上皮细胞黏附分子与肺癌、乳腺癌及部分消化系统肿瘤关系的研究进展

上皮细胞黏附分子(EpCAM)最早在结肠癌细胞中被发现,其可参与调节细胞的黏附、增殖、分化、迁移及信号转导等过程。正常情况下,EpCAM仅表达于正常上皮细胞,然而研究发现,其在人类上皮细胞源性恶性肿瘤中存在且高表达。EpCAM参与肿瘤进展的多个环节,其在肿瘤中独特的表达模式也使其成为最重要的肿瘤生物标志物之一。本文综述了近年来EpCAM作为肿瘤生物标志物的研究进展,以及其在肺癌、乳腺癌和部分消化系统肿瘤治疗中的潜在应用,揭示了EpCAM在肿瘤发展中的重要作用,为其作为治疗靶点提供了科学依据。

上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征患者唇腺组织上皮细胞的表达与病情严重程度相关

目的探索上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征(SS)唇腺组织中的表达情况以及其与临床指标的相关性。方法收集57例SS患者及25例健康对照组的唇腺组织,采用免疫组织化学染色法检测唇腺组织中EpCAM细胞外结构域(EpCAM^(EX))及胞内结构域(EpCAM^(ICD))的表达情况,分析其与临床指标的相关性;重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡后,采用流式细胞术检测其EpCAM^(EX)及EpCAM^(ICD)的表达。结果正常对照组腺上皮细胞膜EpCAM^(EX)高表达,胞质内低表达,胞核不表达;随SS患者病情加重EpCAM^(EX)胞膜表达降低,胞质内EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)表达增高,且唇腺形态学改变较为突出;EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)染色评分与SS疾病严重程度呈正相关。且诱导上皮凋亡后,其EpCAM^(EX)表达降低,而EpCAM^(ICD)表达增高。结论SS患者唇腺组织上皮细胞EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)的表达与SS患者病情严重程度相关,且EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)的表达与凋亡相关。

上皮细胞黏附分子表达与乳腺癌的分子分型及预后

目的:探讨上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)在乳腺癌及其分子亚型中表达的临床病理及预后意义。方法:采用免疫组织化学Max VisionTM法检测835例乳腺浸润性导管癌中Ep CAM的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果:Ep CAM的阳性表达与组织学分级、淋巴结转移、肿瘤大小、ER和PR表达、HER2表达和临床分期均有关(均P<0.05),与绝经状态无关(χ2=0.117,P=0.733)。在腺腔A型、腺腔B型(HER2-)、腺腔B型(HER2+)、HER2过表达型及三阴型乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中,Ep CAM的阳性表达率分别为19.2%,73.0%,48.9%,72.2%和62.1%。Log-rank检验和单因素COX分析显示Ep CAM阳性患者的预后较差(均P<0.001),并与三阴型、腺腔B型(HER2-)和HER2过表达型预后有关(均P<0.05)。多因素COX分析显示Ep CAM阳性表达与三阴型和HER2过表达型预后差相关(均P<0.05)。结论:Ep CAM可能与乳腺癌进展有关,并与分子分型相关,在乳腺癌总体上及三阴型和HER2过表达型中是一种独立的预后因子。

色素内镜联合细胞黏附分子检测对肠上皮化生型Barrett食管的诊断价值

目的：探讨联合色素内镜Lugol′s液食管染色及上皮细胞黏附分子（EpCAM ）检测对Barrett食管（BE）的诊断价值。方法将内镜下怀疑BE的患者随机分为A、B两组，A组（实验组）患者49例，行2％ Lugol′s液食管染色，在食管不着色区或淡着色区靶向活检2～4块行常规苏木精-伊红（HE）染色病理检查，同时行免疫组化检测EpCAM 表达情况；B组（对照组）46例，采用传统随机活检2～4块，送 HE染色病理检查。结果实验组病理诊断BE 39例，其中15例为肠化型，经免疫组化染色有28例EpCAM 阳性表达；对照组常规病理确诊BE 23例，其中8例为肠化型BE。两组BE检出率差异有统计学意义（P＜0．05）；两组最终肠化型BE检出率差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 Lugol′s液食管染色指导下靶向活检可以提高BE的检出率，联合Ep-CAM检测可显著提高肠化型BE的诊断率。

