上皮细胞转化序列2通过调控p33生长抑制因子1表达影响食管鳞状细胞癌细胞的体外转移活性

目的探讨上皮细胞转化序列2(ECT2)与p33生长抑制因子1(p33ING1)的表达水平对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞转移活性的影响。方法采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测食管鳞癌组织和癌旁组织中ECT2和p33ING1的表达情况。将人食管鳞癌细胞系KYSE140细胞分为4组:空白组、阴性对照组(pcDNA 3.1 NC)组、过表达组(pcDNA 3.1 ECT2)和抑制表达组(si ECT2)。采用MTT法和细胞集落形成实验研究细胞的增殖和生长能力,Transwell实验和划痕实验研究细胞的侵袭和迁移能力,并用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blotting检测ECT2对p33ING1蛋白的影响。结果在食管鳞癌组织中ECT2表达增加,p33ING1表达降低。过表达ECT2能够显著增加KYSE140细胞的生长、集落形成、迁移以及侵袭能力,并能降低KYSE140细胞的凋亡率和p33ING1的表达;此外,抑制ECT2表达后能够逆转上述变化。结论ECT2高表达能够促进食管鳞癌KYSE140细胞的生长、转移,并抑制其凋亡,其机制可能与ECT2能够抑制p33ING1表达相关。

CircBICD2调节miR-218-5p/RhoA轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的:探讨环状RNA(CircRNA)·BICD2调节miR-218-5p/Ras同源基因家族成员A·(RhoA)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR、Western·blot分别检测OSCC组织、癌旁组织、人口腔上皮细胞系HOEC及OSCC细胞系HSC-4、CAL-27、SCC-15中Circ·BICD2、miR-218-5p表达及Rho·A蛋白表达;将SCC-15细胞分为Ct组(A,未转染对照)、si-NC组(B)、si-Circ·BICD2组(C)、miR-NC组(D)、miR-218-5p组(E)、si-Circ·BICD2+anti-NC组(F)、si-Circ·BICD2+anti-miR-218-5p组(G),qRT-PCR检测细胞中Circ·BICD2、miR-218-5p表达;·CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;·Western·blot检测Rho·A、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin表达;双荧光素酶验证Circ·BICD2与miR-218-5p、miR-218-5p与Rho·A的关系。结果:在OSCC组织和细胞中,Circ·BICD2、Rho·A蛋白高表达,miR-218-5p低表达,在SCC-15细胞中miR-218-5p相对表达量最低,Circ·BICD2表达及Rho·A蛋白相对表达量最高(P<0.05)。后续实验取SCC-15细胞为研究对象;与B组比较,C组Circ·BICD2、Rho·A蛋白表达降低,miR-218-5p表达升高(P<0.05);与D组比较,E组miR-218-5p表达上调,Rho·A蛋白表达下调(P<0.05);与C组、F组相比,G组miR-218-5p表达降低,Rho·A蛋白表达升高(P<0.05)。下调Circ·BICD2或过表达miR-218-5p均可抑制SCC-15细胞增殖和EMT,促进细胞凋亡;下调miR-218-5p减弱了沉默Circ·BICD2对SCC-15细胞增殖、EMT的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用;·Circ·BICD2靶向调控miR-218-5p/Rho·A轴。结论:沉默Circ·BICD2可能通过上调miR-218-5p来抑制Rho·A表达,抑制SCC-15细胞增殖、EMT,促进细胞凋亡。

