SiRNA干扰FOXF2对人宫颈癌Hela细胞的上皮-间质转化的影响

目的研究siRNA干扰叉头框转录因子F2(forkhead box F2,FOXF2)对人宫颈癌Hela细胞的上皮-间质转化的影响。方法采用Real Time-PCR、Western blot分别检测siRNA干扰FOXF2前后Hela细胞中FOXF2mRNA、蛋白的表达变化来验证转染成功;同时用RT-PCR检测siRNA干扰FOXF2前后,Hela细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、Snail、Twist、P53、E2F1、RBmRNA的变化;Western blot检测siRNA干扰FOXF2前后,Hela细胞中E-cadherin、vimentin、Snail、P53、E2F1蛋白的变化。结果 siRNA干扰FOXF2后,RT-PCR、WB检测显示siRNA-FOXF2 1415组FOXF2的蛋白、mRNA均明显下降,验证转染率较高(P<0.001)。RT-PCR显示E-cadherin mRNA表达下降,vimentin、Snail及Twist mRNA表达升高;抑癌基因P53mRNA表达下降,致癌基因RB mRNA及其相关转录因子E2F1 mRNA表达升高。Western blot检测显示:E-cadherin蛋白表达下调,vimentin及Snail蛋白表达上调;抑癌基因P53蛋白表达下调,E2F1蛋白表达升高。结论 siRNA干扰FOXF2促进Hela细胞的上皮间质转化(EMT),并加速了肿瘤的进展。

Snail对宫颈癌细胞侵袭转移的影响

目的研究Snail与宫颈癌侵袭转移间的关系,并探讨其分子机制。方法构建正义全长Snail真核表达载体并转染宫颈癌细胞系HeLa、SiHa。采用Western blot方法分析相关基因表达,细胞伤痕愈合实验,Trans well模型穿膜细胞计数检测细胞侵袭转移能力。结果①在转染pEGFPC1/Snail的宫颈癌细胞株HeLa、SiHa中E-cadherin表达明显下调,Snail和Vimentin则表达上调(P<0.05)。②宫颈癌细胞系HeLa、SiHa转染正义全长Snail真核表达载体,12h细胞伤痕愈合能力显著提高(P<0.05);转染pEGFPC1/Snail后,HeLa、SiHa细胞12h穿膜细胞数明显增多(P<0.05)。Snail过表达可显著促进宫颈癌细胞株HeLa、SiHa的侵袭转移潜能。结论转录因子Snail促进宫颈癌上皮细胞间质化转变(EMT),并提高其侵袭转移能力。

Twist和E-cadherin在卵巢型子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的探讨上皮间质转化因子Twist1、Twist2和上皮黏附分子E-cadherin在卵巢型子宫内膜异位症中的表达及其意义。方法采用SP免疫组织化学法检测24例正常内膜(正常对照组)和卵巢型子宫内膜异位症异位内膜I-II期24例及III-IV期30例(异位组)的Twist1、Twist2及E-cadherin蛋白的表达染色评分分值情况,并作不同组间的比较。结果 Twist1、Twist2染色评分异位组I-II期(4.25±0.79,3.83±0.96)及IIIIV期(4.67±0.88,4.30±0.95)均高于正常组(3.50±0.83,3.54±0.88)(P均<0.05);Twist2染色评分异位组III-IV期(4.30±0.95)高于I-II期(3.83±0.96)(P<0.05)。E-cadherin蛋白染色评分异位组I-II期(3.79±0.98),III-IV期(3.57±0.73)均低于正常组(4.54±0.93)(P均<0.05)。Twist1和Twist2分别与E-cadherin呈负相关(r1=-0.42,r2=-0.81,P均<0.05);Twist1和Twist2呈正相关(r=0.32,P<0.05)。结论 Twist1、Twist2、E-cadherin表达与卵巢型子宫内膜异位症的发生相关,子宫内膜异位细胞侵袭转移能力的增强可能与Twist1、Twist2的高表达和E-cadherin的低表达有关。