恶性间叶肿瘤的间叶-上皮表型转化研究进展

相对于上皮性肿瘤的上皮-间叶表型转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)及间叶-上皮表型转化(mesen-chymal to epithelial transition,MET)的研究,恶性间叶性肿瘤中MET相关研究较少。MET在分子水平上反映为上皮性标志物如E-钙粘素E-cadherin的上调和间叶性标志物如波形蛋白Vimentin的下调,其过程涉及始动信号、转录因子调节、表面标志物的改变、信号通路改变等多个环节。本文概述了恶性间叶肿瘤中与MET紧密相关的TGF-β等始动因素、SNAI等关键转录因子、mi RNA调节因素对重要细胞信号通路等影响及MET对肿瘤的演进及转归的影响等方面的研究,为针对MET的临床应用奠定基础。

间叶上皮表型转化在肿瘤发生及演进中的作用

间叶上皮表型转化是指"间叶"向"上皮"细胞表型的可逆性转化,而非不同组织来源细胞间的转变。体内外实验证明,间叶上皮表型转化在恶性肿瘤侵袭和转移中发挥重要作用,现本文就其发展过程、研究现状进行综述。

红花对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞表型转化的抑制作用

目的目的观察红花对结扎单侧输尿管诱导的肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞表型转化的抑制作用。方法结扎单侧输尿管方式复制肾间质纤维化实验动物模型,分别给以红花4.0g·kg-1·d-1、缬沙坦10mg·kg-1·d-1经口灌服,采用免疫组化、原位杂交方法检测大鼠肾脏肾小管上皮细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原的表达。结果单侧输尿管结扎大鼠肾脏α-SMA动蛋白和Ⅲ型胶原的阳性面积及积分光密度较假手术组明显增强,红花及缬沙坦可显著性抑制其表达。结论红花可以通过抑制肾小管上皮细胞的表型转化拮抗肾间质纤维化。

Snail1外源性过表达诱导HepG2细胞上皮间叶样表型转化的实验研究

目的探讨Snail1蛋白诱导肝癌细胞发生上皮间叶表型转化并增强其侵袭转移能力的效应。方法利用重组腺病毒载体pAdEasy-SNAI1高效感染HepG2肝癌细胞株,诱导外源性Snail1蛋白过表达,以空载腺病毒pAdEasy-GFP作为对照。利用RT-PCR、Western blot和细胞免疫组织化学的方法,检测转染后HepG2细胞Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的mRNA转录和蛋白表达水平。随机运动实验及侵袭实验检测HepG2细胞转染目的基因后运动侵袭能力的改变。结果①pAdEasy-SNAI1高效感染HepG2细胞,与对照组相比SNAI1mRNA和Snail1蛋白表达均显著增强(分别为1.591±0.090、0.414±0.031,0.995±0.009、0.423±0.002,P<0.01),Snai1蛋白在胞浆和胞核着色明显强化。②实验组HepG2细胞,在mRNA和蛋白水平E-cadherin表达均显著受到抑制(分别为0.528±0.037、1.668±0.065,0.284±0.003、1.067±0.011,P<0.01),N-cadhrein、Vimentin表达则明显上调(N-cadhrein:0.945±0.029、0.600±0.015,0.655±0.007、0.226±0.007,P<0.01;Vimentin:1.630±0.123、0.291±0.024,0.692±0.009、0.219±0.005,P<0.01);③实验组随机运动实验中各观察时相点细胞空白区均小于对照组;侵袭实验中,实验组穿膜细胞数多于对照组(59.4±7.48、23.9±4.15,P<0.01)。结论外源性Snail1蛋白过表达能诱导HepG2细胞出现EMT样变化,细胞运动、侵袭能力增强。

胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠肝脏上皮间质表型的变化

目的观察胆管结扎诱导肝纤维化大鼠肝细胞是否发生上皮间质表型变化。方法 24只Wistar大鼠分为假手术组和胆管结扎组,运用HE及Massion染色检测肝纤维化变化;免疫印迹方法检测大鼠肝脏中上皮标志E-钙蛋白、白蛋白和I型胶原、波形蛋白的表达;采用免疫荧光双染的方法检测成纤维细胞特异性蛋白(FSP-1)+波形蛋白;FSP-1+I型胶原;FSP-1+白蛋白;白蛋白+I型胶原等蛋白在细胞中的定位。结果胆管结扎组大鼠的ISHAK纤维化评分(4.42±1.16 vs 0.00±0.00,P=-0.000),METAVIR纤维化评分(3.42±0.67 vs 0.00±0.00,P=-0.000)及Massion染色中胶原含量(0.30±0.06 vs 0.11±0.07,P=-0.000)较假手术组明显增高。与假手术组相比,胆管结扎组中上皮标志白蛋白(0.53±0.63 vs 1.12±0.01,P=0.000)、E-钙蛋白(0.21±0.01 vs 0.44±0.01,P=0.000)明显减少,而I型胶原(8.21±0.12 vs 0.24±0.01,P=-0.000)、波形蛋白(3.14±0.01 vs 0.37±0.01,P=0.000)显著增高。胆管结扎组中共表达FSP-1+波形蛋白、FSP-1+I型胶原、FSP-1+白蛋白、白蛋白+I型胶原的细胞较假手术组明显增多。结论在胆管结扎组诱导的肝纤维化大鼠肝脏中上皮标记减少,间质标志增加,提示有部分上皮细胞可能发生了上皮间质表型转化。

激活Shh信号通路影响结肠癌细胞上皮间质表型转化的研究

目的阐释激活Shh信号通路对结肠癌上皮间质表型转化(EMT)的影响。方法常规培养结肠癌细胞株HT-29细胞,设立对照组(培养液中加入PBS)、实验组(即信号通路活化,培养液中加入重组Shh配体);采用Westen-blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的变化;RT-PCR检测上皮间质转化标志物E-cadherin和Vimentin在mRNA水平的变化;行HE染色观察细胞形态变化的改变。结果 Westen-blot检测蛋白提示,结肠癌HT-29细胞中,Shh信号通路激活可促进Vimentin蛋白表达(P<0.05),抑制E-cadherin蛋白表达(P<0.05);RT-PCR检测:实验组中E-cadherin和Vimentin的mRNA表达量差异具有统计学意义(P<0.05),与对照组相比较,实验组的Vimentin的mRNA表达量显著升高(P<0.05),E-cadherin的表达量明显降低(P<0.05);HE细胞染色提示对照细胞呈梭形,细胞间更紧密地连接,并与信号通路阻断组细胞无显著差异,而实验组细胞呈椭圆形或圆形,连接疏松,部分细胞呈团簇集群样生长。结论 EMT在结肠癌转移过程中起着重要的作用,而Shh信号通路的激活可促进结肠癌细胞EMT的发生、发展。

罗格列酮对糖尿病兔肾小管上皮细胞表型转化与NADPH氧化酶的影响

目的:研究罗格列酮对NADPH氧化酶表达的影响,探讨其对肾小管上皮细胞表型转化(EMT)的可能作用机制。方法:取28只新西兰大白兔,随机分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)和罗格列酮干预组(RGT组),DM组和RGT组以四氧嘧啶耳缘静脉注射,RGT组每天给予罗格列酮1.0mg/kg灌胃。第16周末时测定各组血糖、血脂、肌酐清除率(Ccr)、超氧化物歧化酶(SOD);免疫组织化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Western印迹检测NADPH氧化酶亚基p22phox的蛋白表达。结果:与NC组比较,DM组Ccr明显升高(P<0.01),SOD明显降低(P<0.05);p22phox和α-SMA蛋白表达升高;与DM组比较,RGT组p22phox和α-SMA蛋白表达降低(P<0.05),而其他指标也有改善。结论:RGT可能通过抑制糖尿病兔肾脏NADPH氧化酶活性,减少肾内氧化应激,阻断α-SMA表达,从而抑制EMT。

8-溴-7-甲氧基白杨素逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化

目的研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)能否有效逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法体外培养SiHa细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养得到球形成细胞(sphere forming cells,SFCs)。以BrMC处理SFCs后,通过单层贴壁培养观察细胞形态。Western blot分析SFCs的E-cadherin、N-cadherin和Twist1蛋白表达水平。结果与亲本细胞比较,SiHa细胞系SFCs呈现间叶样细胞(梭形细胞)形态,并低表达E-cadherin和高表达N-cadherin蛋白。BrMC(1.0μmol·L-1)处理72 h后,SFCs由梭形细胞转变为多边形细胞;BrMC(0.1和1.0μmol·L-1)作用24 h,SFCs中E-cadherin表达上调,N-cadherin和Twist1蛋白表达降低。结论 BrMC具有逆转SiHa细胞系SFCs的EMT作用,其机制涉及降低Twsit1蛋白表达。