miR-223-3p靶向上皮细胞转化序列2基因调控胃癌细胞周期和凋亡的相关性研究

目的探讨miRNA-223-3p和上皮细胞转化序列2基因(epithelial cell transforming sequence 2 oncogene,ECT2)在胃癌(gastric cancer,GC)细胞周期和凋亡中的作用和机制,并探讨其与GC临床病理因素的相关性及临床意义.方法首先采用实时荧光聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法检测正常胃黏膜(GSE-1)和GC细胞(SGC-7901,BGC-823)中ECT2和miR-223-3p的表达水平;其次,采用免疫组织化学RT-PCR法检测80例GC患者的癌组织及相应的癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm)中ECT2和miR-223-3p的表达情况;miR-223-3p抑制物和模拟物转染SGC-7901细胞,RT-PCR和Western blot检测转染后miR-223-3p和ECT2的表达.最后用流式细胞仪检测转染后细胞周期和凋亡的变化.结果与正常胃黏膜细胞相比,GC细胞中ECT2和miR-223-3p的表达水平均明显升高(P<0.05);免疫组织化学和RT-PCR结果显示,GC组织中ECT2阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);两者表达均与GC的分化程度、Lauren分型相关(P<0.05),与TNM分期密切相关(P<0.01),与患者的性别、年龄、肿瘤直径、Bormann分型无明显相关(P>0.05);两者之间表达呈显著正相关(P<0.05);将miR-223-3p类似物转染SGC-7901细胞后ECT2表达上调,转染抑制剂后ECT2表达下调.miR-223-3p抑制物促使肿瘤细胞的G1期阻滞和促进凋亡作用.结论 miR-223-3p是一种与GC细胞周期和凋亡密切相关的miRNA分子,他可以通过影响ECT2的表达来调节GC细胞的细胞周期和凋亡;两者可以作为反映GC生物学行为的有效指标.

RNA干扰抑制EZH2基因表达对子宫内膜癌细胞上皮-间质转化的影响

目的:利用RNA干扰技术靶向沉默EZH2基因,检测其对子宫内膜癌细胞增殖、迁移能力及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:实时荧光定量PCR、Western blot检测EZH2在子宫内膜细胞ESC及子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2中的表达差异。利用化学技术合成小分子siRNA转染子宫内膜癌细胞,靶向抑制EZH2基因表达。CCK-8、Transwell小室检测干扰前后子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2增殖、迁移能力变化。Western blot检测干扰前后子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2中EMT相关蛋白E-cadherin、α-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达变化。结果:(1)EZH2在子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2中的表达明显高于子宫内膜细胞ESC(P<0.01)。(2)RNA干扰抑制EZH2基因表达后,ECC-1、RL95-2细胞增殖、迁移能力降低(P<0.01)。(3)RNA干扰抑制EZH2基因表达后,ECC-1、RL95-2细胞中上皮标志物E-cadherin和α-catenin的蛋白表达水平上调(P<0.05),间质标志物N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平下调(P<0.01)。结论:EZH2在子宫内膜癌细胞中高表达,siRNA靶向沉默EZH2基因可抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和上皮-间质转化。

肝癌组织上皮细胞转化序列2基因的表达及其临床意义

目的探讨肝癌组织上皮细胞转化序列2(ECT2)基因的表达及其临床意义。方法从GEO数据库下载相关芯片数据,选取GPL3921平台包含的220例正常肝组织和215例肝癌组织及其附带临床信息进行分析。根据ECT2基因(219787_s_at)表达值的中位数(5. 54)将肝癌患者分为ECT2基因低表达组107例和ECT2基因高表达组108例,比较两组患者的临床特征以及预后。采用Cox模型分析肝癌患者预后的影响因素。结果肝癌组织中ECT2基因表达水平高于正常肝组织(P <0. 05);相比于ECT2基因低表达组,ECT2基因高表达组的甲胎蛋白(AFP)水平、原发肿瘤-区域淋巴结-远处转移(TNM)分期和肿瘤转移风险更高,肿瘤直径更大,预后更差(P <0. 05)。多因素Cox分析结果显示,AFP>300 ng/ml、TNM分期Ⅱ～Ⅲ期、高转移风险、ECT2基因高表达均是患者预后的独立危险因素(均P <0. 05)。结论 ECT2基因在肝癌组织中高表达,是肝癌患者预后的独立危险因素,ECT2基因高表达患者预后较差。

Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响

目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。

miR-107通过RAP2B基因调控RhoA/ROCK通路对喉癌细胞上皮间质转化的机制研究

目的探索miRNA-107通过RAP2B基因是否可以调控RhoA/ROCK通路对喉癌细胞上皮间质转化(Epithelialmesenchymal transition,EMT)及增殖、侵袭能力产生影响并探讨其作用机制。方法将miR-107 mimic、si-RAP2B、miR-107 inhibitor、si-RAP2B+miR-107 inhibitor以及相对应的对照组转染至TU1和TU8细胞;CCK-8实验测定TU1和TU8细胞的增殖能力,Transwell试验测定TU1和TU8的侵袭能力,划痕实验测定TU1和TU8的迁移能力;Western blot分析RAP2B、RhoA、ROCK和EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、N-cadherin的表达情况。结果miR-107过表达和沉默RAP2B均可降低TU1和TU8细胞增殖(F_(TU1)=14.652,F TU8=13.248,P<0.01)、细胞侵袭(F_(TU1)=15.037,F TU8=12.024,P<0.01)、细胞迁移能力(F_(TU1)=14.532,F TU8=11.065,P<0.01)及Vimentin(t TU1=8.28,t TU8=8.16,P<0.01)、N-cadherin(t TU1=7.63,t TU8=8.04,P<0.01)表达,提高E-cadherin(t TU1=8.69,t TU8=7.63,P<0.01)的表达水平,抑制miR-107可逆转沉默RAP2B对TU1和TU8细胞的影响。结论miR-107在TU1和TU8组织低表达,其可能通过RAP2B基因调控RhoA/ROCK通路促进TU1和TU8细胞的侵袭、迁移及EMT。

胶质瘤相关癌基因同源蛋白2促进结肠癌细胞系SW620的上皮-间质转化

背景与目的:胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(glioma-associated oncogene homologue 2,GLI2)是Hedgehog信号通路重要的转录因子,不仅参与正常的细胞分化,而且在多种肿瘤细胞中异常激活,与肿瘤转移密切相关。探讨GLI2与结肠癌细胞系SW620上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系及其可能机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测人结肠癌细胞系SW620、SW480、HCT116和HT29中E-cadherinmRNA表达,以GLI2干扰慢病毒感染SW620细胞,用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中GLI2 mRNA表达和蛋白水平,采用Transwell小室检测细胞侵袭、迁移能力,黏附实验检测同、异种细胞间黏附能力,Western blot检测细胞中p-AKT、N-cadherin、vimentin、MMP2和E-cadherin蛋白水平。结果:4种细胞系中,SW620的E-cadherin mRNA表达最低(P<0.05),SW620转染72 h后,可见明显的荧光表达;与空病毒组和对照组相比,干扰组细胞的GLI2表达降低(P<0.05);细胞侵袭和迁移能力减弱(P<0.05);同种细胞黏附能力增强(P<0.05);异种细胞黏附能力减弱(P<0.05);p-AKT、N-cadherin、vimentin和MMP-2的表达降低(P<0.05)、E-cadherin表达增加(P<0.05)。结论:GLI2可能通过上调p-AKT、N-cadherin、vimentin和MMP-2表达和抑制E-cadherin表达来促进结肠癌细胞系SW620的EMT。

AP-4、EZH2基因表达量与子宫内膜癌病灶中细胞凋亡、上皮间质转化的相关性研究

目的:研究AP-4、EZH2基因表达量与子宫内膜癌病灶中细胞凋亡、上皮间质转化的相关性。方法:选择在孝感市第一人民医院接受手术切除治疗的子宫内膜癌患者,收集子宫内膜癌病灶及癌旁病灶适量,抽提RNA后测定AP-4、EZH2基因及凋亡基因、上皮间质转化基因的表达量。结果:子宫内膜癌病灶内AP-4、EZH2基因的mRNA表达量显著高于癌旁病灶;子宫内膜癌病灶内SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量显著高于癌旁病灶,Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin的mRNA表达量显著低于癌旁病灶;AP-4高表达的子宫内膜癌病灶内SRPX2、RLIP76的mRNA表达量显著高于AP-4低表达的子宫内膜癌病灶,Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表达量显著低于AP-4低表达的子宫内膜癌病灶;EZH2高表达的子宫内膜癌病灶内ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量显著高于EZH2低表达的子宫内膜癌病灶,α-catenin的mRNA表达量显著低于EZH2低表达的子宫内膜癌病灶。结论:子宫内膜癌病灶内高表达的AP-4、EZH2基因分别能够抑制癌细胞凋亡、促进癌细胞上皮间质转化。