RNA干扰技术抑制上皮性钙黏附分子表达对HO-8910细胞的影响

目的探讨通过RNA干扰(RNAi)技术下调上皮性钙黏附分子(E-cad)表达后,对人卵巢浆液性囊腺癌HO-8910细胞的侵袭、迁移能力的影响。方法将针对E-cad的双链小干扰RNA(siRNA)转染入HO-8910细胞中,抑制E-cad基因表达;采用免疫荧光法及Western blotting检测RNAi效果;用Transwell小室法检测RNAi后细胞侵袭、迁移能力的改变。结果RNAi后HO-8910细胞E-cad表达显著下降,由63.7%降低为11.9%(P<0.01),RNAi有效;细胞对细胞外基质的侵袭能力明显提高,穿过滤膜的细胞数由13.4±3.93增至42.0±4.15(P<0.01);细胞迁移能力也明显提高,穿过滤膜的细胞数由23.24±3.71增至82.0±5.51(P<0.01)。结论人卵巢浆液性囊腺癌的侵袭、转移等恶性行为可能与E-cad基因表达下降有关。

黄芪多糖对内毒素刺激体外培养肠上皮细胞间黏附分子-1的调节作用

目的观察黄芪多糖对内毒素脂多糖（LPS）体外刺激小肠上皮IEC-6细胞株产生细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的调节作用，探讨黄芪多糖对损伤IEC-6细胞的免疫保护机制。方法以IEC-6细胞株为研究对象，将培养的细胞分别加入50、100、200和500mg／L不同浓度的黄芪多糖，孵育1h，以10mg／L的LPS刺激1～4h后，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测ICAM-1 mRNA的表达变化。结果LPS刺激IEC-6细胞后ICAM-1 mRNA表达水平较正常对照组显著升高（0．74±0．06比1．45±0．07，P〈0．01）；黄芪多糖100、200和500mg／L时的ICAM-1 mRNA表达量分别为0．97±0．06、0．82±0．07和0．65±0．05；黄芪多糖500mg／L作用1h和4h的ICAM-1 mRNA抑制率分别为32．7％（1．19±0．06和0．80±0．10）和36．3％（0．93±0．07和0．72±0．08），说明黄芪多糖呈浓度和时间依赖性地抑制了LPS诱导IEC-6细胞表达ICAM-1 mRNA的水平（P均〈0．01）。结论黄芪多糖具有抑制LPS刺激IEC-6细胞分泌ICAM-1的作用，对LPS所致的肠道损伤具有保护作用。

上皮细胞黏附分子在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨上皮细胞黏附分子(EPCAM)在胃癌组织中的表达及其与胃癌浸润转移及预后的关系,以及EPCAM作为胃癌早期诊断、预后判断和治疗靶点的临床价值。方法应用免疫组织化学法检测436例胃癌组织及92例癌旁非肿瘤胃黏膜组织中EPCAM的表达情况,分析并探讨EPCAM的表达与临床病理参数及预后的关系。结果在92例非肿瘤胃黏膜组织中,50例(54.3%)EPCAM蛋白为阴性表达,42例(45.7%)呈弱阳性表达。在436例胃癌组织中,EPCAM蛋白高表达179例(41.1%),低表达257例(58.9%),主要在细胞包膜表达。EPCAM蛋白的表达强度与肿瘤部位、肿瘤大小、Lauren分型、浸润深度、淋巴结分期、TNM分期、淋巴结转移和远处转移密切相关(均P<0.01),而与患者性别、分化程度、组织学类型无关(均P>0 05)。EPCAM高表达患者的5年生存率(57 2%)明显低于EPCAM低表达胃癌患者的5年生存率(17.3%,P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期EPCAM高表达胃癌患者的5年生存率明显低于EPCAM低表达患者的5年生存率(P<0.05);Ⅳ期EPCAM高表达和低表达胃癌患者的5年生存率无统计学差异。EPCAM表达、远处转移和TNM分期(均P<0.05)是胃癌的独立预后因素。结论 EPCAM在胃癌中高表达,且其表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤的TNM分期显著相关,提示EPCAM可以作为胃癌的早期诊断的筛查指标以及治疗的靶点之一。

上皮性卵巢癌中癌胚抗原相关细胞黏附分子1和CD105的表达

目的探讨上皮性卵巢癌中癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)和血管内皮标志物CD105的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法应用免疫组织化学法检测62例上皮性卵巢癌组织及60例上皮性卵巢良性肿瘤组织中CEACAM1和CD105的表达,并记录微血管密度(MVD),对上皮性卵巢癌组织及良性肿瘤组织中CEACAM1、CD105的表达进行相关性分析。结果 CEACAM1和CD105在上皮性卵巢恶性肿瘤表达较高,而在卵巢良性肿瘤组织中表达较低。CEACAM1和CD105的表达与卵巢癌的病理分期呈显著正相关(r=0.847、0.776,P<0.01),随着上皮性卵巢癌恶性程度的升高,CEACAM1和CD105的表达均逐渐增高;CEACAM1的表达与CD105-MVD呈正相关(r=0.890,P<0.01)。结论 CEACAM1在卵巢组织中的表达增加可能与卵巢癌的发生和发展有关;CD105-MVD对评估上皮性卵巢癌恶性程度有重要意义;CEACAM1可能作为一种促血管生长因子而刺激肿瘤血管的生成。