NR2F2对肿瘤上皮细胞-间充质表型转化的调控

肿瘤是一种威胁人类健康的恶性疾病,也是世界性的医学难题。一直以来,恶性肿瘤的发病率和死亡率没有得到有效遏制,仍呈逐年上升趋势。肿瘤发生浸润转移,以及肿瘤治疗过程中产生的药物抵抗是肿瘤复发和患者死亡的重要原因。近年,上皮细胞-间充质表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)被认为是肿瘤发生浸润转移的起始步骤和肿瘤细胞耐药的主要原因之一。

加味升阳益胃汤对大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

为探讨补脾肾活血升阳除湿法组方加味升阳益胃汤对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响,对72只大鼠采用尾静脉二次注射阿霉素法建立模型。实验动物分为空白组、模型组、苯那普利组、中药低剂量组及中药高剂量组。观察实验大鼠治疗前后一般状态;将肾组织病理切片进行HE、Masson染色,观察治疗前后病理改变及肾间质病变情况;采用免疫组化半定量分析法检测肾小管间质中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。结果表明,8周后,与模型组比较,中药低、高剂量组、苯那普利组大鼠尿蛋白下降明显,且差异有显著意义(P<0.05),中药高剂量组的肾小管间质损害评分下降明显(P<0.05),中药低、高剂量组及苯那普利组肾间质中α-SMA过度表达减少,且差异有显著意义(P<0.05),肾小管间质α-SMA的表达水平与肾小管间质损害程度有明显相关性(P<0.05)。结论:加味升阳益胃汤能减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白排泄量,能下调肾小管间质α-SMA表达,从而抵制肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞(间充质细胞)转化来减轻肾小管间质损害。

胆管结扎与再通对大鼠肝内细胞表型和NOX4蛋白表达的影响

目的设计并建立胆管结扎及结扎后再通的大鼠肝纤维化模型,观察胆管结扎及再通对大鼠肝组织内细胞上皮-间质表型和氧化应激相关蛋白表达的影响。方法 12只雄性Wista大鼠随机分为假手术组、胆管结扎2周组、胆管结扎4周组和胆管结扎2周后再通2周组,通过组织HE染色、Masson染色等方法评估模型大鼠肝纤维化病变程度;通过免疫组化和Western blot等方法并检测上皮、间质标记蛋白及氧化应激相关蛋白的表达情况。结果相较于假手术组,随着胆管结扎时间的延长,模型组大鼠肝纤维化明显加重,α-SMA、collagen I、NOX4和Vimetin等蛋白表达显著升高,而E-cadherin表达则明显降低;结扎后再通组大鼠肝纤维化较单纯胆管结扎4周组大鼠明显减轻,NOX4及间质细胞标记蛋白表明显低于单纯结扎4周组,内皮细胞标记蛋白表达较单纯结扎4周组则显著升高。结论胆管结扎可上调大鼠肝内间质表型相关蛋白及NOX4蛋白的表达,同时抑制上皮表型相关蛋白的表达;当实施再通手术后,原胆管结扎大鼠肝内上皮表型相关蛋白表达增加,而间质表型相关蛋白及NOX4蛋白的表达明显减少。

高糖对小鼠足细胞表型转化的诱导作用及机制探讨

目的观察高糖对小鼠足细胞表型转化的诱导作用,并探讨其机制。方法将传代培养后的小鼠足细胞随机分为A、B、C三组,A组常规培养,B组加入终浓度为30 mmol/L的葡萄糖、C组加入终浓度为30 mmol/L的葡萄糖及10μmol/L的蛋白质酪氨酸激酶(JAK2)特异性阻断剂α-氰-(3,4-二羟基)-N-苄基肉桂酰胺(AG490)进行培养,48 h后收集细胞,采用Western blot法检测足细胞中自身标志物人肾病蛋白(Nephrin)、间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及磷酸化蛋白质酪氨酸激酶(p-JAK2)蛋白,采用RT-PCR检测足细胞中的Nephrin、α-SMA mRNA。结果 A组足细胞中Nephrin、α-SMA、p-JAK2蛋白积分光密度值分别为0.96±0.01、0.21±0.02、0.39±0.01,B组分别为0.58±0.01、0.66±0.07、0.71±0.02,C组分别为0.87±0.04、0.35±0.02、0.41±0.04;A组足细胞中Nephrin、α-SMA mRNA的相对表达量为1.53±0.04、0.57±0.01,B组分别为0.82±0.09、0.89±0.03,C组分别为1.30±0.04、0.78±0.03。B组与A组比较,P均<0.05;C组与B组比较,P均<0.05。结论高糖可通过激活JAK/STAT信号途径诱导足细胞发生表型转化。

