细胞周期蛋白依赖性激酶在miR-193a5p调控卵巢癌细胞增殖及上皮细胞间充质转变中的作用

目的:探讨miR-193a-5p靶向CDK14并调控卵巢癌细胞OVAC的增殖和上皮间充质转变(EMT)的作用。方法:通过Target Scan Human分析miR-193a-5p与CDK14的匹配情况,通过荧光素酶报告系统检测miR-193a-5p靶向CDK14情况;在miR-193a-5p mimics过表达或者miR-193a-5p inhibitor基因沉默miR-193a-5p的情况下,采用免疫印迹检测CDK14,EMT相关蛋白质E-cadherin、vimentin、fibronectin和N-cadherin的表达量,采用CCK-8检测卵巢癌细胞OVAC增殖情况,MMT检测卵巢癌细胞OVAC的细胞活力。结果:miR-193a-5p靶向CDK14的3‘UTR;过表达miR-193a-5后,CDK14的表达下降,EMT相关蛋白质E-cadherin的表达上升,vimentin、fibronectin和N-cadherin的表达下降,卵巢癌细胞OVAC的增殖和细胞活力均增加;同时,基因沉默miR-193a-5p后,CDK14的表达上升,EMT相关蛋白质E-cadherin的表达下降,vimentin、fibronectin和N-cadherin的表达量上升,卵巢癌细胞OVAC的增殖和细胞活力均减少。结论:miR-193a-5p通过靶向CDK14的3‘UTR降低卵巢癌细胞OVAC的增殖、细胞活力和EMT。

上皮细胞向间充质细胞转变在肝癌进程中的作用

上皮细胞向间充质细胞转变(epithelial to mesenchymal transition,EMT)是细胞通过瞬时去分化为间充质表型,导致上皮细胞的可塑性发生变化的多步骤的生物学过程。EMT及其逆转MET多数发生在胚胎发生形态发生过程中。近期更多的证据显示EMT参与肝纤维化和肝癌进程。在肝癌转移的早期阶段,细胞由于E-钙粘蛋白的消融而丧失细胞-细胞接触抑制,迁移能力增强,得以扩散到周围或远处组织,故EMT在肝癌转移的早期阶段中起关键作用。此外,由于EMT的增强诱导剂如转移生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)具有协调肝纤维化及肝癌进程的作用,故肝癌进程中上皮细胞的可塑性研究显得尤为重要。在本综述中,作者将阐述EMT-MET在肝癌进程中的重要性,及EMT在肝癌进程中的作用机制。同时,概述最近在识别影响重要EMT转录因子的临床诊治方面取得的进展。

结缔组织生长因子在人视网膜色素上皮细胞的增生、迁移和上皮细胞-间充质细胞转变中的作用

目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的增生、迁移和上皮细胞-间充质细胞转变(epithelial mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法采用CCK-8细胞计数试剂盒测定400 ng·m L-1CTGF处理后的ARPE-19细胞以及稳定表达CTGF siRNA或对照siRNA的ARPE-19细胞的增生情况。采用细胞划痕实验评估CTGF RNAi对ARPE-19细胞迁移的影响,同时测定稳定表达CTGF siRNA或对照siRNA的ARPE-19细胞中CTGF、FN、MMP-2和α-SMA的表达水平以评估CTGF对于TGFβ1诱导的EMT作用。结果 400 ng·m L-1CTGF处理组APRE-19细胞与未接受CTGF处理组细胞之间以及CTGF siRNA处理组与阴性对照siRNA组之间的细胞倍增时间均存在显著差异(均为P<0.05)。正常培养ARPE-19细胞组修复划痕的时间(≤48 h)显著少于CTGF RNAi靶向干扰处理组(≥72 h)。以TGF-β1诱导EMT,CTGF siRNA处理组与阴性对照组比较,CTGF、α-SMA、FN和MMP-2表达均显著下调。此外,外源性CTGF可单独诱导ARPE-19细胞α-SMA表达增加。结论 CTGF能够促进ARPE-19细胞增生,而CTGF RNAi不但能够显著抑制其增生还可显著抑制由划痕实验引发的ARPE-19细胞的迁移。此外,CTGF可通过上调α-SMA表达水平而增强ARPE-19细胞对于TGF-β1的反应,CTGF RNAi可使TGF-β1诱导的EMT减弱。

Snail1 siRNA对高糖诱导肾小管上皮细胞表型转变的影响

目的:观察Snail1 siRNA对高糖诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转变(TEMT)的影响。方法:原代培养肾小管上皮细胞分为5组:(1)对照组(含糖5.5mmol/L);(2)高糖组(含糖25mmol/L);(3)Snail1 siRNA处理组,转染Snail1 siRNA,6h后更换为高糖(含糖25mmol/L)培养;(4)control siRNA处理组,转染control siRNA作为siRNA阴性对照,6h后换为高糖(含糖25mmol/L)培养;(5)高渗组(含D-manntio19.5mmol/L);72h后收集细胞,用Western blotting和半定量RT-PCR检测Snail1、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin和E-cadherin蛋白和mRNA表达。结果:与高糖组比较,肾小管上皮细胞转染Snail1 siRNA后,Snail1 mRNA和蛋白表达水平分别下降62%和68%(P<0.01)。同时,Snail1 siRNA处理组α-SMA和vimentin蛋白和mRNA表达显著下调(P<0.01),而E-cadherin蛋白和mRNA表达显著上调(P<0.01)。结论:Snail1参与了高糖诱导TEMT的调节。