上皮细胞转化序列2在甲状腺乳头状癌中的表达研究

目的探讨上皮细胞转化序列2(ECT2)在甲状腺乳头状癌中的表达情况及意义。方法选取2020年5至12月于台州市中心医院手术切除的甲状腺乳头状癌组织标本35例及结节性甲状腺肿组织标本32例为研究材料。采用RT-PCR法检测两种组织中ECT2 mRNA表达水平,采用免疫组化法定性检测ECT2蛋白表达情况,采用Western blot法定量检测ECT2蛋白表达水平。结果相对于结节性甲状腺肿组织,ECT2 mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平上调(2.4327±0.0127,P<0.05)。ECT2蛋白在甲状腺乳头状癌组织表达阳性率明显高于结节性甲状腺肿组织(57.1%比6.3%,P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织与结节性甲状腺肿组织ECT2蛋白表达水平分别为1.6542±0.0159、0.4826±0.0513(P<0.05),甲状腺乳头状癌组织ECT2蛋白表达上调。结论ECT2在甲状腺乳头状癌组织中表达上调,可能为甲状腺乳头状癌早期诊断提供分子生物学依据。

沉默EMI2基因抑制肝内胆管癌HuCCT1细胞的增殖和上皮间质转化

目的:探索早期有丝分裂抑制子2(early mitotic inhibitor 2,EMI2)在肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,iCCA)中的表达及生物学功能,并探讨EMI2对iCCA细胞HuCCT1增殖、侵袭及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:生物信息学技术检测EMI2在胆管癌中的表达情况,构建沉默EMI2的HuCCT1稳转株细胞(shEMI2),观察其对HuCCT1细胞增殖、侵袭和EMT的影响。结果:生物信息学技术显示EMI2在胆管癌组织中高表达,Western Blot和RT-PCR检测EMI2敲低效率。CCK-8验证shEMI2组的OD_(450)值要低于shCtrol组(P<0.05),且shEMI2组细胞克隆形成数目(26±2)低于shCtrol组(57±4)。侵袭结果显示,shEMI2组侵袭细胞数(39±4.92)较shCtrol组(195±14.00)少。细胞周期实验显示,shEMI2组较shCtrol组G_(2)/M期的细胞比例减少,处于G_(1)期的细胞比例增多(P<0.05)。细胞凋亡实验表明,shEMI2组的细胞凋亡率提高(P<0.05)。Western Blot和免疫荧光结果提示,沉默EMI2可以促进E-cadherin蛋白上调,N-cadherin和Vitmentin蛋白含量下调。结论:沉默EMI2基因抑制iCCA细胞增殖、侵袭、迁移和EMT的过程。

转化生长因子β_1、白细胞介素2、7与卵巢上皮性癌患者腹腔局部免疫功能的关系

目的:探讨转化生长因子β1(TGFβ1)和白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-7(IL-7)与卵巢上皮性癌腹腔局部免疫功能的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,测定49例卵巢上皮性癌,18例卵巢良性上皮性肿瘤患者血清、腹腔液中TGFβ1和IL-2、IL-7水平,比较两组之间各细胞因子水平的差异性及其相互关系。结果:卵巢上皮性癌患者血清中TGFβ1、IL-2水平与良性对照组差异无显著性(P>0.05),IL-7水平则高于对照组(P<0.05);腹腔液中TGFβ1水平明显高于对照组(P<0.01),IL-2水平明显低于对照组(P<0.05),IL-7水平则与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。Ⅲ期患者腹腔液中TGFβ1水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01)。卵巢上皮性癌患者血清与腹腔液中TGFβ1、IL-2相关性不显著,而IL-7水平存在正相关;卵巢上皮性癌患者血清中TGFβ1;、IL-2和IL-7水平两两之间均无明显相关性;但腹腔液中TGFβ1与IL-2、IL-7水平均存在显著的负相关,IL-2与IL-7水平则无明显相关性。结论:卵巢癌存在腹腔局部免疫缺陷,腹腔液中TGFβ1、IL-2和IL-7参与这一过程,且3者之间可能存在一定的关系。

