Acinetobacter sp.WML1分离自淡水湖渔场沉积物,能降解几丁质,具有一定的应用价值。为了评价菌株WML1的生物安全性,为菌株的安全使用提供参考和保障,采用常规纸片扩散法检测耐药性,用血琼脂平板划线法检测溶血性,用溴甲酚紫显色法检测...Acinetobacter sp.WML1分离自淡水湖渔场沉积物,能降解几丁质,具有一定的应用价值。为了评价菌株WML1的生物安全性,为菌株的安全使用提供参考和保障,采用常规纸片扩散法检测耐药性,用血琼脂平板划线法检测溶血性,用溴甲酚紫显色法检测氨基酸脱羧酶活性,用试剂盒测定硝酸还原酶活性。在菌株生物安全性分析的基础上,通过单因素试验法和正交试验法进行菌株WML1产几丁质酶发酵条件的优化。结果表明,菌株WML1对多种抗生素敏感,无溶血性,无硝酸还原酶活性,有精氨酸脱羧酶活性及微弱的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶活性;其最优产酶条件为0.4%黄豆粉、0.20%半乳糖、0.03%KH2PO4、0.07%K2HPO4、0.002%FeSO_(4)、0.05%Mg SO_(4)·7H2O、0.001%ZnSO_(4)、0.60%胶体几丁质、pH 9.5、5.0%的接种量、25 m L的装液量(对应250 m L容量瓶)、37℃的培养温度,优化后的几丁质酶活为(2.72±0.09)U/m L。综上所述,不动杆菌WML1在使用安全性上危害较小,可防可控,经发酵条件优化后其所产几丁质酶的活性提高了约4.61倍,为产几丁质酶菌株的工业化应用提供了理论基础。展开更多
文摘Acinetobacter sp.WML1分离自淡水湖渔场沉积物,能降解几丁质,具有一定的应用价值。为了评价菌株WML1的生物安全性,为菌株的安全使用提供参考和保障,采用常规纸片扩散法检测耐药性,用血琼脂平板划线法检测溶血性,用溴甲酚紫显色法检测氨基酸脱羧酶活性,用试剂盒测定硝酸还原酶活性。在菌株生物安全性分析的基础上,通过单因素试验法和正交试验法进行菌株WML1产几丁质酶发酵条件的优化。结果表明,菌株WML1对多种抗生素敏感,无溶血性,无硝酸还原酶活性,有精氨酸脱羧酶活性及微弱的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶活性;其最优产酶条件为0.4%黄豆粉、0.20%半乳糖、0.03%KH2PO4、0.07%K2HPO4、0.002%FeSO_(4)、0.05%Mg SO_(4)·7H2O、0.001%ZnSO_(4)、0.60%胶体几丁质、pH 9.5、5.0%的接种量、25 m L的装液量(对应250 m L容量瓶)、37℃的培养温度,优化后的几丁质酶活为(2.72±0.09)U/m L。综上所述,不动杆菌WML1在使用安全性上危害较小,可防可控,经发酵条件优化后其所产几丁质酶的活性提高了约4.61倍,为产几丁质酶菌株的工业化应用提供了理论基础。