上皮细胞黏附分子、波形蛋白和N-钙黏素在乳腺癌分子亚型中的表达及相关性

目的:研究上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏素(N-cadherin)在乳腺癌及其分子亚型中的表达及相关性。方法:通过免疫组织化学方法检测835例乳腺癌组织中Ep CAM,vimentin和N-cadherin的表达情况,分析其与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果:Ep CAM,vimentin及N-cadherin在835例乳腺癌中的表达率分别为53.4%,11.4%和9.7%;其阳性率随着肿瘤体积增大、组织学级别升高、淋巴结阳性、TNM分期增高、雌激素受体和孕激素受体阴性而增高(均P<0.05)。在腺腔A型、腺腔B型(HER2–)、腺腔B型(HER2+)、HER2过表达型及三阴型中,Ep CAM的阳性表达率分别为19.2%,73.0%,48.9%,72.2%和62.1%;vimentin为3.9%,11.4%,14.1%,11.1%和20.5%;N-cadherin为7.0%,5.7%,12.0%,12.2%和17.4%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在835例乳腺癌及三阴型乳腺癌中Ep CAM表达与vimentin和N-cadherin均呈正相关性。结论:Ep CAM在三阴型乳腺癌中呈高表达,并与上皮间质转化标志物相关,可能参与该型乳腺癌的发展、转移过程。

非小细胞肺癌患者外周血上皮细胞黏附分子和黏蛋白的诊断价值

目的:研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血中上皮细胞黏附分子(epithelial celladhesion molecule,EpCAM)mRNA和黏蛋白1(MUC1)mRNA表达水平及临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测NSCLC患者(n=45)与肺部良性疾病患者(n=21)外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达情况;分析NSCLC患者EpCAM mRNA和MUC1 mRNA阳性表达率与临床病理特征的相关性。结果:NSCLC患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达水平分别为4.42±0.56,2.30±0.32;肺部良性疾病患者外周血中EpCAMmRNA和MUC1 mRNA的表达水平分别为2.48±0.26,1.61±0.06;两者相比,差异均有统计学意义(EpCAM mRNA,P=0.025;MUC1 mRNA,P=0.018)。NSCLC患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA阳性表达率分别与肺部良性疾病患者比较,差异均有统计学意义(P均=0.001)。NSCLC患者外周血中这两种基因表达的阳性率与其年龄、性别及病理类型无明显相关性;而与TNM分期显著相关,Ⅲ+Ⅳ期NSCLC患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA阳性表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期患者(EpCAM mRNA,P=0.021;MUC1 mRNA,P=0.005)。结论:检测外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达有助于NSCLC的诊断,尤其对血液微转移的检出具有重要的临床参考价值。

细胞间黏附分子-1和多聚免疫球蛋白受体在唾液腺上皮细胞中的表达及临床意义

目的探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和多聚免疫球蛋白受体(p IgR)在干燥综合征患者和健康人群唾液腺上皮细胞的表达差异及临床意义。方法收集50例干燥综合征患者(研究组)和40例健康者(对照组)唾液腺上皮细胞,分别运用RTPCR技术、免疫组化技术检测唾液腺上皮细胞中ICAM-1及p IgR的表达情况。结果研究组唾液腺上皮细胞中ICAM-1 mRNA表达水平和ICAM-1蛋白表达水平分别为(6. 573±0. 412)和(0. 419±0. 027),对照组分别为(0. 641±0. 342)和(0. 209±0. 020),研究组表达水平均明显高于对照组(P均<0. 05),研究组p IgR mRNA表达水平和p IgR蛋白表达水平分别为(0. 416±0. 118)和(0. 237±0. 037),对照组分别为(5. 064±0. 275)和(0. 403±0. 018),研究组表达水平均明显低于对照组(P均<0. 05)。结论 ICAM-1、p IgR异常表达与干燥综合征密切相关,ICAM-1高表达及p IgR低表达可能是诱发干燥综合征的一个重要发病机制。

