白术对大鼠肾阳虚型下焦水肿影响的实验研究

目的:探究白术对于肾阳虚型下焦水肿的作用,为阐明白术利水功效奠定基础。方法:采用大鼠给予盐酸多柔比星和氢化可的松方法制备肾阳虚型下焦水肿模型,以呋塞米为阳性对照,以大鼠体征,呼吸及代谢率,环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷、睾酮、血清肌酐、血清尿素氮、血清白蛋白、尿蛋白等为评价指标,探讨白术高、低剂量对肾阳虚型下焦水肿的影响。结果:白术高、低剂量对大鼠阳虚型下焦水肿均有显著影响,可改善环核苷酸水平,升高白蛋白水平,降低肌酐、尿素氮及尿蛋白含量。结论:白术可改善肾阳虚型下焦水肿病症。

不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠的利水渗湿作用研究

目的探讨不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠的利水渗湿作用。方法采用盐酸多柔比星与氢化可的松联合注射的方法建立肾阳虚下焦水肿大鼠模型。将96只造模成功大鼠随机分为模型组、阳性药组(金匮肾气丸,2.1 g·kg^(-1))、10批次不同产地茯苓水煎液组(S1~S10,7.5 g·kg^(-1)),另取8只正常大鼠作为正常组,连续灌胃给药21 d。观察记录大鼠的证候学表现及体质量变化;采用代谢笼测定大鼠24 h尿量;采用生化试剂盒测定24 h尿蛋白(UP)及血清白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)水平;采用ELISA法测定血清中抗利尿激素(ADH)水平及肾髓质中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白2(AQP2)水平;采用层次分析法确定各单一指标对总药效的权重,以总药效对不同产地茯苓进行聚类分析。结果与正常组比较,模型组大鼠的体质量、24 h尿量、血清白蛋白及总蛋白水平明显降低,24 h尿蛋白、ADH及AQP1、AQP2水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,10批次不同产地茯苓可明显上调大鼠体质量(S1、S2、S4~S10)、24 h尿量(S1~S10)、血清白蛋白(S1、S2、S4~S10)、总蛋白(S1、S4~S6、S8、S9)水平,明显下调24 h尿蛋白(S1~S10)、ADH(S1~S10)、AQP1(S1~S10)、AQP2(S1~S9)水平,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。聚类分析结果显示,10批次不同产地茯苓被聚为3大类,S2、S4为一类,S3、S6、S7和S8为一类,S1、S5、S9、S10为一类。总药效的强弱排序为:阳性药(金匮肾气丸)>湖北罗田(S2)、云南楚雄(S4)>湖北恩施(S3)、福建南平(S6)、河南商城(S7)、湖南怀化(S8)>湖北英山(S1)、云南大理(S5)、安徽岳西(S9)、云南丽江(S10)。结论不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠均可产生利水渗湿作用,可能与其调节AQP1及ADH-AQP2相关通路有关,且其作用强弱存在产地差异。

茯苓利下焦水湿有效物质部位的筛选及其作用机制研究

目的:探讨茯苓不同物质部位利下焦水湿的作用及机制。方法:采用注射"盐酸多柔比星+氢化可的松"的方法建立肾阳虚下焦水肿模型,造模14 d,造模成功大鼠分为模型组、金匮肾气丸组、茯苓水不溶性多糖组、水溶性多糖组、总三萜组。给药21 d后,收集并记录24 h尿量,分析肾组织病理变化,检测尿蛋白(UP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、抗利尿激素(ADH)、肾组织水通道蛋白1(AQP 1)和水通道蛋白2(AQP 2)的含量及腺苷酸环化酶(AC)、血管加压素受体2(V2R)、蛋白激酶A(PKA)、磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)、AQP 1和AQP 2的表达。结果:与空白组比较,模型组体质量、24 h尿量、TP、ALB、cAMP、cAMP/cGMP显著降低,UP、 ADH、cGMP、CRE、BUN、HDL-C、LDL-C含量显著升高(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,总三萜组、水溶性多糖组和水不溶性组24 h尿量、ALB、cAMP/cGMP均显著升高,ADH、CRE、BUN、HDL-C均显著降低,总三萜组体质量、TP显著升高,UP、LDL-C显著降低,水溶性多糖组体质量显著升高,UP显著降低,水不溶性多糖组cAMP显著升高,cGMP显著降低(P<0.01或P<0.05),且3个部位均能不同程度地升高模型大鼠AC、PKA、CREB的表达,降低V2R、AQP 1、AQP 2的表达。结论:茯苓三萜、水溶性多糖和水不溶性多糖均为茯苓利下焦水湿的药效物质部位,其作用机制可能与改善肾功能、调节脂质代谢紊乱以及与"AC-cAMP"调节AQP 1和AQP 2的表达有关。