α粒子诱发转化人支气管上皮细胞系BEP2D中XRCC5等基因的突变检测

目的与方法 :用聚合酶链式反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)方法观察α粒子诱发人支气管上皮细胞系BEP2D细胞转化过程中相关基因的改变。结果 :细胞转化过程中 ,双链断裂修复基因XRCC5发生碱基突变 ,改变从转化早期过程就持续存在 ;而p16基因exon2和hMSH2基因exon12未见变化。结论 :XRCC5基因在α粒子照射后早期发生突变 ,使细胞丧失修复双链断裂损伤的能力 ,是α粒子诱发支气管上皮细胞转化过程中的启动事件之一。

婆罗双树样基因4对肝癌细胞侵袭转移和上皮间质转化的影响

目的:探讨婆罗双树样基因4(SALL4)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵袭转移和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:构建过表达和靶向干扰SALL4的稳定HCC细胞株,Transwell小室实验检测肝癌细胞的迁移侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot检测SALL4和EMT相关分子的mRNA和蛋白表达水平。结果:Transwell小室迁移侵袭实验证明,SALL4增强肝癌细胞迁移侵袭能力,SALL4过表达Huh7细胞E-cadherin mRNA和蛋白水平均降低,而Vimentin mRNA和蛋白水平均增加;反之,与对照组比较,转染SALL4-siRNA的HepG2细胞E-cadherin mRNA和蛋白水平均增加,而Vimentin mRNA和蛋白水平均降低。随着SALL4表达上调,Huh7细胞的Twist、Snail、Slug mRNA水平显著升高,反之,干扰SALL4基因表达的HepG2细胞Twist、Snail、Slug mRNA水平下降。结论:SALL4对肝癌细胞侵袭转移能力和EMT有重要影响,可能成为靶向EMT控制肝癌侵袭转移的策略之一。

抑癌基因PTEN对舌鳞状细胞癌侵袭性及上皮-间质转化相关蛋白表达的影响

目的:探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)对舌鳞状细胞癌侵袭性的影响,阐明PTEN与舌鳞状细胞癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法:舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株分为未转染组(SCC-4细胞)、转染组(稳定转染了PTEN的SCC-4细胞)和空载体组(转染了空载体的SCC-4细胞)。用Transwell侵袭实验测定3组SCC-4细胞的侵袭能力;Western blotting法检测与EMT相关的E-cad、vimentin和snail蛋白的表达。结果:未转染组、空载体组和转染组SCC-4细胞在Transwell侵袭小室中培养36h后穿膜细胞数分别为82±5、80±4和42±5,其中未转染组与空载体组比较差异无统计学意义(P>0.05),转染组与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。与未转染组比较,转染组SCC-4细胞中E-cad、vimentin和snail蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),E-cad表达上调,vimentin和snail表达下调;空质粒组与未转染组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PTEN可能是通过抑制舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株的EMT过程来降低其侵袭能力。