肝癌患者循环肿瘤细胞表型与临床病理特征的相关性研究

目的探讨原发性肝癌及复发性肝癌患者外周血中不同表型循环肿瘤细胞(CTCs)与其临床病理特征的相关性及其临床应用价值。方法回顾性分析2016年11月至2018年8月陆军军医大学第一附属医院肝胆科收治的111例原发性肝癌患者及56例复发性肝癌患者的临床资料。所有患者采用Canpatrol CTCs分型检测系统检测外周血上皮-间质表型CTCs,比较原发性与复发性肝癌患者外周血中各表型CTCs阳性率差异;分析原发性及复发性肝癌患者各表型CTCs与其临床病理特征的相关性。结果根据上皮及间质标志物将CTCs分为上皮型、间质型及混合型三种表型。原发性肝癌患者外周血上皮型CTCs、混合型CTCs、间质型CTCs的阳性率分别为30. 63%(34/111)、86. 49%(96/111)、46. 85%(52/111);复发性肝癌患者外周血上皮型CTCs、混合型CTCs、间质型CTCs阳性率分别为46. 43%(26/56)、26. 79%(15/56)、85. 71%(48/56);原发性及复发性肝癌患者外周血中上皮型、混合型、间质型CTCs阳性率差异均有统计学意义(χ~2=4. 035、23. 406、59. 522,P <0. 05)。原发性肝癌患者的上皮型CTCs与门静脉癌栓及微血管癌栓均呈正相关(r=0. 309和0. 330,P <0. 05),与肝硬化程度呈负相关(r=-0. 466,P <0. 05);混合型CTCs与微血管癌栓及门静脉癌栓分别呈正相关和负相关(r=0. 236、-0. 383,P <0. 05);间质型CTCs与肿瘤大小、门静脉癌栓、微血管癌栓、及巴塞罗那分期呈正相关(r=0. 757、0. 210、0. 708、0. 401,P <0. 05),与肿瘤分化程度呈负相关(r=-0. 243,P <0. 05)。复发性肝癌患者的上皮型CTCs与AFP及肿瘤个数呈正相关(r=0. 620、0. 391,P <0. 05);间质型CTCs与肿瘤大小、肿瘤个数呈负相关(r=-0. 335、-0. 354,P <0. 05);混合型CTCs与肿瘤大小及AFP分别呈正相关和负相关(r=0. 643、-0. 349,P <0. 05)。结论肝癌患者CTCs不同表型的阳性率与其临床病理特征具有显著相关性,可作为预测肝癌术后复发和评估疗效的辅助指标。

论肿瘤转分化

转分化是指原本委任为特殊专能性细胞系的细胞改变为另一类型细胞。在胚胎正常发育过程中的某些阶段，不同类型细胞的转变，是个体发生的重要步骤，化生实质上就是病理条件下的一种转分化现象。转分化可使肿瘤细胞形态表型不同于所来源的正常细胞。肿瘤性转分化见于肿瘤性上皮和神经内分泌细胞表型转变、肿瘤性上皮和间叶表型转变及非神经外胚叶和神经外胚叶表型转变。肿瘤细胞的演进，从最初的单克隆细胞群变为异质性细胞亚群，从原位发展至侵袭性生长以至转移，也是肿瘤细胞分化降低与一系列表型转分化的结果。鉴于这些事实，我们提出肿瘤的分化障碍不只是分化降低未分化与去分化，还应该包括转分化。

