细胞与血管内皮细胞 。

康复新液联合黄腐酸治疗重度宫颈糜烂经上皮组织特殊染色法评估HPV阳性转阴的研究

目的研究宫颈外敷康复新液联合口服黄腐酸促使重度宫颈糜烂HPV阳性患者的转阴效果,并经上皮组织特殊染色法进行评估。方法将2018年7月—2020年2月期间在石家庄市第四医院和张家口市第一医院就诊的HPV阳性重度宫颈糜烂患者共106例纳为研究对象,按就诊序号随机分为治疗组和对照组各53例。治疗组将浸透康复新液的棉球塞入阴道外敷在宫颈上,每晚1次,保留30 min/次,同时口服含黄腐酸成分的乌金液20 ml,2次/d,连续治疗3个月。对照组仅给予含黄腐酸成分的乌金液抑菌凝胶通过阴道注入治疗,每晚1次,连续治疗3个月。通过上皮组织特殊染色法对治疗前后HPV阳性检测进行评分,并观察患者治疗前后的临床症状指标、HR-HPV含量及HR-HPV16或18阳性的变化情况,同时对免疫相关指标CD4+进行观察。结果治疗后经上皮组织特殊染色法评分比较,治疗组评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。同时两组患者的临床症状指标、宫颈糜烂恢复程度、经阴道超声观察宫颈管内糜烂恢复情况、HR-HPV含量变化及HR-HPV16或18阳性的变化比较,治疗组均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。且治疗组治疗后免疫相关指标CD4+表达阳性率明显降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论康复新液联合黄腐酸抑制HPV感染有确切疗效,通过上皮组织特殊染色法评估康复新液联合黄腐酸抑制HPV作用的效果简单且实用。

食管癌高发区人胚胎发育过程中食管上皮组织P16、PCNA蛋白的表达及其与形态学变化关系

目的初步探讨食管癌高发区人胎儿食管上皮组织抑癌基因p16和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)与人胚胎发育过程中食管上皮细胞增殖特性的关系。方法采用免疫组化ABC法检测3～10月份胎儿食管上皮组织中p16和PCNA的表达状况。结果在26例食管癌高发区人胎儿食管上皮组织中,p16蛋白总阳性率61.5%(16/26),p16蛋白阳性率在低月龄组中明显低于高月龄组(P<0.05),PCNA单位面积平均阳性细胞数为(450±156)/mm2,PCNA单位面积阳性细胞数在低月龄组中明显高于高月龄组(P<0.05)。结论食管癌高发区人胎儿食管上皮组织中p16基因的表达和PCNA单位面积阳性细胞数与胎龄密切相关,可以客观反映食管癌高发区人胎儿食管上皮的组织分化状态。

组织工程气管上皮组织体外构建的研究

目的:体外构建气管上皮组织,为气管组织工程奠定基础。方法:利用消化法获得气管上皮细胞、成纤维细胞,体外扩增后作为种子细胞,在胶原上接种气管上皮细胞、成纤维细胞,体外构建活性双层气管上皮组织,并行组织学检测。结果:复合培养的组织学苏木精-伊红(H-E)染色切片显示成纤维细胞构成的薄层结缔组织上有气管上皮细胞形成的上皮细胞层。结论:利用胶原成功地在体外构建出了气管上皮组织。

识别人体上皮组织基膜的CAN181抗体及其在鼻咽癌组织中的定位

基膜(又称基底膜)属细胞外间质。基膜主要有两种,一种是分隔上皮与结缔组织的膜,称为上皮组织基膜;另一种分隔结缔组织与血管的膜,称为血管内皮基膜。抗IV型胶原和基膜粘连蛋白(lamimin)的多克隆抗体能识别这两种基膜。传统的PAS染色能显示这两种基膜。但也显示基膜外其他多糖类物质。作者在研制抗鼻咽癌单克隆抗体的同时获得一株杂交瘤细胞株,其分泌的抗体(命名为CAN181)

Fascin与上皮组织肿瘤

Fasc in基因属于fasc ins家族,其蛋白质编码产物是一种结构独特、进化保守的肌动蛋白(actin)交联蛋白,位于细胞膜皱褶、微棘及应力纤维,在各种转化细胞中促使细胞膜突起并增加细胞运动性。近年来的研究发现,fasc in在许多上皮来源的肿瘤组织细胞中表达上调,在肿瘤的进展中起重要作用。本文综述了fasc in的研究现状及其在上皮组织肿瘤中的研究进展。

T-1型脱细胞异体组织补片修复尿路上皮组织缺损临床报告

目的就T-1型脱细胞异体组织补片在泌尿系尿路上皮组织缺损(包括创伤、狭窄等)的应用进行小结。方法利用T-1型脱细胞异体组织补片进行整形修补患者共14例,其中肾盂狭窄、肾盂积水3例,输尿管狭窄5例,膀胱外翻,膀胱修补1例,尿道狭窄5例,术后随访6～39个月(平均26.4个月)进行疗效观察。结果 14例T-1型脱细胞异体组织补片修补术后,13例完全存活且均无感染及排斥反应,术后造影显示尿路结构畅通,功能恢复良好,患者无特殊不适主诉。1例右肾结石术后右肾盂狭窄,右肾造瘘术后,左肾先天性缺如,行异体组织补片修补术,术后造影提示右肾盂成形处仍有狭窄,目前尚未拔除右肾造瘘管,拟行Ⅱ期手术。结论 T-1型脱细胞异体组织补片可以作为尿路上皮组织缺损的修复替代物。