反义ERK2基因对结缔组织生长因子诱导肾小管上皮细胞向间充质转化的调控效应

目的研究细胞外信号调节激酶2(ERK2)信号转导通路对结缔组织生长因子(CTGF)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转化的调控效应。方法腺病毒介导的反义ERK2基因(Adanti-ERK2)按感染强度50、100、200转染HK-2细胞,确定最适感染强度。按作用因素的不同将HK-2细胞分为对照组、Ad-LacZ组、CTGF组和Adanti-ERK2组。免疫组织化学检测E-Cadherin和Vi mentin的表达,Western blot法检测E-Cadherin、Vi mentin及ERK2的表达变化;细胞接种Boyden小室1、3、5 d时检测各组HK-2细胞迁移数目的变化。结果①Adanti-ERK2转染HK-2细胞最适感染强度为100。②HK-2细胞在CTGF刺激下E-Cadherin蛋白表达明显减少,Vi mentin表达增加,同时细胞内的ERK2蛋白表达显著增加;而Adanti-ERK2组E-Cadherin和Vi mentin表达变化不明显,ERK2蛋白表达较对照组明显减少。③接种5 d,HK-2细胞在CTGF刺激下细胞运动能力显著高于其他各组,而Adanti-ERK2组与对照组和Ad-LacZ组相比差异无显著性意义。结论以反义ERK2基因治疗可以有效阻断CTGF诱导的肾小管上皮细胞向间充质转化。提示ERK2信号转导通路在该转化中发挥重要作用。

直肠癌组织中YTHDF2、lncRNA TUSC7表达与上皮间质转化的关系及预后意义

目的研究直肠癌组织中YTH结构域N6-甲基腺嘌呤RNA结合蛋白2(YTHDF2)、长链非编码RNA抑癌候选基因7(lncRNA TUSC7)表达与上皮间质转化(EMT)的关系及临床预后意义。方法选取该院自2018年5月至2020年5月诊治的98例直肠癌患者。采用实时荧光定量PCR检测直肠癌组织和癌旁组织中YTHDF2、lncRNA TUSC7表达及EMT相关指标β-连环素(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)mRNA的表达。采用Pearson法分析YTHDF2 mRNA、lncRNA TUSC7与EMT相关指标的相关性。采用Kaplan-Meier曲线分析YTHDF2、lncRNA TUSC7表达对直肠癌无瘤生存预后的影响。采用多因素COX回归分析直肠癌无瘤生存预后的影响因素。结果直肠癌组织中YTHDF2、β-catenin、N-cad mRNA相对表达水平高于癌旁组织,而lncRNA TUSC7、E-cad mRNA相对表达水平低于癌旁组织(均P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA与β-catenin、N-cad mRNA表达呈正相关(均P<0.05),与E-cad mRNA表达呈负相关(均P<0.05);lncRNA TUSC7与β-catenin、N-cad mRNA表达呈负相关(均P<0.05),与E-cad mRNA表达呈正相关(均P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA与lncRNA TUSC7表达呈负相关(P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA、lncRNA TUSC7与TNM分期Ⅲ期、肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(均P<0.05)。YTHDF2高、低表达组3年无瘤生存率分别为59.57%(28/47)、88.24%(45/51)。lncRNA TUSC7高、低表达组3年无瘤生存率分别为88.00%(44/50)、60.42%(29/48)。YTHDF2高表达组3年累积无瘤生存率低于YTHDF2低表达组(Log Rankχ^(2)=11.370,P=0.001)。lncRNA TUSC7高表达组3年累积无瘤生存率高于lncRNA TUSC7低表达组(Log Rankχ^(2)=11.880,P=0.001)。TNM分期Ⅲ期、低分化程度、合并淋巴结转移、YTHDF2高表达、lncRNA TUSC7低表达是直肠癌患者无瘤生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论直肠癌组织中YTHDF2表达上调,lncRNA TUSC7表达下调,二者与不良临床病理特征及EMT有关,是新的评估直肠癌患者预后的标志物。