肾络通对肾间质纤维化模型小鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨肾络通治疗肾间质纤维化的可能作用机制。方法纯系C57BL/6J野生小鼠(WT)及肾上腺髓质素基因敲除杂合子小鼠(AMKO)随机分为假手术组、模型组、依普利酮组及肾络通组,每组5只。除假手术组外,其余各组结扎左侧输尿管复制肾间质纤维化小鼠模型。依普利酮组给予依普利酮100 mg/(kg·d)加入饲料喂养,肾络通组给予肾络通溶液26 g/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水0.3 ml灌胃,共10天。HE、Masson染色观察各组小鼠梗阻侧肾组织病理改变;免疫组化法及Western Blot法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肾上腺髓质素(ADM)的表达;检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。结果 WT及AMKO小鼠各组血Scr和BUN含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肾脏病理结果显示,模型组肾小管扩张、上皮细胞坏死,肾间质大量炎性细胞浸润,胶原组织沉积显著增多,依普利酮组和肾络通组可明显抑制间质炎性细胞浸润及胶原沉积。与本鼠种假手术组比较,WT模型组和AMKO模型组α-SMA、TGF-β1表达明显升高,而ADM表达明显降低(P<0.01)。与本鼠种模型组比较,依普利酮组和肾络通组α-SMA、TGF-β1表达明显降低,而ADM表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。两鼠种之间比较,AMKO假手术组、模型组、依普利酮组、肾络通组ADM表达均低于相应的WT小鼠组(P<0.05或P<0.01)。结论肾络通可能通过上调ADM表达,降低α-SMA、TGF-β1表达,从而抑制肾小管上皮细胞表型转化,减轻了肾脏病理损伤。

丙型肝炎病毒核心蛋白在胆管癌组织上皮间叶样表型转化中的作用

目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc 蛋白)在胆管癌组织浸润和转移中的作用。方法随机选取2001年1月至2006年11月间有完整随访资料的34例行根治性切除术的胆管癌患者。采用免疫组织化学方法检测胆管癌组织标本中 HCVc 蛋白、上皮性标志物及间叶性标志物的表达情况,并与临床病理学指标进行比较分析。结果 34例胆管癌组织中 HCVc 蛋白的阳性表达率是47.1%,上皮性标志物的缺失率分别为上皮性钙黏附素(E-cadherin)55.9%、α连环蛋白(α-catenin)70.6%、β连环蛋白(β-catenin)55.9%,间叶性标志物的阳性表达率分别为神经性钙黏附素(N-cadhefin)50%、波形蛋白(Vimentin)44.1%、纤维连接蛋白(Fibronectin)55.9%,HCVc 蛋白的阳性表达与 E-cadherin、α-catenin 的缺失以及 N-cadhefin、Vimentin、Fibronectin 的阳性表达相关(x^2=4.480、4.163、4.250、7.438、12.260,P 值均<0.05),并与胆管癌组织的淋巴结转移及其他脏器转移相关(x^2=5.708、4.163,P 值均<0.05)。结论 HCVc 蛋白可能通过诱导胆管癌组织上皮-间叶样表型转化的发生来促进胆管癌的浸润和转移。

活化血管内皮生长因子受体-1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮-间叶表型转化的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子受体-1（VEGFR-1）促肝细胞癌（HCC）侵袭转移的作用机制。方法用VEGFR—1的特异性配体血管内皮生长因子-B（VEGF—B）诱导活化肝癌细胞MHCC97-H，观察MHCC97-H细胞形态学改变，RT—PCR和Weaemblot检测MHCC97-H细胞上皮标志物钙黏蛋白（E—cad）、连环蛋白-α（α-cat）in间叶标志物波形蛋白、神经钙黏蛋白（N—cad）的mRNA和蛋白质表达改变，细胞荧光免疫组织化学法检测E—cad、α-cat和波形蛋白、N—cad表达部位改变，细胞侵袭和迁移试验检测MHCC97-H细胞侵袭和运动能力的改变。组间比较采用单因素方差分析。结果VEGFR—1活化后MHCC97-H细胞变成梭形、纺锤状，细胞间隙增宽，有的伸出伪足；活化前上皮标志物E—cad、α-cat的mRNA吸光度值（4值）分别为12．55±2．98、14．23±1．36，活化后E—cad、α-cat的月值分别为6．78±3．66、6．18±0．92，活化后上皮标志物的mRNA表达显著下调，F=17．21，P〈0．05。活化前上皮标志物E-cad、α-cat蛋白的A值分别为20878±11．54、7520．45±8．66，活化后E—cad、α-cat的A值分别为8031．23±10．44、5425．15±7．37，活化后上皮标志物的蛋白表达显著下调，F=30．49，P〈0．05。波形蛋白、N-cad蛋白的A值分别为6100．22±12．73、1244．64±10．27，活化后的分别为12836．99±9．67、4586．70土8．58，活化后间叶标志物的蛋白表达显著上调，F=19．16，P〈0．05。上皮标志物E-cad和α-cat在胞膜表达减少，胞质中的表达增加，波形蛋白和N—cad在胞质中表达显著增加；MHCC97-H细胞运动和侵袭能力显著增强，与活化前相比，F=20．13，P〈0．05，差异有统计学意义。结论VEGFR—1促进肝细胞癌侵袭和转移是通过诱导肝癌细胞发生上皮-间叶表型转化实现的。