曲安奈德对高糖培养人视网膜色素上皮细胞细胞间黏附分子-1表达的影响

目的:观察曲安奈德(TA)对高浓度葡萄糖条件下体外培养人视网膜色素上皮(hRPE)细胞细胞间黏附分子-1(I-CAM-1)表达的影响。方法:用MTT方法检测不同浓度(0.01,0.10和1.00g/L)的TA对hRPE细胞增生的影响,用免疫荧光法检测加用和未加用0.10g/LTA的30.0mmol/L葡萄糖作用1,2和3d后hRPE细胞表面ICAM-1的表达强度。结果:在0.01～1.00g/L浓度TA的作用下,hRPE细胞生长受到抑制,呈剂量依赖性和时间依从性。加用0.10g/LTA的30.0mmol/L葡萄糖作用1,2和3d后,hRPE细胞表面荧光染色密度分别比未加用TA的30.0mmol/L葡萄糖作用下荧光着色减弱20%,25%和50%,有统计学显著性差异(P<0.05)。结论:TA可以抑制体外高浓度葡萄糖培养的hRPE细胞的增生,也抑制高糖作用下hRPE细胞表面的ICAM-1表达。

白介素-1β对小鼠着床窗口期子宫内膜上皮细胞分泌基质金属蛋白酶-9及细胞黏附分子-1的影响

目的研究白介素-1β(IL-1β)对小鼠着床窗口期子宫内膜上皮细胞分泌金属蛋白酶-9(MMP-9)及细胞黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法离体培养着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞,用IL-1β作为处理因素,通过免疫组织化学SP法对子宫内膜上皮细胞MMP-9、ICAM-1蛋白的表达进行检测。结果随着IL-1β浓度的增加,原代培养的子宫内膜上皮细胞分泌MMP-9及ICAM-1表达量均呈浓度依赖性升高(P<0.05)。结论一定水平的IL-1β可以促进子宫内膜上皮细胞MMP-9及ICAM-1的分泌,有利于胚胎着床。

甘草总黄酮对肝癌可溶性细胞间黏附分子-1及可溶性E-上皮钙黏蛋白的影响

目的:探讨甘草总黄酮抗肝癌作用及其机制。方法:用Walker256肝癌细胞和Wistar大鼠建立大鼠肝癌模型,A组:空白对照组(10只);B组:阳性对照药替加氟片组(20只);C组:甘草总黄酮低剂量组(20只);D组:甘草总黄酮高剂量组(20只);E组:模型组(20只)。用ELISA法检测各组血清中可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)和上皮型钙黏蛋白(E-cad)含量。结果:E组的sICAM-1和E-cad含量明显高于其他各组(P<0·01或P<0·05),C组与B组间差异无统计学意义(P>0·05);E组的肝重系数明显大于其他各组(P<0·01)。结论:甘草总黄酮可明显降低肝癌大鼠血清中sICAM-1和E-cad,其抗肝癌机制可能是干预由E-cad介导的细胞信号转导作用,开发甘草总黄酮作为肝癌的预防和治疗药物具有一定的价值。

人上皮细胞黏附分子融合蛋白真核表达载体的构建、表达及初步鉴定

目的 :构建pIg EpCAM及pEGFP EpCAM真核表达载体 ,并在COS7细胞中表达。方法 :用PCR扩增EpCAMcDNA ,酶切后分别与pIg及pEGFP两种载体连接 ,用脂质体法转染COS7细胞。用免疫沉淀法检测pIg EpCAM的表达产物 ;用荧光显微镜观察EpCAM GFP的表达。结果 :DNA序列测定的结果显示 ,pIg EpCAM及pEGFP EpCAM载体的构建正确。免疫沉淀的结果显示 ,转染pIg EpCAM的COS7细胞的培养上清中含有相对分子质量 (Mr)为 6 5 0 0 0的融合蛋白 ,该蛋白与抗人IgGFc段的mAb具有良好的免疫反应性。荧光显微镜观察可见 ,转染空载体pEGFP的COS7细胞中绿色荧光均匀地分布于胞质和胞核 ;而转染pEGFP EpCAM的COS7细胞中绿色荧光主要分布于细胞表面。结论 :成功地构建了两种EpCAM的真核表达载体 ,并在COS7细胞中表达 ,为EpCAM的功能研究创造了条件 。