Bcl-2与CD34在基底细胞癌和毛发上皮瘤中的表达及意义

目的:探讨B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和集落分化抗原34(CD34)在基底细胞癌和毛发上皮瘤中的表达及意义。方法:选取2008年1月—2023年9月常熟市第五人民医院收治的基底细胞癌和毛发上皮瘤143例,根据不同疾病类型将患者分成毛发上皮瘤组(n=85)和基底细胞癌组(n=58),对所有患者进行免疫组化检查,比较Bcl-2与CD34在不同疾病中的表达。结果:基底细胞癌组Bcl-2表达的阳性率为100.00%,CD34表达的阳性率为0.00%,毛发上皮瘤组Bcl-2表达的阳性率为89.41%,CD34表达的阳性率为13.48%,两组Bcl-2表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Bcl-2在基底细胞癌诊断中的敏感度高于CD34,特异度低于CD34,差异有统计学意义(P<0.05);两种检查方式在基底细胞癌诊断中的准确率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Bcl-2在毛发上皮瘤诊断中的敏感度高于CD34,特异度低于CD34,差异有统计学意义(P<0.05);两种检查方式的准确率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Bcl-2在基底细胞癌和毛发上皮瘤中呈高表达,在疾病的鉴别诊断中具有重要意义。CD34基底细胞癌中不表达,在毛发上皮瘤呈低表达,对于疾病的诊断和鉴别无显著意义。

小凹蛋白-1、小凹蛋白-2在宫颈鳞状细胞癌及鳞状上皮内病变中的表达及意义

目的探讨小凹蛋白(Cav)-1、Cav-2在宫颈鳞状细胞癌及鳞状上皮内病变组织中的表达及意义。方法收集2016年1月至2020年12月乌鲁木齐市妇幼保健院病理科的宫颈手术切除石蜡包埋组织样本,包括正常组织40例、宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组织样本40例、宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组织样本40例、宫颈鳞状细胞癌组织样本40例。应用免疫组织化学法检测正常组织、宫颈HSIL组织样本、宫颈LSIL组织样本及宫颈鳞状细胞癌组织样本中Cav-1、Cav-2的表达,应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测宫颈鳞状细胞癌和正常组织中Cav-1、Cav-2及上皮-间充质转化相关分子[表皮生长因子受体(EGFR)、上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)]的信使RNA表达。结果宫颈鳞状细胞癌组Cav-1评分高于正常组、宫颈LSIL组、宫颈HSIL组[6.00(6.00,8.25)分比0.00(0.00,1.00)分、0.00(0.00,1.00)分、0.00(0.00,0.00)分](P<0.05),宫颈HSIL组与宫颈鳞状细胞癌组Cav-2评分均高于正常组和宫颈LSIL组,且宫颈鳞状细胞癌组Cav-2评分高于宫颈HSIL组[9.00(6.00,9.00)分比2.00(2.00,3.00)分](P<0.05)。宫颈鳞状细胞癌组Cav-1表达低于正常组(P<0.05);正常组与宫颈鳞状细胞癌组Cav-2、EGFR、E-cadherin、N-cadherin及Vimentin表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Cav-1、Cav-2在宫颈鳞状细胞癌中的表达明显高于宫颈鳞状上皮内病变及正常组织,证实其参与了宫颈鳞状细胞癌的发生发展;Cav-2在宫颈HSIL中的表达明显高于宫颈LSIL和正常组织,故Cav-2可能作为宫颈鳞状上皮内病变分级的鉴别诊断标志物。

肝星状细胞条件培养基激活ERK1/2通路诱导肝癌细胞增殖及上皮间质转化

目的探讨肝星状细胞(HSC)对肝癌细胞(HCC)恶性生物学行为的影响及其相关机制。方法分别培养SMMC-7721肝癌细胞、Hep G2肝癌细胞和LX-2 HSC,采用LX-2 HSC条件培养基(LX2-CM)、丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂U0126处理肝癌细胞,TranswellTM小室检测肝癌细胞的侵袭和迁移能力,CCK-8法检测细胞的增殖情况,实时定量PCR和Western blot法分别检测两种肝癌细胞磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2、c-Myc、波形蛋白(vimentin)、上皮钙黏素(E-cadherin)的mRNA和蛋白水平。结果 LX2-CM能促进SMMC-7721细胞和Hep G2细胞的增殖、侵袭和迁移,其作用可被U0126阻断。LX2-CM可以上调p-ERK1/2、c-Myc、vimentin的水平,下调E-cadherin的水平;U0126处理细胞后,p-ERK1/2、c-Myc、vimentin的水平显著降低,E-cadherin水平明显升高。结论 LX2-CM能通过ERK1/2通路激活c-Myc,促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导上皮间质转化。