TGF-β1对话Hedgehog-Gli1信号调控肾小管上皮细胞表型转化和胶原累积

该研究旨在探讨Hedgehog-Gli1（HH）信号在肾小管上皮细胞表型转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）和胶原累积中的作用及与TGF-β1信号的对话机制。该实验通过体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以溶剂作为对照组,以1～50 ng/m L重组蛋白sonic hedgehog（Shh）或5 ng/m L TGF-β1作为诱导组,以加入或不加入HH信号特异性阻断剂环靶明（cyclopamine,Cyp）5μmol/L为干预组。细胞培养24 h,采用ELISA、q RT-PCR、免疫细胞荧光染色和Western blot等方法检测HH信号相关分子（Ptch1、Smo和Gli1）、TGF-β1、EMT相关分子（Rac1蛋白、肌成纤维细胞标志物α-SMA和上皮细胞标志物E-cadherin）、III型胶原m RNA或蛋白的表达。结果发现,外源性Shh上调Smo和Gli1表达,抑制Ptch1表达,继而激活HH信号;HH信号活化抑制肾小管上皮细胞E-cadherin的表达,上调α-SMA、III型胶原和TGF-β1的表达。环靶明干预后,Smo表达下调,进而抑制HH信号、EMT和胶原累积,并下调TGF-β1的表达。应用TGF-β1诱导小管上皮细胞EMT,同时也上调HH信号分子Smo和Gli1的表达,下调Ptch1的表达,提示TGF-β1可诱导HH信号活化。综上所述,HH信号和TGF-β1均参与了肾小管上皮细胞EMT和胶原累积过程。HH信号活化可促进TGF-β1的表达,同时TGF-β1能激活HH信号,推测TGF-β1与HH信号可能存在交叉对话以调控EMT和胶原累积。

Shh信号通路对结肠癌细胞EMT作用的研究

目的观察Shh信号通路活化及阻断后结肠癌细胞形态及上皮间质表型转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)相关标志物上皮型钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达的改变,进一步探讨Shh信号通路对结肠癌细胞上皮间质表型转化(EMT)的作用。方法通过常规培养结肠癌细胞株HT-29,设为三组,分别是:培养液中加入PBS(对照组)、培养液中加入重组Shh配体(信号通路活化组)、培养液中加入Shh信号通路抑制剂KADD-cyclopamine(信号通路阻断组)。通过应用RT-PCR、Westen-blot试验来检测上皮间质转化标志物E-cadherin和Vimentin在m RNA水平及蛋白表达的变化。结果RT-PCR试验显示:与对照组相比较,活化组的Vimentin的m RNA表达量明显升高(P<0.05)、E-cadherin的表达量明显降低(P<0.05),信号活化组与阻断组之间的两种蛋白表达有差异且具有统计学意义(P<0.05);Westen-blot试验检测蛋白显示:激活Shh信号通路后,活化组结肠癌细胞E-cadherin蛋白表达减弱,蛋白vimentin表达增强,而阻断组结肠癌细胞E-cadherin蛋白表达增强,蛋白vimentin表达减弱,且两组相比较有统计学意义(P<0.05)。结论激活Shh信号通路能够使结肠癌细胞发生上皮间质转化,抑制其活化可以降低结肠癌细胞的转变作用,结肠癌的转移可能与EMT的发生密切相关。

Hh信号通路在慢性肝脏损伤修复中的作用

Hh信号通路最早是在果蝇体内发现的一条高度保守的信号通路，随着研究的深入，目前发现该信号通路在脊椎动物体内也相当重要，它能够调节胚胎时期组织、器官的形成以及多种成人组织损伤修复反应，其中也包括肝脏。