苦龙胆酯苷对热消融不全的残存肝癌干细胞的影响及机制初探

目的探讨苦龙胆酯苷(Amarogentin)在热消融不全的残存肝癌细胞对肝癌干细胞的影响及其作用机制。方法水浴法建立HepG2肝癌细胞热消融不全的残存模型,流式细胞术检测细胞中CD133阳性细胞比例,qRT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞中CD133的mRNA和蛋白的表达水平。分别用低、中和高剂量的苦龙胆酯苷处理上述HepG2细胞24 h后,流式细胞术分别检测细胞中CD133阳性肝癌细胞比例、肝癌细胞的增殖率和凋亡率,qRT-PCR和蛋白印记法检测肝癌细胞中CD133、TBC1D15和p53的mRNA和蛋白的表达水平。结果随培养时间的延长,热消融不全的残存肝癌细胞中CD133阳性细胞比例、CD133和TBC1D15 mRNA和蛋白的表达水平显著提高,而p53磷酸化水平显著下降。苦龙胆酯苷处理后,热消融不全的残存肝癌细胞中CD133阳性细胞比例、细胞增殖率以及肿瘤干细胞相关分子CD133和TBC1D15的mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);凋亡率和p53磷酸化水平提高(均P<0.05)。结论苦龙胆酯苷可降低热消融不全的残存肝癌干细胞的比例和肿瘤细胞的增殖,促进细胞的凋亡,这可能与其提高肝癌干细胞p53磷酸化和抑制TBC1D15蛋白相关。

动态三维超声造影评价瑞格非尼抑制兔肝VX_(2)残癌增殖的实验研究

目的:观察瑞格非尼对不全消融残癌的抑制作用并探讨动态三维超声造影(three-dimensional contrast-enhanced ultrasound,3D-CEUS)评估靶向治疗反应的可行性。方法:构建兔VX_(2)肝原位种植瘤模型及不全消融模型,随机将实验兔分为4组(n=5):不全消融组(A组)、不全消融+靶向治疗组(B组)、靶向治疗组(C组)、对照组(D组)。在不全消融治疗前当天及治疗后7、14、21、28 d进行3D-CEUS检查并进行在机定量参数分析,实验结束后取出VX_(2)肿瘤行细胞增殖指数(Ki-67)、CD34免疫组织化学染色,计算微血管密度(microvessel density,MVD)并比较各组间差异。结果:在治疗后21和28 d,B组和C组的峰值强度(peak intensity,PI)显著低于治疗前(P值分别为0.046,0.033);而且,B组和C组的PI与D组相比差异有统计学意义(P值分别为0.027,0.031)。在治疗后28 d,B组和C组的上升支斜率(S)显著低于同时期对照组(P值分别为0.035,0.014);而且B组与A组相比差异有统计学意义(P=0.027)。治疗后28 d,各组肿瘤组织Ki-67增殖指数、MVD计数差异无统计学意义(P>0.05)结论:3D-CEUS定量分析技术可反映瑞格非尼抑制肝VX_(2)原位种植瘤残癌增殖的治疗效果。