原发性肝细胞癌对索拉非尼耐药机制的研究进展

索拉非尼是目前公认的治疗晚期原发性肝细胞癌的分子靶向药物,但原发性肝细胞癌对其耐药性的出现,影响了药物对肝癌的疗效。原发性肝细胞癌对索拉非尼耐药存在多种机制。肝癌细胞本身表皮生长因子受体的表达上调及其下游信号通路的异常改变,沉默信息调节因子1的过表达,肝癌细胞的自噬能力增强及间充质转变均可能导致其对索拉非尼耐药。肝癌血管内皮细胞出现耐药,肿瘤微环境中缺氧诱导因子-1α、趋化因子及其受体上调等也可能影响肿瘤对索拉非尼的敏感性。该文就原发性肝细胞癌对索拉非尼耐药机制的研究进展进行综述。

抗肾间质纤维化研究进展

肾间质纤维化是慢性肾脏病进程中最重要的病理基础,探究肾间质纤维化的形成机制是了解慢性肾脏病发展过程的重要途径。单味药的有效成分大多数具有在抗炎症、抗氧化、调节免疫的过程中介导信号传导并调控下游因子的能力,研究表明多种抗纤维化的药物通过以上机制发挥作用。复方制剂可通过抑制炎症因子的表达达到抗肾间质纤维化的目的。中医药能延缓纤维化的程度,改善患者生活质量及疾病的预后,减轻肾脏的病理损害。中医药在抗肾脏纤维化方面将通过多个途径发挥其独特的优势。

姜黄素治疗肾间质纤维化分子机制研究进展

姜黄素是一种脂溶性多酚类化合物,目前有多项姜黄素治疗慢性肾脏病的临床试验。检索了姜黄素治疗肾脏纤维化的相关研究,从抑制炎症反应、抗氧化应激和抑制肾小管上皮细胞-间充质转变等分子机制方面归纳总结了姜黄素治疗肾间质纤维化的重要信号通路,以期为其进一步研究和开发提供借鉴。

IQ结构域GTP酶激活蛋白3表达对宫颈癌细胞增殖和转移的影响

目的探讨宫颈癌组织及细胞系中IQ结构域GTP酶激活蛋白3(IQGAP3)的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡和转移的影响。方法应用免疫组化和定量PCR检测IQGAP3在宫颈癌组织及癌旁组织中的表达,利用siRNA敲低IQGAP3在宫颈癌细胞CaSki和HeLa中的表达,通过MTT法和流式细胞术分别检测IQGAP3表达对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,通过Transwell检测IQGAP3表达对宫颈癌细胞迁移的影响,从而探讨IQGAP3在宫颈癌细胞的增殖、凋亡及迁移过程中的作用。结果 IQGAP3在宫颈癌组织及细胞中高表达,高表达IQGAP3的患者预后较差(χ~2=6. 15,P=0. 01);敲降IQGAP3在宫颈癌细胞CaSki和HeLa的表达后,宫颈癌细胞的增殖受到抑制,凋亡增加,细胞迁移减少,E-cadherin表达增加,N-cadherin表达下调(P均<0. 001)。结论 IQGAP3在宫颈癌组织中表达上调,在宫颈癌细胞增殖和转移过程中发挥重要作用; IQGAP3通过诱导上皮细胞-间充质转变(EMT),促进宫颈癌细胞的转移。

人参皂苷抗乳腺癌分子机制的研究进展

人参皂苷是一种三萜皂苷类化合物,研究发现其对乳腺癌具有治疗潜力。基于人参皂苷的分子分型,综述了人参皂苷抗乳腺癌的主要药理作用,其作用机制为诱导乳腺癌细胞的凋亡、调节乳腺癌细胞的周期和增殖、促进乳腺癌细胞自噬、对乳腺癌中上皮细胞-间充质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调节,对其进一步临床应用具有一定的指导意义。

腹膜透析相关性腹膜纤维化的机制

腹膜透析是终末期肾病的一种有效的替代治疗。腹膜透析中多种因素可引起腹膜上皮细胞-间充质转变(EMT)和腹膜炎症,进而导致腹膜结构和功能的改变,最终引起腹膜纤维化。研究表明多种分子机制参与腹膜纤维化过程,其中转化生长因子-β(TGF-β)发挥着重要的作用,TGF-β可以通过Smad依赖和Smad非依赖通路参与多种促纤维化事件,其中包括EMT。本文将针对近年来一些关于腹膜纤维化进展的分子机制进行总结。