上皮细胞黏附分子在基底样型乳腺癌中的表达及意义

目的探讨上皮细胞黏附分子(EpCAM)在基底样乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测EpCAM在48例基底样乳腺癌、71例非基底样乳腺癌、20例癌旁正常乳腺组织标本中的表达情况。结果 EpCAM在基底样乳腺癌组织中的阳性过表达率为77.1%,高于非基底样乳腺癌(56.3%)和正常乳腺组织(15.0%)(P<0.05);EpCAM的过表达与基底样乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移、临床分期相关(P<0.05)。结论 EpCAM在基底样乳腺癌中高表达,并有可能参与了基底样乳腺癌的发生、发展,有望成为提示基底样乳腺癌预后的分子生物学标志和靶向治疗的潜在靶点。

人近端肾小管上皮细胞黏附分子CD_(146)表达对细胞凋亡的影响

目的:探讨人近端肾小管上皮细胞(HK-2)黏附分子CD146表达与细胞凋亡的关系。方法:体外培养的HK-2细胞在不同浓度葡萄糖和不同浓度甘露醇刺激下分别作用24h、48h、72h,经流式细胞仪(FCM)检测各组HK-2细胞CD146的表达和凋亡率的变化。结果:正常糖浓度下HK-2微弱表达CD146,且延长作用时间对表达无影响;随糖浓度升高,CD146表达上调,细胞凋亡率也增高,延长刺激时间可促进CD146表达和细胞凋亡(P<0.05);当糖浓度达到40mmol/L,刺激时间达到48h,CD146表达显著升高(P<0.05),HK-2细胞凋亡率也显著上升(P<0.05);甘露醇对HK-2细胞CD146表达和细胞凋亡的促进作用较葡萄糖的作用显著降低(P<0.01)。结论:HK-2组成性表达CD146,高糖诱导CD146表达,甘露醇诱导作用较高糖弱;高糖诱导HK-2凋亡,其凋亡作用与CD146表达增高联系密切,提示黏附分子CD146对细胞生存有重要影响。

上皮细胞黏附分子与肿瘤诊断及治疗的研究进展

上皮细胞黏附分子(Ep CAM)为一种跨膜糖蛋白,表达于上皮组织和多数上皮源性恶性肿瘤中,与细胞的黏附、迁移、增生、分化以及肿瘤的发生、进展等有关。近年来,Ep CAM被认为是肿瘤的干细胞标记,与其诊断、治疗及预后判定相关。以Ep CAM阳性循环肿瘤细胞为基础的检测技术也被逐步开发应用。目前,Ep CAM抗体主要应用于上皮源性恶性肿瘤的临床研究及治疗,但仍有待于进一步研究和探讨。

缺氧复氧后肾小管上皮细胞黏附分子1的表达及胡黄连提取物对其的作用

目的:观察缺氧复氧后肾小管上皮细胞细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达及胡黄连提取物对其的影响。方法:建立人肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤模型,分别用不同浓度胡黄连提取物(10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml)进行预干预,采用流式细胞术不同组细胞内氧化应激水平,流式细胞术检测细胞ICAM-1蛋白表达,RT-PCR法测定细胞ICAM-1mRNA表达。结果:正常情况下肾小管上皮细胞氧化应激水平极低,缺氧复氧后肾小管上皮细胞内氧化应激水平明显升高,细胞ICAM-1蛋白和mRNA表达上调,且随缺氧时间的延长,细胞内氧化应激水平逐渐升高(P<0.05),ICAM-1表达逐渐增强(P<0.05);胡黄连提取物呈剂量关系抑制细胞内氧化应激水平(P<0.05),同时呈剂量关系抑制ICAM-1表达的上调(P<0.05)。结论:缺氧复氧导致肾小管上皮细胞内氧化应激增强,进而诱导ICAM-1表达上调;胡黄连提取物可以通过抑制细胞内氧化应激抑制ICAM-1的上调。

高糖环境下舒洛地特对大鼠近端肾小管上皮细胞增殖及细胞间黏附分子1表达的影响

目的探讨舒洛地特对高糖培养的大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E）增殖和细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法将NRK52E细胞用5．6mmol／L葡萄糖（NG组）、25mmol／L葡萄糖（HG组）、25mmol／L葡萄糖联合不同浓度舒洛地特（终浓度分别为0．5LRU／ml、1．0LRU／ml、2LRU／ml）于96孔板中分别培养24h、48h、72h后，运用MTT法测定细胞增殖变化。24h后，运用RT-PCR和Western blotting方法检测ICAM-1mRNA和蛋白质的表达。结果HG组细胞增殖及ICAM-1的表达均增强，舒洛地特组能抑制这种趋势并且呈剂量依赖性。结论舒洛地特能通过减少ICAM-1的表达而起到保护肾脏的作用。